Спід

СНІД, Серія «Медицина» - 1989, №5.

Які перші ознаки захворювання на СНІД? Загальна стомлюваність, пітливість в поєднанні з припуханням лімфатичних вузлів. Можна абсолютно твердо сказати, що всі хворі зі збільшеними лімфатичними вузлами, особливо шийними, пахвовими, повинні обов`язково досліджуватися на СНІД. Це найбільш ранній ознака. Пізніше приєднуються діарея, що триває два-три місяці, схуднення, гнійничкові ураження шкіри і слизових, пневмонії.

Вірус СНІДу пригнічує імунітет. Отже, створює можливість для розвитку якого інфекційного процесу, частиною обумовленого Аутофлора, або змінених, мутованих клітин, які теж завжди є в нашому організмі, т. Е. Пухлинного процесу. Правда, висловлювалася думка, що вірус СНІДу сам може індукувати пухлинний ріст. Але переважна більшість дослідників вважають, що він не викликає пухлин, а створює умови в організмі для їх розвитку.

Яких пухлин? Найчастіше це саркома Капоши і різні лімфоми, в тому числі мозку. За кордоном описана така форма СНІДу, як швидкий, прогресуючий. Розвивається ранній деменций, коли буквально протягом місяця після початку захворювання відбувається розпад інтелекту людини до рівня дебіла. Зараз встановлено, що вірус імунодефіциту людини вражає не тільки лімфоцити, але і макрофаги, і нервові
клітини.

Жоден з препаратів крові (за винятком факторів згортання 8 і 9, які застосовуються у хворих на гемофілію) вірусу СНІДу містити неможуть. Технологія приготування забезпечує їх стерилізацію. Зараз все менше використовується лейкоцитарний інтерферон, отриманий з крові людей або плаценти Дослідники в основному перейшли на виготовлення ре комбінантного інтерферону - методом генної інженерії. Це повна гарантія безпеки поширення вірусу.

Як і при будь-якої інфекційної хвороби, особливо (тривалим перебігом, при СНІДі інкубаційний період коливається. Тому точно назвати терміни від моменту зараження до появи антитіл неможливо. За світовими даними, зазвичай це 3-5 місяців. Але ось що тут цікаво. У зарубіжній літературі описується багато випадків, коли сам момент інфікування теж супроводжується клінічною картиною. Розвивається короткочасна лихоманка, з`являються припухлість лімфатичних вузлів, інші симптоми, що нагадують інфекційний мононуклеоз. Але при цьому може ще не бути серологічного відповіді. І в цьому складність розпізнавання небезпечної недуги.

За кордоном і у нас є препарат, який застосовують для лікування СНІДу. Це азидотимидин, створений кілька раніше для боротьби з раком. Він не дає повного лікування і до того ж дуже токсичний.

Активно ведеться дослідниками і пошук інших засобів, розробляються препарати нового покоління, так звані моноклональні антитіла, призначені захищати рецептори лімфоцитів, кажучи інакше - ті точки, через які вірус СНІДу проникає в клітину.
Широко ведуться роботи, мета яких створити вакцини проти СНІДу. Тут вчені йдуть декількома шляхами. Існує можливість хімічного синтезу вакцини. На лабораторному рівні знаходиться створення живої вакцини на основі вакцин проти віспи. Почалася робота над створенням ще однієї нової вакцини, на яку покладаються особливі надії.

Головні труднощі, яку намагаються подолати вчені, полягає в тому, що вже зараз виділено кілька різновидів вірусу СНІДу. На думку деяких вчених, генетична варіабельність цього вірусу в 100 разів вище, ніж у вірусу гепатиту.

Що стосується термінів появи надійного засобу від грізного захворювання, то, за наявними розрахунками, це станеться не раніше ніж через 5-10 років. Дуже б хотілося сподіватися, що ці терміни вдасться скоротити.

Перед лицем небезпеки поширення СНІДу вчені і клініцисти багатьох країн спрямовують свої зусилля на створення, перш за все надійних засобів діагностики захворювання або його так званих здорових носіїв. Вітчизняна розробка (Р. В. Петров та ін.) Оригінальна тим, що не вірус поміщали в діагностичну тест-систему, не вірусний лизат або виділені з нього білки, а синтезовані з амінокислот короткі пептиди. І це дійсно принципова відмінність, що обіцяє великі вигоди: по-перше, виробництво цілком безпечне, так як не треба вирощувати заразне «початок», по-друге, воно не вимагає дорогих імпортних засобів і реактивів, без яких вірус СНІДу «не хоче» рости . І, нарешті, по-третє, тест-система виходить більш специфічною, вона практично не дає хибнопозитивних реакцій.

Співробітники Інституту імунології МЗ СРСР одними з перших в світі не тільки довели, але і реалізували можливість створення пептидних імуноферментних діагностикумів при вірусних інфекціях, конкретно при СНІДі.

Зроблено перші спроби створення пептидних вакцинують комплексів - прототипів синтетичних вакцин проти СНІДу. Зараз роботи по створенню діагностикумів для знову відкритих варіантів вірусу СНІДу і розробці синтетичних вакцин тривають.

Вірулентність вірусу СНІДу змінюється з розвитком захворювання. До такого висновку прийшли фахівці Каліфорнійського університету, які досліджували віруси чотирьох хворих, один з яких був бессімптомен. Вірус, ізольований з клітин його крові, інфікував
клітини в культурі набагато слабкіше, ніж ізоляти трьох інших хворих. Виявлено також, що з прогресом захворювання стає легше виділити сам вірус.

У одного хворого може бути кілька варіантів вірусу. Так, віруси різної вірулентності були виокрем лени у двох хворих з Заїру. У одного з них вірус виділений з крові, вбивав клітини культури, в яких зазвичай вирощують вірусні частинки. Цей виру дуже швидко викликав хвороба і приводив до смерті. Вірус виявився в 1000 разів більш детальний, ніж стандартний ізолят. Він також відрізнявся дуже великою варіабельністю і ніс дуже багато відмінностей в структурі оболочечного білка.

Що робити з голками та шприцами одноразового використання - дієвого засобу в боротьбі зі СНІДом - після того, як вони опинилися забрудненими? Адже тільки в Західній Європі потрібно до 3 млрд. Таких шприців на рік!

Нещодавно схвалення ВООЗ отримало пропозицію англійської фірми «Кандел Декопрінт» з Дербішир фахівці якої винайшли особливий картонний ящик для знищення голок і шприців. Пристрій вистелено зсередини вогнетривкою алюмінієвою фольгою, яка витримує до 25 хв горіння. Пластмасові шприци підпалюють разом з голками, після чого згорає в кінцевому підсумку і сам ящик, залишаючи купку попелу з деформованими голками, непридатними до подальшого вживання.

Активація вірусу СНІДу може відбуватися в результаті пошкоджень його ДНК, інтегрованої в геномі клітини-господаря. Це, як показали дослідження групи К. Валері з університету штату Пенсільванія, призводить до підсікання дрімає в організмі інфекції. Так, при впливі ультрафіолету і антибіотика мітоміцину С експресія вірусу збільшується в 150 разів. Показано також, що в культурі Т-лімфоцитів ультрафіолет призводить до скорочення часу циклу зростання вірусу. Навіть сонячне світло провокує вірусну інфекцію. Це свідчить про те, що інфікованим людям не слід захоплюватися засмагою.

У Чикаго дискутується й інша проблема - чи має лікар моральне право відмовитися від лікування вирусоносителя або хворого на СНІД. Не секрет, що в ряді американських клінік вони стали «небажаними» пацієнтами. Причин цього явища багато. Тут і фантастично висока вартість лікування, яка доходила до 150 тис. Дол., І явно необґрунтовані побоювання медичного персоналу заразитися від пацієнта.

Дискусія в США з питань медичної деонтології і СНІДу триває. Передбачити її результат навряд чи можливо, але зрозуміло, що від цього буде залежати доля мільйонів американців.

Фахівці біотехнологічної компанії «Кетус» з каліфорнійського міста Емервіл створили принципово новий метод отримання потрібних генів в необмеженій кількості, що дозволяє виявити в клітці конкретні молекули ДНК, що є речовиною наших генів, серед мільйонів інших. Метод отримав назву «ланцюгова реакція полімерази» (ЦРП).
Фахівцям «Кетуса» вдалося виділити полимеразу з теплолюбивой бактерії «термус акватікус» (ТА), що живе в гарячих джерелах, яка зберігає активність навіть при 95 ° С. Фермент ТА дозволяє здійснювати полімеризацію циклічно. Після 30 таких циклів в системі утворюється більше мільярда копій гена. Залишається тільки відокремити їх і направити в автомат для читання нуклеотиднихпослідовностей. Весь процес легко автоматизується.
Для прямого виявлення генів вірусу СНІДу в клітинах імунної системи людини Ч. Оу з Центру по контролю захворюваності в американському місті Атланта застосував ЦРП. У дослідження були взяті три групи: люди, які мають в крові противірусні антитіла, у яких іншими методами були виділені віруси- сероіозітівние, але у яких традиційними методами вірус виділити не вдалося-контрольна група серонегатівних, які не належали до груп ризику і, таким чином, були інфіковані вірусом.

Найцікавішою виявилася друга група: у 7 з 11 людей з антитілами до вірусу СНІДу, у яких вірус класичним методом виявлений не був, ЦРП була позитивною.
Повідомлення про результати застосування ЦРП в дослідженнях СНІДу викликало великий інтерес на що відбулася нещодавно в Чикаго конференції, присвяченій 100-річчю лабораторії Еббот. Виступив на ній директор Національного інституту алергії та інфекційних захворювань США А. Фаучи сказав, що ЦРП дозволила по-новому оцінити ступінь інфікованості лімфоцитів вірусом СНІДу. Раніше, виходячи з результатів застосування старих методів, вважалося, що вірус вражає 1 з 10 або навіть 100 тис. Клітин. ЦРП показала, що інфікованість становить 1 на тисячу, а то і більше. Це дозволяє вивчати істинний механізм латентності СНІДу.

Новий метод дозволить також збільшити безпеку гемобанков і різко знизити біологічну небезпеку для пацієнтів при переливанні крові.

У Парижі фахівцями Інституту Пастера за допомогою «ланцюгової реакції полімерази» показано, що до недавнього часу вчені «недооцінювали варіабельність вірусу СНІДу». Справа в тому, що до появи ЦРП єдиною можливістю напрацювати необхідну для аналізу вірусну масу можна було тільки шляхом пасажу через клітинну культуру. У цих умовах не виключений, як заявили автори роботи С. Вайн-Хобсон і М. Гудено, штучний відбір генома вірусу.

При визначенні вірусних генів з`ясувалося, що колишні ізоляти вірусу СНІДу є насправді великі групи вірусів. При аналізі вірусної нуклеїнової кислоти французькі фахівці показали, що в одній клітці може бути до 7 генетичних варіантів вірусу. При цьому віруси відрізняються один від одного різною довжиною нуклеїнової кислоти.
Були також відкриті дефектні віруси, які представляють собою мутанти з короткими відрізками вірусної нуклеїнової кислоти за рахунок появи в незвичайних місцях молекулярних сигналів «стоп», в результаті чого синтез генів припиняється. Ці сигнали не дають можливості утворення повноцінних ДНКоних копій вірусних генів. Результатом «впровадження» сигналів «стоп» є призупинення відтворення вірусу в клітинах-«мішенях», наприклад, в тому ж Т-хелперів.

Робота французьких вчених дозволяє сподіватися, що з часом можна буде навчитися направлено вводити такі сигнали «стоп» в вірусну нуклеїнову кислоту, що дозволить припиняти, а можливо, і взагалі припиняти відтворення вірусу в організмі.
С. Волинського із Чиказького університету за допомогою ЦРП виявив 6 молекул вірусної копії ДНК в 150 тис. Клітин. Це зайвий раз підтверджує високу чутливість і вибірковість нового методу. Автор визначав наявність вірусних молекул у новонароджених. Раніше інфікованість новонароджених, як і їх матерів, перевіряли за наявністю в їх крові противірусних антитіл. ВОЛИНСЬКИЙ ж почав шукати безпосередньо вірусне інфікування. Виявилося, що не всі новонароджені, у яких виявляються противірусні антитіла, дійсно інфіковані вірусом. У деяких дітей антитіла отримані від дійсно інфікованих матерів, проте вірус через плаценту не проникнув у кров`яне русло плоду. Материнські антитіла можуть зберігатися у дітей до року і навіть більше.

Обстеження дітей за допомогою ЦРП показало, що іноді мати і дитина можуть бути інфіковані різними штамами вірусу. Відмінність штаму плода може виникати в результаті мутації вірусного генома в організмі дитини.

Дослідники Абердинського університету (Шотландія), показали, що, якщо нагрівати вірус СНІДу в водяній бані з температурою 42 ° С протягом 30 хв, він інактивується на 40%.
Практично можливе підвищення температури тіла і його частин до 42 ° С і підтримання її протягом деякого часу. Для підвищення температури тіла необхідно спеціальний пристрій: порожній циліндр, обплутаний проводами, в якому частота 27 МГц, що створює пульсуюче магнітне поле, буде нагрівати тіло Сольного.

Обробка донорської крові лазерним випромінюванням дозволяє знищити багато небезпечні збудники інфекційних захворювань, включаючи і вірус СНІДу. До таких висновків дійшов американський дослідник, доктор Д. Матьюз, який разом з групою колег проводив протягом трьох років лабораторні експерименти в цій області в Медичному центрі Бейлорського університету в штаті Техас.

Розроблена процедура очищення донорської крові, при якій через лазерний промінь пропускається за 15 хв близько 470 г її, дозволяє зробити кров цілком придатною для застосування.
Медики декількох країн проводять випробування фузидієвої кислоти - антибіотика, який зазвичай використовується для лікування бактеріальних інфекцій, в зв`язку з тим що цей антибіотик викликав різке поліпшення стану у одного хворого на СНІД.

Лабораторні дослідження показали, що якщо до клітин, попередньо обробленим фузидієвої кислотою, додати клітини, інфіковані вірусом СНІДу, то перші з інфікованих кліток не злипаються один з одним. Крім того, не було виявлено ознак присутності вірусного ферменту, який зазвичай є симптомом інфекції.

У НДР ведуться пошуки ефективного засобу боротьби зі СНІДом. Зокрема, створено препарат фтороті-мідін, що нагадує за своєю дією американський азидотимидин.
В Інституті імунології Академії наук НДР ведуться роботи з моноклональними антитілами, які нейтралізують дію вірусу СНІДу.

Насіння австралійського каштанового дерева мають лікарські властивості, які можуть бути застосовані в лікуванні СНІДу. До такого висновку прийшли медики з дослідницького центру ракових захворювань в Сіетлі (штат Вашингтон).
Згідно з даними американських вірусологів, каштанові насіння містять антибіотик, здатний призупинити поширення в організмі людини невиліковного поки захворювання.

Доктор Е. Скорнік, заступник завідувача хірургічним відділенням Тель-Авівського медичного центру, повідомив, що спільно з Національним інститутом вірусології ПАР він проводить досліди із застосування препарату, відомого під назвою «АЛ-721» і одержуваного з яєчного жовтка.

Професор Баррі Схоуб, директор Національного інституту вірусології ПАР, розповів, що проведена тут перевірка його ефективності дала вражаючі результати. Препарат здатний призупинити розвиток захворювання, зменшити його симптоми і, можливо, привести до часткового лікуванню. Однак він підкреслив, що, як тільки припиниться лікування, цей вірус знову може стати активним. 15 г препарату «АЛ-721» потрібно приймати щодня на голодний шлунок.

Медики госпіталю «Мулаго» в Кемлеле, що проводили експерименти по лікуванню хворих на СНІД лікарськими травами, отримали, за повідомленням з міністерства охорони здоров`я Уганди, деякі позитивні результати. «Курс лікування проводився на 10 хворих, і стан їх здоров`я помітно покращився», - вказують у міністерстві, підкреслюючи, проте, що «було б передчасно робити з цього далекосяжні висновки».

Англійська фірма «Берроуз Уелком», яка виготовляє ретровир (азідотмідін), опублікувала тимчасові правила отримання цього препарату, який має здатність підтримувати життя хворих на СНІД.
Ціна лікування ретровіра - 10 тис. Дол. На рік. У міру збільшення випуску ретровіра фірма має наміру відпускати ліки за звичайними рецептами.

Незабаром можна буде створювати вакцини, що захищають відразу від кількох хвороб. Метод дає можливість виділити з вірусу специфічні протеїни, які стимулюють імунну реакцію і виробляють високоефективний імунітет у піддослідних тварин. В кінцевому підсумку це може призвести до створення вакцин проти таких хвороб, як лишай, гепатит, інфлуенца, СНІД. Але дослідники підкреслюють, що повинні бути закінчені всебічні випробування на безпеку і ефективність методу, перш ніж вакцини будуть випробувані на людях.

Новий вид вакцин розробляють американські вчені. За відправну точку досліджень є тверда частинка розміром з бактерію. Дослідники з`єднують цей твердий матрикс змоноклональними очищеними антитілами, які пов`язані з одним антигеном. Ці комплекси змішуються з речовиною, що містить антиген, який розпізнає антитіла. Таким чином, комплекс, що складається з твердого матриксу та антигену, з`єднується за допомогою моноклонального антитіла і утворює вакцину.

Залучаючи кілька різних антигенів до твердого матриксу (з використанням різних моноклональних антитіл), можна створити одну вакцину, яка буде виробляти імунітет до кількох хвороб або вакцину проти хвороби, яка включає кілька антигенів. Метод дозволяє вирішити деякі проблеми традиційних способів виготовлення вакцин. Одна з них - виділення протеїну від вірусів і інших мікроорганізмів.

Моноклональні антитіла, залучені до твердого матриксу, дозволяють спростити цей процес. Вони «витягують» розпізнаються протеїни.
Метод також корисний, коли виробляють потрібні протеїни «вирощуючи» їх на дріжджових або бактеріальних клітинах.

Новий метод дозволяє стимулювати обидві частини імунної системи - клітини і антитіла. Антитіла можуть допомогти тілу знищити мікроорганізми, але при багатьох хворобах важливо стимулювати і самі клітини імунної системи.

Раніше дослідникам було важко це зробити, так як протеїни у вірусі були зайняті виробленням клітинно-опосередкованого імунітету. Можна виробити будь-яку або обидві реакції в залежності від того, який антиген (або антигени) включений в комплекс. До того ж комплекс надає антигени імунної системи в потрібному вигляді.

Група дослідників університету вже успішно впливала в лабораторіях на ряд різних вірусних хвороб мишей і кроликів. Для цієї роботи використовувалися моноклональні антитіла, отримані від мишей.

Коли вакцина буде придатна для людини, передбачається створити моноклональні антитіла людини.