Застосування лазерорефлексотерапія при променевої патології - комплементарная медицина

Маючи в своєму розпорядженні достатнім клінічним досвідом по иридологических симптоматиці при радіаційних ушкодженнях, доцільним було розробити експериментальну модель з метою перевірки клінічних результатів. В якості експериментальних тварин використовувалися кролики лінії шиншила. Райдужна оболонка таких тварин забарвлена в сірі тони різної інтенсивності, має чітко сформований автономне кільце. У деяких тварин на ірисі спостерігалися адаптаційні кільця, лімфатичний розарій. Зіниця мав правильну овально-вертикальну форму, його площа була набагато більше, ніж у людини. Як правило, зустрічався гомогенний або радіально-гомогенний тип райдужної оболонки.
У контрольних і піддослідних тварин іриси фотографували на кольорову позитивну плівку до опромінення і потім в динаміці після нього. У спеціальних камерах кролів тотально опромінювали рентгенівським випромінюванням дозою 500 (12,9-10 2 Кл / кг) і 1000 Р (2,58-10-1 Кл / кг) одноразово. Вибір таких доз і режиму опромінення пов`язаний з тим, що одноразові дози - випромінювання з високою потужністю - для тварин можуть бути в 4 рази ефективніше хронічного. При опроміненні кролів дозою 500 Р (12,9-10 2 Кл / кг) їх загибель становила 44% і наступала, як правило, протягом місяця після опромінення. У всіх загиблих тварин розвивалася променева хвороба з вираженими клінічними проявами: втратою маси, адинамією, підвищенням температури до 40 - 41 ° С, зблідненням слизових оболонок, розвитком діареї, зміною формули крові [218]. На розтині спостерігалися масивні крововиливи в підшкірну клітковину пахових областей, дегенерація печінки, нирок, міокарда, розширення судин шлунка і брижі тонкого кишечника, зменшення селезінки. У кроликів, що вижили після опромінення, прояви гострої променевої хвороби були виражені в меншому ступені. Кількість лейкоцитів знижувалося на 5 - 10-а доба до 15,0 -20,0%, потім поступово відновлювалося до 93% до 45-ї доби. При офтальмологічному дослідженні через 7 хвилин після опромінення у деяких тварин відзначали помірну гіперемію кон`юнктиви (симптом &ldquo-сонце&rdquo-) або крововилив під кон`юнктиву очного яблука. На очному дні вже через 2 - 3 год після опромінення вени були розширені [218].
При опроміненні кролів дозою 1000 р (2,58-10 1 Кл / кг) загибель тварин наступала на 5 - 14-а доба, так як ця доза перевищує смертельну. Після опромінення протягом 3 ч спостерігалися значна гіперемія судин райдужної оболонки, виражений міоз, тромбоз і крововилив в судинах сітківки. Загибель тварин наступала від гострого кишкового променевого синдрому [218].
Клінічна картина променевої хвороби у всіх тварин проходила однотипно. Поступово розвиваються адинамія, розлад дихання і короткочасні судоми в термінальному періоді - по суті, єдині зовнішні прояви захворювання. Починаючи з 2-х діб після опромінення тварини значно втрачали в масі. Ведучий синдром при гострої променевої хвороби - порушення з боку тонкого кишечника. Це дало привід Квастлеру ставити діагноз &ldquo-гостра кишкова променева смерть&rdquo-. Гострий кишковий променевої синдром спостерігається у тварин при рентгенівському опроміненні і при впливі нейтронів [125]. При гострої кишкової смерті відбуваються деструкція і анаплазія епітелію стінки тонкого кишечника, виразне потовщення підслизового шару, в результаті чого - велике оголення стінки і в зв`язку з цим порушення процесів всмоктування їжі, втрата води та електролітів [125].
Таким чином, одним з механізмів, що викликають смерть на ранніх термінах після опромінення великими дозами, є пошкодження органів черевної порожнини і приводить до більш пізньої загибелі ушкодження ЦНС. Це виражається в змінах структури нервового волокна, втрати мієліну, розвитку енцефалітів і некрозів. Воно частково обумовлено первинними порушеннями кровоносних судин і є незворотнім. Структурні пошкодження нервових клітин наступають після опромінення дозою 1 - 6 Гр. Вони можуть викликати дегенеративні зміни клітин кори мозку і через кілька місяців після опромінення привести до деструкції її окремих ділянок.
При тотальному опроміненні симптоми порушення ЦНС проявляються з більш тривалим латентним періодом, в зв`язку з чим маскується явищами ураження травного тракту, що приводять організм до загибелі в більш ранні терміни. Поряд з ураженням тонкого кишечника велику роль відіграють порушення функції печінки, так як одночасна захист екраном при опроміненні цих органів забезпечує найбільшу тривалість життя тварин. У той же час є дані, що свідчать про певний корелює значенні гіпофіз-адреналової системи в розвитку кишкового променевого синдрому [125].
В основі імунопатологічних реакцій опроміненого організму лежить аутоиммунизация продуктами розпаду клітин, які рясно надходять з опромінених, легко руйнуються радіочутливих тканин зі значною масою. Це в першу чергу слизова оболонка кишечника, кістковий мозок і лімфоїдний апарат [125]. В результаті короткочасного опромінення в летальної дози з пошкоджених клітин продукти розпаду безперервним потоком (що полегшується підвищенням проникності судин) надходять в кров і лімфу, швидко виснажуючи захисні резервні можливості нормальних фізіологічних систем, зазвичай забезпечують нейтралізацію шкідливого впливу продуктів загибелі і метаболізму клітин. Важливим і вельми неприємним наслідком впливу продуктів розпаду опромінених клітин є аутоиммунизация, т. Е. Подальший розвиток патологічної протівотканевих імунної реакції. В результаті через 3 - 5 діб кров містить аутоантитіла, що володіють цитотоксичною дією на клітини і порушують діяльність деяких органів і фізіологічних систем. Кількість таких агресивних аутоантитіл особливо зростає в період розпалу променевої хвороби. В організмі поступово формується стан підвищеної чутливості до тканинних речовин, т. Е. Аутоаллергия, яка обумовлює характерні клінічні симптоми: лейкопенію, анемію, геморагічний синдром, ураження шлунково-кишкового тракту, а також непереносимість до введення навіть ізологіческіх клітин і білків.
Органи зору зазвичай розглядаються як одні з найбільш радіочутливих. Руйнуються всі структури ока, але найбільш чутливою частиною є кришталик. При високих дозах помутніння кришталика розвивається протягом декількох місяців, швидко прогресує і призводить до вираженої катаракті. При низьких дозах помутніння розвивається протягом декількох років, має невеликі розміри і суттєво не впливає на гостроту зору.
Тривале опромінення в малих дозах порядку 1 Гр призводить тільки до локальної гіпотензії і посиленню проникності судин ока. Ознаки структурних порушень з`являються при сумарних дозах 1,5 -4 Гр [125].
Після опромінення сумарною дозою 30 - 100 Гр у всіх структурах очі пошкоджуються судини. Пошкодження розвивається повільно, протягом декількох місяців і призводить до зміни просвіту судин, деформації судинних гілок, виникненню аваскулярних полів. Через 1 - 2 роки в області очного дна виявляються вогнища ексудації, крововилив, потовщення стінок судин, атонічні розширення вен, ділянки тромбозу [98].
Опромінення голови дозою 1,5 Гр через 1 -6 міс веде до деякого збільшення в кришталику 2) -аспартата, що супроводжується помутнінням кришталика. Зміст D-аспартату є одним з індикаторів процесу старіння [125].
Порогові дози для деяких нестохастичних ефектів опромінення в тканинах ока людини представлені в табл. 1.
Нами показано, що гостра променева хвороба кролів протікає з істотними змінами райдужної оболонки ока і форми зіниці, що відбувається на тлі загальних проявів променевого ураження - схуднення, млявість, випадання шерсті, кров`яної пронос, відмова від корму і т. Д. Кролі гинули протягом місяці.

При вивченні кольорових слайдів райдужної оболонки піддослідних кролів нами виявлено, що патологічні знаки при променевої хвороби виявлялися на 6 - 19-у добу після опромінення. У проекційної зоні мозку відзначений симптом &ldquo-багаття&rdquo-, який свідчить про порушення кровопостачання головного мозку, вираженої нейроциркуляторна дистонія. Поступово відбувалося висвітлення всієї райдужної оболонки, так званий симптом &ldquo-сметанки&rdquo-, який свідчить про зміну гомеостазу організму. Дистрофічний ободок ірису різко темнів і розширювався, що вказує на накопичення в організмі продуктів розпаду тканин. На 19-у добу спостерігався симптом уплощенія обох зіниць в зонах мозку і селезінки. Сплощення зіниць в зоні на &ldquo-12.00&rdquo- і симптом &ldquo-багаття" спостерігалися в 100% випадків, що свідчить про важке ураження і набряку мозку.
Лазероірідорефлексотерапію (ЛІРТ) кролів проводили щодня по 15 з на кожну проекційну зону (гіпофіз, гіпоталамус, довгастий мозок, тимус, селезінка, тонкий кишечник (за схемою Е. С. Вельховера)). Щільність потужності пучка гелій-неонового лазера складала 1 мВт / см2. Кролі дослідної групи отримували по 10 сеансів ЛІРТ. Всього в експерименті брало участь три групи тварин (кролі породи шиншила): 1-а група - досвідчена, яка отримувала тотальне опромінення і курс ЛІРТ- 2-я - контрольна, одержувала тільки тотальне облученіе- 3-тя - чистий контроль. У кожну групу входило по 10 тварин. Иридографии проводили до опромінення, потім в динаміці після нього.
У тварин, яким проводили курс ЛІРТ, спостерігалося лише деяке згладжування ознак гострої променевої хвороби (відсутність кривавого проносу, дещо більша активність). Однак загибель тварин у дослідній і контрольній групах наступала практично одночасно.
З наведених даних стає зрозумілим, що в зазначеному випадку ефект ЛІРТ як терапевтичний не виявився. При таких великих дозах опромінення лазерна, опосередкована через ірис, стимуляція неефективна. Тому в наступних експериментах нами була використана доза тотального опромінення тварин 500 Р (12,9-10 2 Кл / кг), інші умови досвіду не змінювали.
Оскільки електрофоретична рухливість (ЕФП) клітин крові є дуже чутливим індикатором радіаційного пошкодження організму, ми вирішили використовувати цей тест в своїх дослідженнях. Аналізи крові на ЕФП у всіх тварин брали до рентгенівського опромінення, а потім в динаміці на 6, 13, 20, 27-у добу після опромінення. Досвідчена група отримувала ще курс ЛІРТ (12 сеансів).
Клітини крові, так само як і високомолекулярні речовини організму, при фізіологічному значенні pH несуть на своїй поверхні надлишковий негативний заряд. Електричний заряд клітин відіграє важливу роль у всіх фізіологічних відправленнях -газообмене, адсорбції амінокислот, білків і продуктів їх розпаду, ферментів, антигенів і антитіл, чужорідних речовин, що надходять в кров, і утворенні структури рушійною крові. Отже, для нормального виконання своїх функцій клітини крові повинні мати стабільний електричний заряд, який обумовлюється хімічною структурою їх поверхні і складом навколишнього середовища. При патологічних станах організму електричний заряд клітин крові може істотно змінюватися як в результаті зміни фізико-хімічної структури клітинної поверхні, так і внаслідок порушення складу навколишнього середовища - появи в крові антитіл, патологічних білків і продуктів розпаду клітин.
Негативно заряджена поверхня клітини крові притягує з навколишнього середовища протилежно заряджені іони - протівоіони, які під впливом електростатичних сил прагнуть наблизитися до іонізованим групам клітинної мембрани. В результаті клітина виявляється оточеній подвійним електричним шаром. Його потенціал називається дзета-потенціалом (Z-потенціалом), або Електрокінетичні потенціалом, який є лише частиною повного електрохімічного (термодинамічної) потенціалу клітини. Чим товщі подвійний електричний шар клітини, тим більше величина її Z-потенціалу.
ЕФП клітин крові, тобто швидкість переміщення клітин, суспендованих в буферному розчині або зважених в природному середовищі - плазмі крові, в наведеному електричному полі залежить від напруженості поля, особливостей структури клітинної мембрани, величини pH, іонної сили, діелектричної постійної, в`язкості і температури середовища, від Z-потенціалу клітини .
При визначенні ізоелектричного стану клітин крові, особливо еритроцитів, слід мати на увазі, що на величину pH їх ізоелектричної точки істотно впливають продукти руйнування клітин, які, адсорбируясь на поверхні незруйнованих еритроцитів, знижують їх ЕФП і тим самим переміщають pH ізоелектричної точки в менш кислу область. Показано, що у визначенні заряду еритроцита головна роль належить липоидо - фосфатиди, переважно Кефалінія, у яких залишки фосфорної кислоти звернені до зовнішньої поверхні оболонки, а основні групи - до її внутрішній стороні. В результаті такої орієнтації полярних груп забезпечується висока щільність електричного заряду еритроцитів, їх ізоелектричної точка зміщується в кислу сторону.
Для визначення електрофоретичної швидкості клітин крові використовували мікрометод. Його принцип полягає в тому, що в спеціально змонтованих мікроаппаратах за допомогою мікроскопа, секундоміра і окулярної сітки вимірюється швидкість переміщення кожної клітини крові під дією ЕП. Час проходження клітиною умовного відстані вимірюють в секундах: чим більше час проходження, тим нижче ЕФП клітин крові, тобто спостерігається обернено пропорційна залежність.
Для визначення ЕФП клітин крові кролів брали кров (0,5 мл) з вушної вени, вміщену в трис-гліціновие буфер. Потім клітини крові тричі відмивали в даному буфері і осідали центріфігурірованіем при 1,5 тис об / хв. Потім отримані відмиті еритроцити поміщали в трис-гліціновие буфер і відбирали аліквоту в електрофоретична камеру при кімнатній температурі.
Досвідчені і контрольні зразки крові оброблялися суворо в стандартних умовах при pH буфера 7,2.
У літературі є дані, що свідчать, що метод ЕФП дозволяє виявити дуже слабкі зміни в стані організму, який переніс в минулому вплив іонізуючої радіаціі4. На це вказують результати робіт, в яких виявлено достовірне зниження ЕФП еритроцитів щурів, опромінених дозою 0,01 Гр. Цей ефект проявлявся через 10 - 30 тижнів після променевого впливу і відбивав, на думку авторів, сублетальні пошкодження в стовбурових клітинах кісткового мозку, відповідальних за еритропоез, які викликають появу в кровоносній руслі еритроцитів зі зниженою величиною електричного поверхневого заряду. Продемонстровано зниження ЕФП клітин крові після гамма і нейтронного опромінення, а також осцилюючі коливання ЕФП. Разом з тим інші дослідники повідомили про зростання ЕФП клітин після променевого впливу, зокрема для лейкоцитів крові щурів і лімфоїдних клітин. Таким чином, ЕФП залежить від дози опромінення і виду впливу, а також від самого об`єкта впливу і, в свою чергу, має тенденцію до осцилюють коливань під час і після опромінення. Передбачається, що зниження ЕФП клітин після радіаційного ураження пов`язане з відривом негативно заряджених глікопротеїнів від клітинної поверхні або із зниженням їх синтезу після опромінення. Деякі дослідники припускають, що опромінення призводить до збільшення представленості на клітинної поверхні центрів зв`язування високоактивних молекул типу гепарину, здатних активізувати різні ферменти, наприклад ліпазу, відщеплюється позитивно заряджені угруповання, що може привести до зростання сумарного негативного заряду клітинної поверхні і зниження ЕФП. В цілому відщеплення сіалових кислот та інших компонентів опромінених клітин, як вказують результати експериментів, має місце, особливо при використанні сублетальлними і тим більше летальних доз радіації.
Результати наших вимірювань ЕФП у опромінених кролів представлені в табл. 2.
Таблиця 2. Динаміка зміни ЕФП еритроцитів у опромінених кралею

ЕФП клітин крові після тотального опромінення кролів дозою 500 Р (12,9 * 10 2 Кл / кг) знижується (збільшується час проходження), особливо на 13-у добу. ЕФП також має тенденцію до осцилюють коливань.
Отже, на моделі гострої променевої хвороби показано, що ірідо- лазеропунктура відповідних зон райдужної оболонки веде до стабілізації ЕФП клітин крові кролів, що явно відрізняється від контролю, де даний показник знижується після радіаційного ураження.