Техніка приготування музейних препаратів

У роботі патологоанатомічних відділень, поряд з мікроскопічним дослідженням об`єктів, істотне значення має приготування для демонстраційних і навчальних цілей музейних препаратів зі збереженням їх природного забарвлення, зумовленої кров`яним пігментом.
У 1895 р Н. Ф. Мельников-Разведенков вперше встановив, що після фіксації у формаліні можливо відновити природну забарвлення органу, обробляючи препарат спиртом. На цьому принципі засновані найбільш поширені в даний час методи приготування музейних препаратів. Обробка органів розпадається на наступні три фази:

1. Фіксація в формаліні-сольової суміші, в якій гемоглобін крові переходить в метгемоглобін, завдяки чому органи приймають бурого забарвлення.
2. Відновлення природного забарвлення препарату в спирті внаслідок переходу метгемоглобіну в нейтральний гематин (катгемоглобін), дуже подібний за кольором з оксигемоглобіном.
3. Остаточне зберігання препарату в гліцеринової суміші.

ФІКСАЦІЯ

Формалін-сольові розчини, запропоновані цілим рядом авторів, різні за своїм складом, і показання до застосування тієї чи іншої рідини визначаються якістю об`єкта і завданнями, які поставлені при виготовленні препарату.
Найбільш споживані наступні фіксують суміші.
II. Ф. М е л ь н і к о в а-Р о з в е д е н к о в а:
Формалін 100 мл
Хлористий калій .. 5 г
Уксуснокислий калій (або натрій) 30 »
Вода 1000 мол

1. До а й з е р л і н г а:

Формалін 200 мл
Азотнокислий калій (селітра) 15 г
Уксуснокислий калій 30 »
Вода .. 1000 мол

1. піка:

Формалін 50 мл
Карлобадская сіль (штучна) 50 г
Вода 1000 мол

Відео: Сучасне фармацевтичне виробництво

1. І о р е з а:

Формалін 100 мл сірчанокислий натрій 20 г
Сірчанокисла магнезія 20 »
Кухонна сіль 10 »
Вода. 900 мл
Для приготування зазначених рідин береться водопровідна вода.
Загальним для всіх формаліну-сольових розчинів є те, що вони сповільнюють ущільнення препарату і зберігають на більш тривалий час здатність тканин до відновлення забарвлення.
У виборі тієї чи іншої фіксує рідини слід керуватися тим, що слабкі (по концентрації формаліну) розчини мають більш глибоким проникаючою дією і тому вони краще для фіксації великих об`єктів, але так як гемолізує дію таких розчинів вище, вони менш ефективні щодо відновлення природного забарвлення . З останньої точки зору вигідніше міцні формалінові рідини. Тому там, де головним завданням є збереження забарвлення препарату, останній фіксують в рідини Кайзерлинга, як найбільш міцної і, отже, з найменшим гемолізуючих дією. У тих же випадках, коли така забарвлення має другорядне значення і орган великий, показані слабкі фіксатори, як, наприклад, рідини Н. Ф. Мельникова-Разведенкова, Піка та ін. Втім, щодо великих об`єктів одне лише застосування слабких формаліну-сольових рідин ні в якій мірі не забезпечує повноцінної фіксації і тому, як правило, перед зануренням препаратів в фіксуючий розчин доводиться вдаватися до додаткових розрізах, надрізів і вколов. Надрізи і Уколи роблять в малопомітних місцях органу, що не підлягають демонстраціі- в розрізи і Уколи вводять тонкі ватяні або марлеві тампони. Однак і розрізи далеко не завжди гарантують гарну фіксацію всієї тканинної маси великого об`єкта, з цієї причини іноді обмежуються лише частиною органу, у вигляді пластин або скибок тієї чи іншої товщини. Приготування таких пластин показано і при ускладненнях в посуді і фіксують средствах- користуючись пластинами можна ширше застосовувати рідину Кайзерлинга, що, як уже було відзначено вище, є більш вигідним для збереження природного забарвлення препарату.   
Поряд з розрізами, для збереження великих об`єктів і, головним чином, їх зовнішнього вигляду вдаються також до впорскуванню (за допомогою шприца) фіксуючого розчину в товщу органу. Таке впорскування роблять на цілому органі при збереженої капсулі і при цьому як до приміщення препарату в фіксатор, так і після, через кілька днів. Повинно помітити, що впорскування фіксатора в товщу органу не завжди надійно в сенсі повної фіксації глибоко розташованих тканин. В цьому відношенні набагато більш ефективно введення фіксує рідини в судини. Фіксація через судини, будучи непридатна в звичайній музейній практиці (через вимивання крові і знебарвлення органу), все ж може бути рекомендована в окремих випадках, а саме: 1) коли потрібно зберегти всю тканинну масу об`єкта, а не забарвлення його і 2) при деяких патологічних пігментації (вугільної, малярійній). Зі зрозумілих причин ніяких розрізів на препараті при наливки судин робити не можна, вони допускаються лише після того, як налитий орган пробув в фіксаторі 2-3 дня. Посудина, через який вводилася фіксує рідина, перев`язують. Вводити рідину краще всього через артерії, по можна і через вени, аби вони були прохідні і не містили кров`яних свертков- орган при цьому помітно набухає. Кількість введеної в судини рідини має бути приблизно дорівнює вазі того органу, який піддається обробці.
Для наливки користуються великими шприцами Жане (можна скористатися і воронкою, за принципом сифона).
Для збереження зовнішнього вигляду великих об`єктів іноді вдаються і до видалення центральних, а тому погано фіксуються ділянок органу шляхом вискоблювання (гострої ложкою) через широке вікно, зроблене на стороні препарату, що не підлягає демонстрації. Таке вишкрібання, як правило, роблять після того, як препарат пролежав в фіксує рідини не менше 3-5 днів. Утворену порожнину заповнюють сухою ватою, а потім орган знову поміщають в фіксуючу рідину, домагаючись хорошою фіксації зберігся периферичного шару.
Багаті кров`ю органи, з метою найбільш повного відновлення забарвлення, бажано фіксувати в міцних формаліну-сольових розчинах.
Перше і основне правило при виготовленні музейних препаратів-це уникати всякого обмивання органів водою.
Перед тим, як помістити препарат в фіксуючу середу, його необхідно відповідним чином підготувати.

1. Об`єкт ретельно препарують, видаляючи все зайве і максимально чітко виявляючи деталі патологічного процесу-роблять розрізи і надають бажане для демонстрації становище.

Якість наливки органу буде вище, якщо фіксатор вводити по черзі спочатку через одну посудину (артерію), потім через інший (вену).

1. Різні порожнини, трубчасті утворення, канали і свищі заповнюють сухою ватою, а де потрібно ставлять дерев`яні або скляні розпірки.
2. Шматки шкіри, розкриті петлі кишок, шлунок, сальник, тверду мозкову оболонку акуратно розправляють, розтягують на товстому картоні або фанері і закріплюють за допомогою лігатур або голок.

Тільки після такої підготовки препарат поміщають в фіксуючу рідину. Треба пам`ятати, що не можна робити ніяких скільки-небудь значних виправлень у препараті після того, як він пробув в фіксаторі хоча б 1-2 дні.
Для досягнення хороших результатів фіксації необхідно дотримуватися таких умов:

Відео: Flumed Farm виробництво лікарських препаратів

1. Обсяг фіксує рідини повинен в 5-10 разів перевищувати обсяг препарату.
2. Не можна допускати контакту фіксуються препаратів зі стінками посуду, а тому їх обов`язково кладуть на вату, ізолюючи при цьому і від бічних стінок.
3. Препарат повинен лежати в рідини абсолютно вільно. Якщо в одну і ту ж посуд доводиться поміщати відразу кілька об`єктів, їх обов`язково перекладають ватою і мають у своєму розпорядженні таким чином, щоб вони не чинили один на одного значного тиску.
4. Препарати, що спливають на поверхню рідини, покривають ватою або складеної в кілька шарів марлею, які попередньо змочують фіксує рідиною.
5. Яка фіксує рідина повинна бути абсолютно прозрачной- при фарбуванні кров`ю, помутніння і забруднення її замінюють свіжою.

Через 1-2 дні після перебування препарату в фіксаторі можна витягувати всі сторонні предмети, введені в порожнині, канали і трубчасті освіти.
Час перебування препаратів в формаліні-сольовому розчині досить по-різному і залежить від багатьох умов: величини і щільності об`єкта, кількості та глибини зроблених розрізів і надрізів, свіжості і фортеці фіксатора, температури. Різні тонкостінні органи, як, наприклад, петлі кишок, шлунок, жовчний і сечовий міхури, досить тримати в рідині 12-24 години-такі органи як нирки, серце, легені та селезінка (нормальних розмірів або трохи збільшені і обов`язково розрізані) -від 3 -4 і до 7 днів-мозок і печінку (з розрізами) -до 3-4 тижнів. Для того, щоб препарат не затримувався надмірно довго в фіксує середовищі, необхідний постійний контроль за ходом фіксації. Критерієм достатньої фіксації служить рівномірне ущільнення об`єкта і відсутність на контрольному розрізі червонуватих і рожевих ділянок-з поверхні розрізу не повинно видавлюватися кров`яною рідини. Перетримка препарату в фіксаторі може надалі несприятливо відбитися на якості відновлення забарвлення.
Немає ніякої необхідності готувати різні формалінові рідини, досить тримати в лабораторії один який-небудь фіксатор і притому найкраще Кайзерлинга або Н. Ф. Мельникова-Разведенкова. Залежно від обставин, фіксатор І. Ф. Мельникова-Разведенкова можна зробити більш міцним, додаючи в нього в міру потреби відповідну кількість чистого формаліну, а фіксатор Кайзерлинга, навпаки, слабкіше, розводячи його одним сольовим розчином.
Вся робота з фіксують середовищами повинна проводитися або в секційної кімнаті, або в окремому добре провітрюваному приміщенні. Посуд, в якій зберігаються препарати, покривається простим склом відповідних розмірів. Бажана температура приміщення близько 18 °. Щоб уникнути хімічної травми рук, працюють в гумових рукавичках.
Говорячи про загальні принципи обробки препаратів в фіксують рідинах, не можна не торкнутися деяких деталей такої обробки, а головне розрізів щодо деяких органів.
Зауваження по розрізах і фіксації деяких органів. Головний мозок - цілком зберігають рідко через його тривалої фіксації (до 3-4 тижнів). Якщо все ж виникає така необхідність, то для забезпечення найкращих умов фіксації розкривають бічні шлуночки (через мозолисте тіло) і роблять глибокі надрізи в малопомітних місцях.
Значно частіше готують препарати з окремих шматків (пластин) головного мозку, які отримують при деяких класичних способах розкриття, як наприклад: при горизонтальних розрізах по Флексига і фронтальних - по Пітр і Фішеру. Такі пластини фіксуються в короткі терміни.
Можна також робити розрізи і вирізати пластини, виходячи з міркувань найбільшої демонстративності патологічного фокуса.
Для кращого збереження патологічного вогнища головний мозок іноді цілком поміщають в фіксатор і розрізають лише через кілька днів після того, як речовина мозку досить ущільнився.
У тих випадках, коли збереження природного забарвлення мозку не має істотного значення, дуже хороші результати дає наливка судин фіксує рідиною. Фіксатор наливають через загальні сонні артерії за добу до розтину трупа, приблизно по 600-700 мл рідини з кожного боку, артерії після цього перев`язують. При розтині трупа помітно оплотневшій мозок витягують і поміщають в фіксуючу рідину ще на 1-2 тижні, попередньо розкриваючи бічні шлуночки (через мозолисте тіло). Після закінчення зазначеного терміну орган, якщо потрібно, розрізають.

Непридатний для приготування музейних препаратів метод розтину головного мозку по Вірхову.
Спинний мозок. Розкривають по задній поверхні тверду мозкову оболонку. Ніяких спеціальних розрізів власне речовини мозку не роблять, за винятком тих, які необхідні для виявлення і демонстрації патологічного процесу.
Перед зануренням у фіксатор препарат попередньо розкладають па картоні або тонкої дощечці, ретельно розправляють розкриту тверду оболонку і зміцнюють її за допомогою голок або лігатур. Тривалість фіксації 1-2 дня.
Серце. Для приготування музейних препаратів користуються різними розрізами. Так, якщо бажано зберегти тільки зовнішній вигляд органу, то обмежуються одними бічними розрізами, що з`єднують передсердя і шлуночок з кожного боку. Для показу поразок клапанного апарату і пристінкового ендокарда гарні розрізи, вироблені, зазвичай, на розтині (починаючи від правого передсердя і далі по току крові). * Для демонстрації порожнин шлуночків, товщини їх стінок і особливо клапанних отворів користуються поперечними розрізами серця на різних рівнях.
Нарешті, в окремих випадках, головним чином при інфарктах і великих рубцевих змінах, можна обмежитися приготуванням препаратів тільки з великих ділянок м`язової стінки серця (найчастіше лівого шлуночка).

* Подробиці таких розрізів серця можна знайти в будь-якому посібнику з техніки розтину трупів.

Порожнини серця і різні аневрізматіческого випинання його стінок перед фіксацією заповнюють сухою ватою.
Терміни фіксації від 3-4 і до 7-8 днів, залежно від товщини стінок шлуночків.
Легкі. Користуються тими самими розрізами, що і па розтині, а саме - по довжині органу, від зовнішньої опуклою поверхні і до воріт легені. Напрямок розрізу повинно бути таким, щоб великі бронхи і судини поблизу кореня легкого були, по можливості, розрізані вздовж. При наявності великих вогнищ ущільнення (запального і пухлинного характеру) роблять додаткові розрізи або січуть пластини різної товщини (3-4-5 см), то і інше - паралельно вищеописаного основного розрізу.
Хороші результати дає фіксація органу (цілого легкого або однієї частки) за допомогою вливання фіксує рідини (за допомогою шприца Жане) в дихальні шляхи. Цей спосіб особливо показаний тоді, коли бажано уникнути зайвого спадання легеневої тканини, як наприклад, при емфіземі. фіксатор
(Краще слабший) вливають обережно, під невеликим тиском, до помірного розтягування органу-після цього перев`язують бронх і поміщають препарат у формаліні-сольовий розчин. Розрізи на такому легкому роблять, якщо це необхідно, через 2-3 дня після перебування препарату в рідини.
Терміни фіксації різні: для об`єктів з повітряної паренхімою (при наявності розрізів) досить декількох днів, при всякого роду ущільненнях - до 7-10 днів.
Беручи до уваги багатство легеневої тканини кров`ю, для цього органу особливо показана фіксація в рідини Кайзерлинга.
Шлунково-кишковий тракт. Для приготування музейних препаратів користуються тими ж розрізами, що і на розтині, т. Е. Стравохід розкривають по задній стінці, шлунок - по великій кривизні, тонкий кишечник - поблизу місця прикріплення до брижі, товсту кишку - по одній з поздовжніх стрічок (taenia) . Посічений відділ шлунково-кишкового тракту, після сосоответствующей препаровки, кладуть на тонку дощечку (або шматок картону), розправляють, кілька розтягують, зміцнюють лигатурами (або голками) і в такому вигляді поміщають в фіксуючу середу.
Для демонстрації різних запальних уражень або розладів кровообігу (повнокров`я, крововиливи) досить витримати препарат в фіксаторі 6-12 годин (практично залишають на ніч). Тільки при новообразовательних процесах (особливо в шлунку) терміни фіксації доводиться іноді подовжувати, а при занадто масивних новоутвореннях вдаватися і до додаткових розрізах (через новоутворення).
Якщо бажано зберегти конгломерат нерозітнутих петель кишок, як, наприклад, при гангрени, то поступають таким чином: спочатку через один з кінців кишки промивають весь комплекс петель сольовим розчином (входять до складу будь-якої фіксує рідини), потім один кінець перев`язують, а через інший - наливають фіксатор. Перев`язують залишився відкритим кінець кишки і в такому вигляді препарат поміщають в фіксуючу середу на 12-24 години.
Печінка. Для цього органу найчастіше користуються поперечнимрозрізом через обидві частки від опуклої поверхні їх і до воріт органу на нижній поверхні-розріз не повинен бути рассекающим. При сильно зменшених розмірах печінки (бура атрофія, атрофічний цироз) іноді буває цілком достатньо одного такого розрізу. У більшості ж випадків, крім такого основного розрізу, потрібні додаткові надрізи і уколів у малопомітних місцях і тим більшим і глибше, чим більше орган. У тому випадку, коли розміри препарату дуже великі (гіпертрофічний цироз, злоякісне новоутворення) пли мають місце якісь інші обмеження (в посуді, в які фіксують засобах), користуються окремими скибками і пластинами. Напрямок розрізів при цьому може бути двояке: або поздовжнє, або поперечне (через опуклі поверхні часток). Товщина пластин 3-4 см і більше.
Якщо важливо зберегти зовнішній вигляд органу і бажано уникнути розрізів, то застосовують або вишкрібання глибоко розташованих і погано фіксуються ділянок тканини або впорскування фіксатора в товщу органу.
На завершення слід зауважити, що препарати печінки з плином часу призводять до фарбування фіксують середовищ жовчними пігментами. Запропонований в 1955 р Мартіном (Martin) хлористий кальцій, з метою ослаблення такого фарбування, не дає ефекту.
Щоб уникнути сильного зафарбовування фіксують рідин жовчний міхур, як правило, видаляють.
Підшлункова залоза. Для збереження цього органу зазвичай обмежуються одним розрізом (НЕ рассекающим) по довжині його. Можна робити і будь-які інші розрізи, якщо це представляється вигідним для демонстрації патологічно змінених ділянок залози.
Фіксація протягом 1-2 днів, залежно від товщини і щільності препарату.
Селезінка. У більшості випадків орган розрізають по довжині, по середньої лінії, від опуклої поверхні і до воріт його-розріз не повинен бути рассекающим. Коли розміри органа невеликі і товщина його не перевищує 2,5 см, то, для забезпечення гарної фіксації, досить одного такого розрізу. При будь-якому скільки-небудь значному збільшенні селезінки бажані додаткові розрізи, які краще робити паралельно основному, серединному розрізі, на відстані 2-3 см один від одного і також від опуклої поверхні. Крім паралельних подовжніх розрізів роблять і інші - в малопомітних місцях. Нарешті, при великих розмірах селезінки і достатньої щільності її, можна вирізати окремі пластини по довжині органу, товщиною до 3-4 см і більше.
Бажаючи зберегти лише зовнішній вигляд препарату, надходять точно так же, як це було рекомендовано для печінки (див. Стор. 277).
Не рекомендується робити розрізи на свіжому органі в разі його великий в`ялості. Такий орган краще спочатку ущільнити, поміщаючи в який-небудь слабкий фіксатор.
Терміни фіксації препаратів селезінки дуже різні і залежать від розмірів органу, щільності тканини і розрізів.
Нирки. Для музейних препаратів нирки, майже як правило, розрізають у фронтальній площині від опуклої поверхні і у напрямку до воріт органа. Отримані в результаті такого розрізу частини (половини) повинні триматися тільки на балії. Препарат фіксують в розгорнутому вигляді. Якщо мають на увазі одночасно демонструвати і опуклу поверхню органу, і поверхня розрізу його, то орган повністю поділяють на дві половини, розрізаючи і балію.
Зразкові терміни фіксації при нормальних і трохи збільшених розмірах органу складають 3-5 днів.
Сечовий міхур. Розкривають по передній стінці (від шийки і до дна), розкриту порожнину заповнюють сухою ватою.
При наявності дивертикулів в стінці міхура їх також акуратно заповнюють ватою.
У чоловіків сечовий міхур слід брати разом з передміхурової залозою.
У разі значного збільшення простати на останній робиться глибокий поздовжній розріз, а при необхідності і бічні.
Для фіксації власне міхура (без передміхурової залози) достатньо 1-го дня.
Матка. Користуються тими самими розрізами, що і на розтині, т. Е. Спочатку розкривають ножицями порожнину матки по передній стінці, починаючи від шийки і до самого дна- тут, повертаючи ножиці спочатку в одну, а потім в іншу сторону, роблять додаткові розрізи передньої стінки в напрямку до фаллопієвих труб. Розкриту порожнину матки заповнюють сухою ватою.
При наявності атрофії і гіпоплазії матки можна відмовитися від будь-яких розрізів.
Якщо є вузли фіброміоми, їх розтинають в бажаному напрямку, враховуючи вигоди демонстрації. У разі інфільтруючих злоякісних новоутворень, що поширюються на навколоматкову клітковину і сусідні органи, роблять додаткові розрізи через тканину новоутворення, максимально щадячи орган і не завдаючи великої шкоди демонстративності препарату. При дуже великих новообразовательних процесах, коли доступ до матки вкрай утруднений, вдаються до рассекающим поздовжнім розрізах, орієнтуючись на середню частину матки.
Матка як музейний препарат береться, по можливості, разом з придатками. Яєчники в такому випадку розрізають по опуклій поверхні.
Яєчники. Приготування музейних препаратів яєчників найчастіше пов`язано з різними новоутвореннями (кістозного або солідного характеру). Якщо розміри таких новоутворень не великі, то їх прагнуть обробляти в комплексі з маткою і се придатками.
При великих новоутвореннях яєчника приготування препаратів нерідко доводиться обмежувати тільки ними одними. З останніми в такому випадку надходять як з усяким великим органом, т. Е. Роблять розрізи, впорскують фіксуючу рідину в товщу новоутворення або, нарешті, вирізають пл-Астин. Кістозні новоутворення і окремі кісти, перед тим як їх розрізати, рекомендується попередньо витримати протягом 1-2 днів в фіксує рідини щоб уникнути спадання тонкостінних порожнин.
Окремі кісти, якщо вони не містять сосочкових розростань, що підлягають демонстрації, можна заповнювати сухою ватою, а на стінки накладати шви.
Щитовидна залоза. Музейні препарати цього органу готують зазвичай при його збільшенні (зобі). Показані поздовжні розрізи часткою і притому краще фронтальні. У випадках дуже великого збільшення органу роблять додаткові розрізи і надрізи. Якщо препарат береться з трупа, то він, як правило, січуть і потім монтується разом з частиною гортані і трахеї. Крім зовнішнього вигляду органу, бажано демонструвати і характер його тканини, для чого частини однієї з розрізаних часткою або широко розводять, вставляючи розпірки, або зрізають тонкий кусень з передньої поверхні однієї з часткою.
Терміни фіксації визначаються величиною препарату, розрізами і щільністю тканини.