Лабораторні методи дослідження (в педіатрії).
Мікроекспресс-методи.
Методи, що дозволяють визначати абсолютні кількості речовин, вимірювані в микрограммах, відносять до категорії ультрамікроаналізу. За допомогою мікрометодів досліджують кількості порядку міліграмів [Керк (P. L. Kirk)]. Зміст переважної більшості органічних і неорганічних речовин в крові вимірюють в міліграм-відсотках або в мілліеквівалентах на 1 л, концентрації деяких біологічно активних речовин (кортикостероїди, біогенні аміни), а також мікроелементів - в мікрограм-відсотках, отже, для педіатричної клініки особливого значення набувають методи ультрамікроаналізу. Необхідність розробки і впровадження таких методів особливо гостро відчувається при патології у новонароджених та дітей раннього віку, так як взяття крові навіть для мікроаналізу у них не завжди представляється можливим. Мікро-експрес-методи в педіатрії повинні задовольняти тим самим вимогам, що і будь-які аналітичні методи: бути точними, доступними, простими, а також швидко здійсненними, допускають проведення серійних аналізів. Отримання інформації негайно після взяття матеріалу дозволяє вносити корективи в лікування дитини вже в день його надходження.
Розвиток мікроекспресс-методів і ультрамікроаналізу починається з робіт вітчизняних вчених. К. А. Тімірязєв ввів в практику наукового експерименту газовий мікроекспресс-метод, набагато випередивши зарубіжних хіміків. У 20-х роках був запропонований крапельний метод аналізу, який отримав розвиток в працях Н. Тананаева. Нові мікроекспресс-методи розробляє в останні роки проф. А. А. Покров-скін. Виконання ультрамікроаналізу пов`язано з певними технічними труднощами, зумовленими пошуком раціональних методів отримання малих, але точно відміряних обсягів сироватки крові, а також розробкою високочутливих колориметрических або інших методів. Загальноприйняті способи взяття крові в звичайні конічні пробірки для цілей мікроекспресс-методів чи прийнятні. Існують наступні варіанти взяття капілярної крові для цих методів: а) отримання чистої краплі крові після проколу шкіри пальця, мочки вуха або п`яти з подальшим заповненням капілярної мікропіпеткі- б) взяття крові мікрошпріцем, градуйованим в мікролітрах- в) взяття крові в U-подібний капіляр (після ретракції кров`яного згустку і центрифугування відрізки капіляра, що містять сироватку, обламують, а сироватку піддають аналізу) - г) нанесення мікрокількостей крові на хроматографическую або фільтрувальну папір (аналіз може бути виконаний після висушування крові і елюювання досліджуваних речовин з паперу водними або органічними розчинниками) .
Відео: Лабораторна діагностика залізодефіцитної анемії. Поради батькам - Союз педіатрів Росії
Розробляються в даний час мікроекспресс-методи можна розділити на дві категорії. Прості методи, що дають напівкількісну інформацію (застосування індикаторних папірців, олівців, таблетованих реактивів). Незважаючи на невисоку точність, ці методи мають певні переваги, до яких відносяться їх простота і швидкість виконання. У практичній роботі дитячих лікувальних установ прості напівкількісні тести орієнтують лікаря щодо основних обмінних порушень. Ці методи знаходять також застосування при масових обстеженнях дитячих контингентів на виявлення спадкової патології обміну (фенілкетонурії, хвороб обміну вуглеводів та ін.). Друга категорія мікроекспресс-методів - так зв. прецизійні методи, з яких найбільшого поширення набули колориметрические, спектрофотометричні і деякі хроматографічні методи, а також методи флюоресцентного аналізу. Колориметричні мікроекспресс-методи засновані на вимірі інтенсивності поглинання світла розчинами, що містять досліджуване речовина підвищення чутливості методів досягають за допомогою кольорових реакцій з певними сполуками. В даний час розроблені колориметрические мікроекспресс-методи, що відрізняються високою чутливістю і специфічністю (В. С. Асатіані, 1965). Істотним недоліком вимірювальних приладів - фотометров, застосовуваних при біохімічному дослідженні, є значна ємність кювети, що обмежує можливість їх застосування при мікроекспресс-методах.Поетому сконструйовані мікрокювет ємністю 50-200 мкл. Капілярні мікрокювет Керка, Лаурі і інших модифікацій дозволяють значно збільшити робочий хід світлового променя при малих обсягах досліджуваного матеріалу. У вітчизняних біохімічних лабораторіях застосовується оптична система проф. А. А. Покровського, в якій також використовують капілярні мікрокювет, що встановлюються вертикально в апаратах ФЕК-М, СФ-4, СФ-10. Світловий пучок від джерела світла конденсується на таких кюветах за допомогою циліндричних лінз. Існують також конструкції кювет, в яких за допомогою системи дзеркал здійснюється багаторазове проходження світла через досліджуваний розчин.
Відео: Електроенцефалографія з відеомоніторингом. Поради батькам - Союз педіатрів Росії
Виконання аналітичних мікроекспресс-методів вимагає застосування спеціальної хімічної посуду - автоматичних мікропіпеток, мікробюреток, мікрошпріцем і т. Д.
До числа мікроекспресс-методів, які знайшли широке застосування в клініці дитячих хвороб, відносяться полум`яна фотометрія і мікрометод Аструпа. Одночасне застосування цих методів дозволяє протягом декількох хвилин дослідити основні показники іонограми і кислотно-лужної рівноваги, що має велике значення для розпізнавання розладів водно-сольового обміну і проведення дегідратаційних терапії, лікування препаратами діуретичного дії. Ці методи мають особливо важливе значення в роботі реанімаційних центрів, нефрологічних відділень, відділень для дітей з жел.-киш. захворюваннями. В останні роки стало можливим швидке отримання інформації при використанні деяких хроматографических методів дослідження. Широкі перспективи в цьому відношенні відкриває метод хроматографії в тонких шарах адсорбентів: силикагеля, окису алюмінію, гіпсу та ін. (А. А. Ахрем і А. І. Кузнєцова, 1965). Поділ більшості хімічних сполук в тонких шарах відбувається протягом короткого часу - 20-30 хв., Використання високочутливих барвників дозволяє виявляти на хромато-грамі кількості речовин в діапазоні 1 мкг і навіть нижче. Метод тонкошарової хроматографії застосовується в токсикологічних лабораторіях для швидкого виділення і визначення концентрацій токсичних сполук у крові при випадкових побутових отруєннях. Цей метод забезпечує швидку інформацію про зміст липоидов, моно- і дисахаридів, деяких амінів в біологічних рідинах.
Відео: Лабораторні дослідження в Першій сімейної клініці
Автоматизація біохімічних методів дослідження - інший шлях розвитку мікроекспресс-методів. Аутоаналізатор фірми "Технікон" (США) дозволяє виконати від 20 до 60 досліджень в 1 годину при мінімальних затратах ручної праці [Бюхнер (М. Biichner), 1961]. Створений в Радянському Союзі апарат "Біан" також забезпечує автоматизацію ряду лабораторних досліджень.
Ю. Вельтищев. (Коротка медична енциклопедія)
