Визначення білка в сечі - практичні навички педіатра
Відео: Визначення білка в сечі і спиномозговой рідини
У сечі здорової дитини білок міститься в незначній кількості і звичайними якісними пробами не виявляється. Кількість білка в сечі (протеїнурія) зростає при захворюваннях нирок, токсикозі, лейкозах, пернициозной анемії, застійних явищах в нирках, після пальпації нирок (пальпаторная альбумінурія) і фізичної перевтоми, при емоційної перевантаження, лихоманці, переохолодженні та інших станах.
Якісне визначення білка в сечі. Для якісного визначення білка в сечі найбільш широко застосовуються проба з сульфосалициловой кислотою, проба Геллера з азотною кислотою, проба кип`ятінням та ін. При користуванні пробами, заснованими на осадженні білків, щоб уникнути помилок важливо дотримуватися деякі загальні правила.
- Сеча повинна мати кислу реакцію. Якщо реакція досліджуваної сечі лужна, її злегка підкисляють додаванням оцтової кислоти. Однак кількість кислоти не повинно бути великим, щоб не викликати розчинення альбуміну.
- Сеча повинна бути прозорою. При наявності каламуті її слід видалити, не викликаючи осадження білків.
- Пробу необхідно проводити в двох пробірках - дослідної та контрольної. При відсутності контролю можна не помітити легкого помутніння сечі в дослідній пробірці.
Проба з сульфосалициловой кислотою - одна з найбільш чутливих на присутність білка в сечі. У пробірку наливають 3-5 мл сечі і додають 20% розчин сульфосалициловой кислоти з розрахунку 2 краплі на 1 мл сечі.
В іншій модифікації для постановки проби в пробірку наливають 1 мл сечі і до неї додають 3 мл 1% розчину сульфосалициловой кислоти.
У першому і другому випадках при наявності білка в сечі після додавання сульфосалициловой кислоти з`являється каламуть. Результат враховується по інтенсивності помутніння: слабо позитивна реакція (опалесценція) позначається (сл. +), Позитивна (+), різко позитивна.
Проба Геллера проводиться наступним чином: на 1-2 мл 30% розчину азотної кислоти з відносною щільністю 1,20 обережно (не змішуючи) нашаровуються кілька мілілітрів сечі. При наявності в сечі 0,033 г / л білка і більш на кордоні обох рідин утворюється біле кільце, що оцінюється як позитивна проба. При вмісті в сечі великої кількості уратів також може утворитися біле кільце, але воно розташовується трохи вище межі між рідинами. При легкому нагріванні уратное кільце зникає.
Проба кип`ятінням дає надійні результати, але тільки якщо сеча має pH 5,6. Цю пробу краще проводити в модифікації Рупперта з ацетатним буфером Банге, в який входить 56,5 мл крижаної оцтової кислоти, 118 г кристалічного уксуснокислого натрію, розчинених в 1 л води. До 1-2 мл буфера Банге додають 5 мл сечі і кип`ятять 1/2 хв. При наявності білка в сечі утворюється помутніння.
Кількісне визначення білка в сечі. Для кількісного визначення білка в сечі найбільш часто використовуються метод Есбаха, метод Брандберга - Робертс - Стольнікова, біуретова реакція Сольса і ін.
Метод Брандберга - Робертс - Стольнікова заснований на якісній пробі Геллера і дозволяє визначити наявність білка в сечі від 0,033 г / л і вище. Готується ряд пробірок. Сеча, яка містить білок, розлучається фізіологічним розчином або водою до тих пір, поки не перестане утворюватися біле кільце на кордоні рідин (реактиву Робертс - Стольнікова і сечі). Кільце на кордоні двох рідин між другою і третьою хвилинами з`являється при вмісті білка 0,033 г / л. Якщо кільце з`являється раніше ніж через кілька хвилин, сечу розводять водою. Найбільше розведення сечі, в якому утворюється кільце, містить 0,033 г / л білка. Ступінь розведення сечі в останній пробірці множать на 0,033 г / л і отримують концентрацію білка в цільної сечі.
протеїнурія. При захворюваннях нирок вона обумовлена збільшеною проникністю ниркового фільтра. Білок в сечу може потрапити і іншим шляхом (з слизових сечових шляхів, піхви, передміхурової залози та ін.) - Позанирковим протеїнурія. Ниркові протеїнурії ділять на органічні і функціональні. Органічна протеїнурія пов`язана з ураженням паренхіми нирок, функціональна - з вазомоторними порушеннями. Одним з видів функціональної протеїнурії є ортостатична (лордотіческая, перемежовуються, постуральна, циклічна) альбумінурія. Припускають, що при вираженому лордозе створюється становище, при якому нижня порожниста вена печінкою притискається до хребта, а це веде до застою в ниркових венах і застійної альбумінурії. Електронно-мікроскопічними дослідженнями встановлено, що при ортостатичної альбумінурії є морфологічні ознаки запального процесу в ниркових клубочках.
Наші багаторічні спостереження показують, що ортостатична альбумінурія часто обумовлена аномаліями нирок або їх ненормальним розташуванням У зв`язку з цим ми рекомендуємо користуватися ортостатичної пробій як скрінірующіх тестом. Після виявлення ортостатичної альбумінурії за допомогою цієї проби ми зазвичай робимо екскреторну урографію для виключення аномалій розвитку системи сечовиділення.
ортостатична проба. Напередодні проведення проби, ввечері, приблизно за годину до сну, дитина повинна спорожнити сечовий міхур. Вранці, вставши з ліжка, він відразу ж мочиться, і цю сечу збирають в окремий посуд, відзначаючи як порцію до навантаження. Потім дитині пропонують стати на коліна на напівм`який стілець з палицею за спиною, обхопивши її ліктьових згинами. У такому положенні дитина повинна знаходитися 15-20 хв, після чого він спорожняєте сечовий міхур і зібрану сечу відзначають як порцію після навантаження. Білок досліджують в порціях сечі, отриманих до і після навантаження. Виявлення або збільшення в 2-3 і більше разів вмісту білка в другій порції (отриманої після навантаження) в порівнянні з першою оцінюють як позитивну ортостатическую пробу.
Визначення білкових фракцій в сечі. Проводиться нічно елементи. При гломерулонефриті, туберкульозі, полікістоз нирок, пухлини нирок, геморагічному васкуліті, колагенозах, запаленні сечового міхура і інших захворюваннях еритроцитів в сечі може бути значна кількість. Розрізняють макро- і микрогематурию. При макрогематурії вже макроскопически можна відзначити, що колір сечі змінений. Через присутність в сечі великої кількості еритроцитів вона стає червоною або «кольору м`ясних помиїв». При микрогематурии еритроцити виявляються лише шляхом мікроскопії осаду.
Проникнення еритроцитів в сечу при гломерулонефритах, інтоксикаціях зумовлено підвищеною проникністю клубочкової капілярів і їх розривами. При запальних захворюваннях сечових шляхів, каменях мисок, сечоводів, сечового міхура еритроцити потрапляють в сечу з пошкоджених слизових оболонок. При зборі сечі порціями (дво- і трехстаканной пробах) під час одного сечовиділення можна з великою ймовірністю з`ясувати, з якого сегмента сечовивідної системи виходить гематурія. Так, при гематурії з уретри можуть бути згустки крові в першій порції сечі. Якщо гематурія обумовлена гострим запаленням слизової оболонки, каменем або іншими захворюваннями сечового міхура, більше крові буде виділятися з останньою порцією сечі. При гематурії, пов`язаної з пошкодженням сечоводу, іноді виявляються фібринні зліпки, по формі відповідні просвіту сечоводу. При дифузних захворюваннях нирок гематурія забарвлює виділяється сечу рівномірно.
лейкоцити. У сечі здорової дитини вони можуть бути одиничними в поле зору. Виявлення 5-7 лейкоцитів в кожному полі зору говорить про запальний процес у сечовивідних шляхах. Однак при цьому завжди має бути виключено попадання лейкоцитів в сечу із зовнішніх статевих органів, що буває при фімозі, баланіте і баланопоститі у хлопчиків і вульвовагініті у дівчаток. Дво- і трехстаканная проби широко використовуються при лейкоцитурії.
циліндри. У сечі вони можуть бути у вигляді гіалінових, зернистих, епітеліальних і воскоподібних зліпків. Всі вони можуть утворюватися при патологічних станах в нирках. Циліндри в сечі здорових дітей зустрічаються рідко. Часто вони виявляються при кількісних методах дослідження сечового осаду. Як правило, це гіалінові циліндри, що представляють собою згорнувся в просвіті канальців білок. Епітеліальні циліндри свідчать про поразку ниркової паренхіми і складаються з склеєних епітеліальних клітин ниркових канальців. При більш вираженому дистрофическом процесі в нирках з`являються зернисті і воскоподібні циліндри. Це зліпки отторгнувшіхся клітин канальцевого епітелію, який піддався жирової дегенерації. Крім того, в осаді сечі можна виявити циліндри, що утворилися з формених елементів, гемоглобіну, метгемоглобіну крові. Основу таких циліндрів зазвичай становить білок, на який нашаровуються інші елементи.
Циліндроїда - це схожі на гіалінові циліндри освіти, що складаються з кристалів солей сечокислого амонію, слизу, лейкоцитів, бактерій. Виявляються циліндроїда в фазі одужання при гострому гломерулонефриті. Від гіалінових циліндрів вони відрізняються неоднорідністю структури.
Неорганічний осад. В неорганічний осаді у дітей частіше зустрічаються урати, оксалати, фосфати, кристали сечової кислоти. Надмірне виділення їх з сечею може призвести до утворення в сечових шляхах каменів.
Уратурія - підвищене виділення з сечею сечокислих солей. Спостерігається в перші дні життя новонароджених. Через значної кількості уратів сеча новонароджених може мати цегляно-червоний колір. Великий розпад клітинних елементів у новонароджених часто призводить до утворення мочекислого інфаркту, який до кінця першого тижня життя проходить, так як солі урати видаляються зі зростаючою диурезом. Уратурія у дітей старшого віку може бути пов`язана з вживанням в їжу великої кількості м`яса, при м`язовому перевтомі, гарячкових станах. Гіперуратурія може обумовлюватися спадкової гіперурикемією, що є особливо актуальним при синдромі Леша-Нихана.
Оксалатурія - підвищене виділення з сечею щавлевокислого кальцію, може бути пов`язано з вживанням їжі, багатої щавлевої кислотою. До продуктів такого роду відносяться щавель, шпинат, томати, зелений горошок, квасоля, редис, чай, кава та ін. Причиною оксалатурии буває і патологічним процес в організмі дитини, що супроводжується розпадом тканин (дистрофія, туберкульоз, діабет, бронхоектатична хвороба, лейкоз та ін .). Оксалатурія відома також як спадкове захворювання, часто ускладнюється сечокам`яної хвороби і хронічний пієлонефрит. При вираженій оксалатурии зміст оксалатів в сечі в 3-4 рази і більше перевищує допустиму величину (норма 8-10 мг%).
Фосфатурія - збільшене виведення з сечею солей фосфатів, що випадають в осад у лужній сечі. Спостерігається при прийомі в їжу продуктів рослинного походження (овочів, фруктів і ін.), А також при запальному процесі в слизовій сечових шляхів, коли відбувається бактеріальне бродіння і залуження сечі. Фосфатурія може стати причиною утворення каменів сечового міхура.
