Способи оцінки тромборезистентности - полімери медичного призначення
Відео: Судова експертиза // Судова експертиза old
Серед способів оцінки гемосумісність полімерних матеріалів, призначених контактувати з кров`ю, найважливішою і разом з тим найбільш складною є методика кількісної оцінки тромборезистентности таких матеріалів. Відносно коагуляционной здатності крові розроблені і прийняті методи контролю на клінічному рівні, проте поки що немає задовільних способів для досить точних вимірювань процесу тромбоутворення на поверхні чужорідного тіла, визначення впливу чиниться цим тілом на складові крові, а також для взаємно порівняльного виявлення цих факторів. Таким чином, тут наше виклад зведеться до опису тільки двох способів оцінки антітромбогенності - in vitro і in vivo, які найбільш широко і порівняно успішно практикуються в даний час.
Спосіб оцінки in vitro
Відкривши вихід крові з живого організму, здійснюють її контактування з досліджуваним матеріалом і визначають період часу, що протікає до згортання. Цей часовий інтервал приймають за стандартний критерій антітромбогенності розглянутого матеріалу. На практиці найбільш загальна методика зводиться до того, що з оцінюваного полімеру виготовляють або дослідну трубку або внутрішнє покриття для неї-далі вводять в таку трубку пробу крові і відповідно до загальноприйнятого в клініках методом контролю по Лі - Уайту визначають період, який протікає до повного згортання крові. Очевидно, що чим довше цей проміжок часу, тим слабкіше вплив оцінюваного матеріалу на активацію факторів згортання і адгезію тромбоцитів, т. Е. Тим вище антітромбогенность полімеру.
Позитивною стороною даного способу є відносна простота- крім того, він не вимагає значних витрат часу для реалізації. Разом з тим цей спосіб має і ряд суттєвих недоліків. Так, при виведенні крові з живого організму в процесі взяття проб вона відразу ж вступає в контакт з чужорідними речовинами. Крім того, до крові
домішується сукровичних рідина, а в ході вимірювань воно стикається з повітрям, і це різко прискорює денатурації білків. Нарешті, є і ряд інших побічних зовнішніх впливів на оцінюваний матеріал. В результаті виникає сумнів у тому, чи відповідає така статична методика оцінки динамічному станом крові в живому організмі.
Порівняно недавно був запропонований новий спосіб оцінки синтетичних матеріалів, який не вимагає, як in vivo високою хірургічної техніки і тривалого часу для реалізації. Він є проміжним методом між способу ми in vitro і in vivo, а тому може бути викликаний «ех vivo» Цей метод зводиться до того, що з оцінюваного матеріалу виготовляють тонку трубку, яку вставляють в шийну вену собаки і виводять по цій трубці кров назовні. Створюючи відповідне негативне тиск, регулюють швидкість по струму крові і в таких умовах заміряють тривалий час, що проходить до того моменту, поки потік крові не зупиниться в результаті згортання [7].
Відео: Слово Експертові 42. Експертиза авторського права // Експертиза авторських прав (авторства)
Спосіб оцінки in vivo
Методика способу полягає в тому, що оцінюваний материа. (Полімер) вводять безпосередньо в циркулює кров живого організму і спостерігають ту інтенсивність, з якою відбувається тромбоутворення. В якості найбільш загальної методики практикується спосіб, який розробив і запропонував Got. [8]. Технічно він зводиться до наступних маніпуляцій. Оцінюваний полімер формують у вигляді кільця з внутрішнім діаметром 7 мм, зовнішнім діаметром 8 мм і довжиною 9 мм і до обох внутрішнім кінців його приєднують конусні трубки. Це кільце, зване «кільцем Готта», вводять в нижню порожнисту вену собаки, починаючи від правого шлуночка серця. Після закінчення 2 год, а потім через 2 тижні. кільце видаляють і роблять оцінку динаміки коагуляції і стану тромбу.
З огляду на те що описана методика досить складна розроблений і прийнятий простіший, але менш гуманний спосіб оцінки [9], який, зводиться до наступних маніпуляцій. З досліджуваного полімеру формують трубку завдовжки 30 см і внутрішнім діаметром 3 мм і вводять її в нижню порожнисту вену зі баки, починаючи від стегнової вени. Після закінчення 2 тижнів. шляхом хірургічного втручання досліджують стан тромбоутворення в місцях, які безпосередньо прилягають до полімерної трубкою. Інакше кажучи, цей спосіб зводиться до катетеризації з тривалим залишенням катетера в нижньої порожнистої вени.
Мал. 23. Пункти тестування на собаці по двом способам: з використанням кільця Готта і з залишенням катетера в нижньої порожнистої вени.
Мал. 24. Результати оцінки тромборезистентности полімеру за методом залишення катетера в нижньої порожнистої вени собаки (після закінчення двотижневого терміну витримування). На обох знімках: зліва - серце, праворуч - стегнова вена.
а - чітко видно тромб- б - тромбоутворення практично отсутствует- К - катетер- Тб - тромб.
За допомогою такого методу можна тестувати тільки полімери, що володіють гнучкістю і еластичністю. На рис. 23 показані місця розташування випробувальних трубок, а також «кільця Готта» в тілі собаки при здійсненні описаних методів оцінки тромборезистентности.
Практичні результати, отримані при тривалому залишення катетера в нижньої порожнистої вени собаки, ілюструються рис. 24. Якщо антітромбогенность матеріалу недостатня, то на ділянках нижче ниркових вен, де потік крові порівняно повільний, в зонах, суміжних з трубкою, процес утворення тромбу йде до повного завершення. При випробуванні ж трубок з полімерів з досить хорошою гемосумісність закупорювання судин не спостерігається.
Обидва описаних способу оцінки дозволяють спостерігати і пояснювати тільки стан, що настає після закінчення певного часу, тому в обох випадках обсяг кількісної інформації дуже малий. Що стосується тромбів, то тут процес не обмежується простим зростанням: тромби то розпадаються під дією системи розчинення фібриногену, то знову затвердевают- при цьому частки вже утворилися тромбоз час від часу відокремлюються, мігрують і в якійсь точці капіляра закупорюють його, т. Е . викликають емболію. У зв`язку з цим були проведені експерименти поза організмом з метою виміряти і оцінити освіту і розпад тромбів в тимчасовому аспекті. Вимірювали потік крові всередині кільця Готта ультразвуковим витратоміром Допплера [10], вводили всередину катетері поперечний термоелемент і визначали підвищення температури внаслідок тромбоутворення (т. Е. В результаті зниження теплоизлучения) [11]. Були проведені й інші експериментальні роботи в цьому напрямку.
Всі ці способи оцінки антітромбогенності дають недостатньо високу ступінь точності- крім того, здійснення супроводжується травмуванням кровоносних судин кільцями з полімерів і катетерами. Щоб виключити ці суто негативні моменти, були проведені численні розробки, -в результаті яких недавно вдалося створити надзвичайно зручний, можна сказати, навіть витончений спосіб оцінки [12]. Він зводиться до наступних операцій. Маленький магнітний стрижень капсуліруют в оціненого полімерному матеріалі і, ввівши цю капсулу в стегнову артерію собаки, проводять її до низхідній аорти грудної порожнини. Там попередньо встановлено електромагнітний пристрій (на зовнішній стороні аорти), і під дією магнітної сили відповідного рівня капсула утримується всередині артерії як би вс підвішеному стані, т. Е. Фіксується, не торкаючись її стінок Накладенням зовнішнього магнітного поля вимірюють тиск, яке потік крові робить на капсулу, а за результатами вимірювань (по зміні тиску) оцінюють стан тромбоутворення на периферії капсули. Поки що спосіб знаходиться в початковій стадії практичних випробувань і, незважаючи на найпозитивніші прогнози, про результати його говорити дещо передчасно.
Спосіб оцінки полімерів in vivo приносить непропорційно малий обсяг кількісної інформації і об`ектівоб`ектівних даних по відношенню до обсягу зусиль, техніки і часу, що витрачаються на проведення експерименту. Крім того, на його результати сильно впливають індивідуальні розбіжності особин і кількісні характеристики потоків крові, і це різко знижує об`єктивну достовірність даних. З іншого боку, спосіб in vitro, набагато більш простий і доступний, теж ні в якому разі не є реальним відображенням сумісності полімеру з кров`ю, що циркулює в живому організмі, і аж ніяк не завжди вдається знайти кореляцію його з способом in vivo. До того ж обидва способи безперервно удосконалюються, піддаються модифікаціям, і надзвичайно мало прикладів того, що тільки одним з них, без поєднання з іншим, проводиться порівняльна оцінка декількох полімерних матеріалів. До сих пір ще не встановлено, який з антітромбогенних матеріалів є все ж кращим, і ця невідомість пов`язана з труднощами і складністю способів оцінки. У наступних розділах нашої монографії будуть розглянуті тенденції і перспективи подальших розробок в області тромборезістентних матеріалів синтетичних полімерів. Той факт, що до сих пір в цьому напрямку в переважній більшості випадків вдавалося отримувати тільки якісні характеристики, пояснюється тією ж причиною, а саме методичними труднощами способів оцінки.
