Методичні аспекти діагностики урогенітального хламідіозу

Відео: 30.09.2015. 05. Подколзин А.Т. Сучасні методи лабораторної діагностики інфекційних захворювань

6. Переваги методу ПЛР

В даний час метод ПЛР широко впроваджений в практику охорони здоров`я і використовується для діагностики вірусних і бактеріальних інфекцій. Метод ПЛР, «пройшовши перевірку часом, довів економічність і практичну ефективність» в використанні. Досвід використання ПЛР в діагностиці хламидиозов показав ряд його переваг:

Відео: Урогенітальні інфекції

А) Пряме визначення збудника.
Метод ПЛР, заснований на розмноженні ферментативним способом специфічної ділянки гена збудника, дає можливість прямого визначення мікроорганізму в біологічному матеріалі.

Б) Висока специфічність методу ПЛР.
- в досліджуваному матеріалі виявляють найбільш стійку частину генома збудника, що не зраджує свою антигенну структуру ні за яких обставин - ні під впливом захисних сил макроорганізму, ні при тривалому прийомі антібіотіков-
- до складу реакційної суміші входять праймери, що включають в себе 30-50 олігонуклеотидних послідовностей, специфічних для С. tracomatis. Це дозволяє, на відміну від імунологічних тест-систем, уникнути хибнопозитивних реакцій, пов`язаних з перехресної реакцією антитіл з антигенами;

В) Висока чутливість.
Можливість накопичення ДНК за допомогою ланцюгової реакції, що проходить в програмованому термостаті (ампліфікаторі), дозволяє підвищити поріг чутливості виділення мікроорганізмів в досліджуваному матеріалі до кілька десятків клітин в порівнянні з іншими методами, де він досягає 10М06 мікроорганізмів в досліджуваному матеріалі.

Г) Широкий спектр об`єктів дослідження і універсальність процедури виявлення різних збудників.
ПЛР дає можливість аналізу широкого спектра клінічного матеріалу.
Дослідженню піддаються уретральні, цервікальні, глоткові зіскрібки, сеча, змиви зі слизової очей, носоглотки, слина та ін. Універсальність методу полягає в можливості виявлення в одному біологічному зразку декількох збудників інфекцій. Можливість аналізу будь-якого клінічного матеріалу дозволяє перейти від стандарту з інфікованого зразка до виявлення інфікованого пацієнта.

Д) ПЛР дозволяє здійснювати діагностику латентних форм інфекції.
Багато бактерій і вірусів можуть тривалий час перебувати в латентній формі, бути присутнім в сечостатевому тракті в малих кількостях, змінювати свої властивості під дією антибіотиків. Та все це знижує виявлення збудників інфекцій методами, заснованими на імунологічних реакціях. Метод ПЛР, заснований на детекції розмноженої ДНК, підвищує ефективність діагностики захворювань, викликаних бактеріальними і вірусними інфекціями, які характеризуються латентним перебігом. До них відноситься і хламідійна інфекція.

Е) Швидкість виконання методу ПЛР.
Визначення збудника методом ПЛР здійснюється протягом одного робочого дня. Використання ампліфікатора в режимі активного регулювання дозволяє провести ампліфікацію протягом 1,5 годин, що скорочує час від початку обробки клінічних зразків до отримання результатів. Якщо врахувати тривалість процедури вирощування культури клітин, то перевага методу ПЛР стає безсумнівним.

При існуючих нормативах часу проведення ПІФ на одну інфекцію - від 20 до 30 хвилин - лікар не може за робочий день зробити і двох десятків аналізів, в той час як сучасні модифікації ПЛР дозволяють «провести» за цей час більш ніж на порядок більше число аналізів.

Ж). Можливість використання методу ПЛР для проведення скринінгових обстежень неінвазивними методами.
Висока чутливість методу, можливість дослідження широкого спектра клінічного матеріалу, в тому числі сечі, дозволяє використовуватися для скринінгу хламідійної інфекції.

З). Метод ПЛР, як найбільш специфічний і чутливий, може використовуватися для оцінки ефективності лікування (критерій лікування) хворих.

Контрольне дослідження нахламідіоз методом ПЛР проводиться не раніше 1-1,5 місяців після закінчення лікування. Терміни (і сама необхідність) повторних контрольних досліджень вибираються лікарем, виходячи з клінічної ситуації. Однією з умов достовірного результату при контрольному дослідженні є правильне отримання матеріалу.

Відео: 01 Жусман Рання діагностика