Дослідження хромосом

Відео: Великий стрибок ДНК Код життя

Дослідження хромосом можна проводити на будь-яких клітинах, що діляться, що містять ядро. Для візуалізації хромосом необхідна конденсація хроматину матеріалу, яка відбувається в процесі ділення у всіх клітинах. Цитогенетичні дослідження зазвичай проводять на лімфоцитах крові, однак при підозрі на мозаицизм рекомендується дослідження фібробластів. З метою пренатальної діагностики дослідження хромосом проводять на матеріалі клітин амніотичної рідини, ворсин хоріона або крові плоду-в разі предимплантационний пренатального діагнозу досліджують бластомери.

Відео: Що таке теломери? - Сюжет НТВ про відкриття теломерів, особливих ділянок хромосом

каріотипування - Це визначення каріотипу, що проводиться за допомогою фотографічного або комп`ютерного зображення попередньо забарвлених хромосом клітини. Клітини культивують, розподіл зупиняють на стадії метафази мітозу, фіксують і фарбують. Якщо необхідно розглянути тонкі деталі, можливо дослідження хромосом в профазі. Оскільки хромосоми в профазі довше і менше конденсованих, визначається 600-1200 смужок, в той час як в метафазі на хромосомах зазвичай видно тільки 400-600 смужок. Обробка трипсином з фарбуванням по Гімзою називається методом G-бендінга, а акрихін забезпечує Q-бендінг (флуоресцентний). Для демонстрації центромер використовують спеціальні методи фарбування.

Гібридизацію in situ - Метод дослідження хромосом, який застосовують для виявлення наявності або відсутності специфічних нуклеотидних послідовностей ДНК в хромосомних нитках. Молекулярний зонд використовують для розпізнавання і гібридизації з гомологичной послідовністю ДНК на хромосомі, що дозволяє ідентифікувати певну хромосому, хромосомний ділянку або послідовність ДНК. Якщо використовується флуоресцентний зонд, то метод дослідження хромосом називається FISH.

Відео: Каріотипування

Порівняльна геномна гібридизація - Метод молекулярного цитогенетичного аналізу, що дозволяє скласти одночасно каталог всіх хромосом. Досліджувану ДНК ізолюють з одиночної клітини (і мультиплікують допомогою ПЛР) або з безлічі клітин пацієнта і порівнюють з референтної ДНК, отриманої від здорового індивіда. Тестовану і референтну ДНК мітять різними флуоресцентними барвниками, відповідно зеленим і червоним флюорохромом, і потім проводять одночасну гібридизацію досліджуваної і референтної ДНК з нормальними хромосомами. Флюоресцирующие зображення хромосом дозволяють визначити співвідношення зеленого і червоного кольору і таким чином ідентифікувати надлишковий або відсутній хромосомний матеріал.