Про деякі методи пошуку препаратів-стимуляторів процесу збудження - фармакологічна регуляція психічних процесів
В даний час відсутні спеціальні методичні розробки з метою пошуку речовин з описаним типом активності. До сих пір єдиною групою препаратів, що стимулюють нервово-м`язову передачу, була група інгібіторів холінестерази. Для їх експериментального пошуку зазвичай користувалися двома групами методів: а) біохімічними і б) фізіологічними. У першому випадку досліджується дія речовин на очищені препарати холінестерази, у другому - вплив на нервово-м`язову передачу в дослідах на прямому м`язі живота жаби, френіко-диафрагмальном препараті та ін. Слід зауважити, що ізольоване застосування одного із зазначених підходів не завжди дає потрібну і адекватну інформацію. Виявлення інгібування холінестерази in vitro далеко не завжди підтверджується в експериментах на цілісних тварин і нервово-м`язових препаратах. Крім цього, досить часто відзначається невідповідність між виразністю антихолінестеразну дії в пробірці і стимуляцією нервово-м`язової передачі [Прозоровський, Саватеев, 1976]. Використання тільки другого методу не поділяє препарати з різними типами стимулюючої дії на нервово-м`язові освіти.
Тому нами розроблена схема методів для первинного виявлення та поглибленого вивчення речовин - стимуляторів проведення збудження в різних нервових, м`язових утвореннях і нервово-м`язових синапсах.
На етапі первинних випробувань пропонується використовувати наступний набір тестів, що включає:
- вивчення дії речовин на поведінку тварин за схемою, що виявляє центральні нейропсіхотропние ефекти (див. главу третю);
- вплив на очищені препарати холінестерази;
- вплив на нервово-м`язову передачу (пряма м`яз живота жаби, френіко-діафрагмальний препарат щури);
- антагонізм з курареподібними миорелаксантами (d-тубоку-раріном);
- вплив на клітини гладеньких об`єкти (матка, сім`явивіднупротоку, кишка щури) з використанням відомих медіаторів - стимуляторів скорочення гладких м`язів (ацетилхоліну, окситоцину, адреналіну, гістаміну, серотоніну, КС1).
Перше дослідження є, по суті, попередніми, що дозволяє лише відібрати ті речовини, з яких найбільш доцільно почати подальший цілеспрямоване вивчення. У цьому наборі тестів дана група препаратів дає характерні зміни: в малих дозах не впливає на поведінку тварин або надає м`яку стимулюючу дію-з підвищенням доз ознаки порушення ЦНС поєднуються з проявами стимуляції
систем - тремором, саливацией, гіпергідрозом, діареєю. У високих, токсичних дозах вони викликають судоми. У тестах взаємодії виявляється переважна потенцирование ними ефекту м-холіноміметики ареколін при наявності підсилює впливу і на ефекти інших стимуляторів медіанний систем мозку.
Усі наступні тести дозволяють виявити вплив на холіноестеразу і нервово-м`язову передачу, зіставити їх вираженість і тривалість. Досліди на гладких об`єктах дають підставу розділити антихолінестеразних дію і вплив безпосередньо на збудливімембрану, зокрема з`ясувати здатність впливати на калієві канали мембрани. В останньому випадку препарати підсилюють дію всіх стимуляторів гладеньком`язового скорочення, крім КС1. У той же час інгібітори холінестерази практично не впливають на ізольовані клітини гладеньких об`єкти.
У процесі поглибленого вивчення дається кількісна оцінка кожного ефекту речовини по розширеному набору методів.
При цьому необхідно досліджувати: 1) дію речовин на нервово-м`язову передачу з використанням: а) більшої різноманітності нервово-м`язових препаратів для виявлення всього спектру стимулюючої дії, б) дослідів на цілісних тварин, коли вивчається вплив препаратів на нервово-м`язову передачу, ефекти стимуляції нерва, введення ацетилхоліну, курареподібних міорелаксантов- скоротливу активність гладком`язових органів (кишечника) in vivo, в зв`язку з цілісним організмом;
- вплив на ефекти ацетилхоліну (гіпотензивний і ін.);
- антагонізм з курареподібними миорелаксантами па ізольованих нервово-м`язових препаратах і цілісних тварин-4) вплив на ПКП і мінПКП- 5) дію на скоротливі відповіді гладком`язових органів з використанням всього можливого спектру агоністов- 6) вплив на очищені препарати холінестерази з визначенням констант інгібування, типу інгібірованія- 7) зміна калієвої проникності збудливою мембрани з використанням методу фіксації напруги на мембрані, патча і визначенням вольтамперних характеристик іонних струмів мембрани (перехоплення Ранвье, ізольований нейрон) - 8) вплив на функції центральної нервової системи-поведінкові реакції-9) взаємодія зі стимуляторами основних медіаторних систем мозку-10) вплив на навчання тварин-11) дію речовин на ЕЕГ, викликані потенціали, транскаллозальние ответи- активність нейронів мозку-12) анальгетические властивості препаратів.
