Застосування електромагнітних хвиль міліметрового діапазону в експериментальних дослідженнях - комплементарная медицина

З огляду на великий інтерес до вивчення впливу міліметрового діапазону на біологічні об`єкти, а також привабливу перспективу застосування цього фактора для цілей ірідотерапіі, доцільно було простежити ефекти, які виникають при цьому в ізольованих культурах клітин.
Відомо, що ЕМІ високих частот нетепловий інтенсивності може мати суттєвий вплив на різні живі організми, а також на внутрішньоклітинні структури. Експериментально встановлено резонансний характер впливу високочастотного ЕМІ [130]. Передбачається, що дія ЕМВ в діапазоні вкрай високої частоти (КВЧ-діапазону) пов`язано в основному не з порушенням коливань в біоструктури, а зі зміною тих чи інших характеристик вже існуючих в живому організмі автоколивань, зокрема їх спектру [123]. Ці процеси можуть відбуватися в ділянках ліпідних кістяків клітинних мембран, в структурі спіралей ДНК і РНК, в макромолекулах білків і ін. При цьому якщо частота зовнішнього ЕМІ наблизиться досить близько до частоти власних автоколивань однієї зі згаданих груп молекул-осциляторів, відбудуться &ldquo-захоплення&rdquo- енергії і синхронізації автоколивань зовнішнім сигналом [311].
Синхронізація автоколивань різних ділянок клітинних мембран може істотно впливати на процеси мембранного транспорту, і, отже, на властивості і життєдіяльність клітин. При вивченні процесів клітинного ділення під впливом ЕМВ НВЧ-діапазону нетепловий інтенсивності відзначено дію на клітини - як стимулююча, так і гнітюче їх зростання, розподіл, ферментативну активність. Так, ЕМІ в діапазоні частот 42,25 - 41,65 Гц пригнічувало розмноження деяких видів бактерій [312]. При 15-хвилинному опроміненні клітинних суспензій кісткового мозку мишей ЕМІ з частотою 34,3 ГГц і потужністю потоку 100 мкВт / см2 спостерігали помірне підвищення проліфераціонной активності клітин [388] приблизно в 1,3 рази, а при зміні частоти хвилі на 0,01 ГГц ефект стимуляції зникав. Експериментально показано, що ЕМВ частотою більше 50 ГГц перешкоджало прояву in vivo певних життєво важливих процесів, а опромінення клітин
ЕМІ з частотами 70 - 75 ГГц гнітило метаболізм клітин, захищаючи їх тим самим від дії рентгенівських променів [389]. При частотах ЕМІ 41,87- 41,81- 41,70 ГГц спостерігався ефект гальмування росту бактеріальної культури, а випромінювання з частотою 64 - 76 і 66,71- ГГц гальмувало зростання кишкової палички [312]. Дія ЕМВ частотою хвилі 68 ГГц стимулювало зростання клітин [130]. Автори припускають, що описані ефекти пригнічення або стимуляції клітинного росту можна пояснити тим, що ЕМВ не викликає безпосередньо глибоких структурних змін в молекулах ДНК внаслідок малої енергії кванта в порівнянні з енергією хімічних зв`язків в молекулі, а по-видимому, порушуються активність ферментів і їх витік з клітин, що веде до зміни процесів проліферації. Цікаво, що описані ефекти залежать від стадії клітинного циклу в момент опромінення клітин ЕМВ [312].

Відбирали частоти діапазонів ЕМВ НВЧ, при яких не змінюється кінетика клітинного росту і проліферації клітин, що дозволяє вивчити вплив міліметрового випромінювання на біологічно активні зони райдужної оболонки людини з метою отримання терапевтичного ефекту.
Дослідження проводили на трансформованих мишачих фібробластах лінії L929, лінії SH2 [309] і нормальних фібробластах миші, вирощених на твердій скляній підкладці в живильному середовищі 199 з додаванням 10% бичачої сироватки. Вплив ЕМІ на моношар клітинної культури здійснювали за допомогою генераторів типу Г4-141 і Г4-142 з частотними діапазонами 36 - 75 ГГц. Вихідна потужність на хвилеводі склала 9 мкВт / см2, експозиція опромінення дорівнювала 15 хв, відстань від хвилеводу до клітинного моношару склало 2 см. Досліджували вплив ЕМВ - як сумарного, так і окремих частотних інтервалів і окремих частот, що розрізняються на 0,01 ГГц, а також на кінетику клітинного росту, морфологію, вітальність, диференціювання, ЕФП.
Генератори ЕМІ зазначеного типу вибрані не випадково, так як вони використовуються в клініці для лікування патологій шлунково-кишкового тракту, дитячого церебрального паралічу, деяких інших захворювань шляхом опромінення рефлекторних корпоральних точок. Хвилевід генераторів при опроміненні клітин направляли перпендикулярно до скляній підкладці з клітинним монослоем, попередньо відібравши з флаконів живильне середовище і залишивши над клітинами шар рідини не більше 3 мм. Клітини опромінювали в стерильних умовах. Як в контрольних, так і в піддослідних зразках визначали мітотичний індекс, швидкість розмноження, підраховуючи щодоби кількість клітин в 1 мм живильного середовища. Морфологію клітин описували після впливу ЕМВ і підраховували відсоток їх загибелі за допомогою забарвлення вітальним барвником трігановим синім. В суміші судан 3 + 4 клітини фарбували для визначення накопичення в цитоплазмі нейтральних ліпідів з метою виявлення дегенеративних процесів з накопиченням жирів або для визначення можливого процесу диференціювання трансформованих клітин в адипоцити - високодиференційовані жирові клітини. У різні терміни після опромінення ЕМВ клітини контрольних і піддослідних зразків фотографували за допомогою мікроскопа &ldquo-мікрофото&rdquo-. Мітотичний індекс опромінених і неопромінених клітин підраховували на 2-, 4- і 6-у добу після впливу на них ЕМІ, попередньо додаючи в культуру 0,0002% колхіцину. Метафазні пластинки фарбували за допомогою орсеїном і підраховували в 10 полях зору під мікроскопом при збільшенні х 400 як в контрольних, так і в піддослідних препаратах.
Електрофоретична рухливість клітин визначали методом мікроелектрофорезу в електрофоретичної камері до і після впливу ЕМВ на клітинну суспензію. Експозиція мікрохвильового впливу склала 15 хв [311], після чого клітини тричі відмивали по 15 хв в фосфатному буфері, концентрували центрифугуванням при 1000 об / хв і вносили в електрофоретична камеру. Швидкість проходження опромінених і неопромінених трансформованих фібробластів по 50 клітин в кожному зразку між електродами електрофоретичної камери підраховували за допомогою сітки Горяєва і секундоміра. Проводили статистичну обробку отриманих результатів. ЕФП клітин визначали для кожного з десяти частотних діапазонів.
Клітинна культура L929 являє собою спонтанно трансформовані фібробласти підшкірної сполучної тканини мишей лінії С3Н, які тривалий час пассіруемой in vitro з 1940 р Клон L929 є першою високо гетерогенної клонованої лінією, без чітко вираженого модального класу і з великим розмахом мінливості (40 - 115 хромосом). Друга вивчалася нами клітинна лінія SH2 отримана при трансформації ембріональних фібробластів пацюки Фішер ДНК аденовірусу мавпи SA7 і ДНК вірусу гепатиту В. Вона володіє фенотипическими властивостями трансформованих культур: необмеженим ростом, здатністю до зростання без прикріплення до підкладки і формуванню в напіврідкому агарі 9,1% колоній , прищеплюється in vivo, викликає утворення пухлин у новонароджених щурів і хом`яків, продукує специфічний для вірусу SA7 Т-антиген [309].
Перш за все потрібно відзначити, що загибель клітин відразу ж після опромінення їх микроволнами КВЧ-діапазону в інтервалі частот 36 - 55 ГГц не спостерігали. При фарбуванні вітальним барвником трипановим синім і підрахунку живих клітин в камері Горяєва в надсадочной рідини виявили 10 - 30 загиблих клітин в 1 мл живильного середовища, що не відрізнялося від контролю і відсотка природної загибелі клітин в культурі. Морфологія клітин на 1 -4- у добу після опромінення ЕМВ також була подібна до контрольної. Інші параметри і характеристики життєдіяльності опромінених клітин в тій чи іншій мірі відрізнялися від контролю. Так, при вивченні динаміки клітинного росту виявили наступні закономірності: ДНК-трансформована клітинна культура SH2, як і нормальні мишачі фібробласти первинної посадки, виявилися найменш чутливими до впливу ЕМІ, пригнічення клітинної проліферації в даному випадку не виявлено, морфологія клітин також не відрізнялася від контролю. Дуже чутливою до впливу ЕМІ, особливо деяких частотних діапазонів, виявилася трансформована лінія L929.
При впливі ЕМВ на трансформовані фібробласти лінії L929 спостерігали зміна кінетики клітинного росту, митотического індексу, величини ЕФП, морфології клітин для різних частотних діапазонів. Пригнічення клітинного росту сильніше проявилося при дії ЕМВ на клітини, узяті в досвід на стадії фази стаціонарного зростання, особливо застарілі без зміни живильного середовища. Вони мали вакуолізірованную цитоплазму, Пікнотичне ядро. Мікроізлученіе КВЧ-діапазону впливає на такі клітини при пересеве їх в свіжу живильне середовище набагато сильніше, ніж на клітини тієї ж лінії, але взяті в досвід спочатку лаг-фази, т. Е. Приблизно на 2-у добу після посіву. Це свідчить про підвищену реакції на ЕМВ клітин з порушеннями проникності клітинної мембрани.
Частотний діапазон 36 - 55 ГГц дробили на більш дрібні, а саме: 36,1 -38,1- 38,1 -40,1- 40,1 -42,1- 42,1 -44,1- 44,1 - 46,1- 46,1 -48,1- 48,1 -50,1- 50,1 -52,1- 52,1 -54,1 і 54,1 - 55 ГГц для виявлення найактивніших в придушенні або стимуляції клітинної проліферації. Результати експериментів показали, що максимальне переважна ріст пухлинних клітин вплив надавали ЕМІ наступних частотних діапазонів: 38,1 - 40,1- 38,0 - 42,1- 42,1 - 44,2- 44,2 - 46,1 ГГц. Особливо інгібували клітинний ріст частотний діапазон 42,1 - 44,1 ГГц на 61% по відношенню до контролю. Щоб знайти справжню резонансну клітинному розмноженню частоту, інтервал 42,1 - 44,1 ГГц дробили на частоти, що розрізняються на величину 0,01 ГГц, що є граничною роздільною здатністю даного типу генераторів. Виявилося, що мікрохвилі з частотами 42,1 - 43,3 і 42,2 - 42,8 ГГц найбільш максимально гнобили клітинний ріст трансформованої лінії фібробластів L929 і, мабуть, є резонансними для відсотка проліферації.

Результати впливу мікрохвильового опромінення трансформованих клітин наведені в табл. 13.
З табл. 13 видно, що на частотних діапазонах 48,1 - 50,1 і 54 - 55,1 ГГц спостерігали стимуляцію клітинної проліферації на 18 і 33,4% відповідно в порівнянні з неопромінених ЕМІ культурою клітин.
При опроміненні клітин лінії L929 з частотними діапазонами 42 - 44,1 і 44,1 - 46,1 ГГц поряд з пригніченням клітинної поліфераціі спостерігали також зміни морфології клітин. Так, на 5 -6-е добу після опромінення клітин і забарвлення їх гематоксілінзозіном і судан 3 + 4 помічено, що в центрі препарату клітинний моношар набагато менш щільний, ніж по краях, а самі клітини накопичили нейтральні ліпіди в цитоплазмі, вакуолізований, з явним проявом всіх ознак жирової дегенерації. По краях препарату щільність клітинного моношару була подібна до контролем, ознаки жирової дегенерації були відсутні. Таким чином, можна зробити висновок, що подібні &rsquo-&rsquo-вибоїни&rdquo- в клітинному монослое є результатом дії на них ЕМІ. помічені &rsquo-&rsquo-вибоїни&rdquo- в деякій мірі повторювали малюнок площині хвилеводу генераторів ЕМІ. Описані вище ефекти не спостерігали при роботі з клітинами нормальних мишачих фібробластів і трансформованих фібробластів лінії SH2.
Не всі частотні діапазони впливали на клітинний ріст і морфологію. Такі частотні інтервали, як 46,1 - 48,1- 48 - 52,1 і 52,1 - 54,1 ГГц не впливали на досліджувані показники клітинної життєдіяльності, тому ми їх позначили як &ldquo-нейтральні&rdquo-. В даному випадку не спостерігали зміни мітотичного індексу, ЕФП, вітальності для всіх трьох досліджуваних клітинних ліній.

Для виявлення більш глибоких механізмів впливу міліметрового випромінювання на трансформовані фібробласти лінії L929 визначали величину ЕФП до і після опромінення їх ЕМІ. Відомо, що негативно заряджена поверхня клітини притягує з навколишнього середовища протилежно заряджені іони, які під впливом електростатичних сил прагнуть наблизитися до іонізованим групам клітинної мембрани.
Таблиця 13. Вплив мікрохвильового випромінювання КВЧ-діапазону на ЕФП і зростання трансформуючи інших клітин культури L929

Примітка: Знак (-) - зниження проліферативної активності і ЗФП, (+) - збільшення швидкості росту.
В результаті клітина виявляється оточеній подвійним електричним шаром. Потенціал такого подвійного шару називається Z-потенціалом, або електро-кінетичним потенціалом, який є лише частиною повного електрохімічного потенціалу клітини [375]. Величина її Z- потенціалу залежить від товщини подвійного електричного шару клітини: чим товще шар, тим більше величина Z-потенціалу. Для нормального виконання своїх функцій клітини повинні мати стабільний електричний заряд, який залежить від хімічної структури їх поверхневої мембрани і складу навколишнього середовища.
ЕФП, або швидкість переміщення клітин, суспендованих в буферному розчині, у наведеному ЕП залежить від величини Z-потенціалу і змінюється разом з ним. При визначенні ізоелекгріческого стану клітин слід мати на увазі, що на величину pH їх ізоелектричної точки істотно впливають продукти руйнування клітин, які, адсорбируясь на поверхневій клітинній мембрані, знижують ЕФП останніх. Експериментальні дані свідчать, що метод ЕФП дозволяє виявити дуже слабкі зміни стану організму, який переніс в минулому вплив іонізуючої радіації або опромінення електромагнітними хвилями. Показано, що зміна структури подвійного електричного шару поблизу зарядженої мембрани при впливі ЕМВ пов`язано зі зміною активності мембрано-зв`язаних ферментів [375]. Продемонстровано зниження ЕФП клітин крові після гамма і нейтронного їх опромінення та відзначено осцилююче коливання ЕФП. Передбачається, що опромінення іонізуючою радіацією або ЕМІ призводить до збільшення представництва на клітинної поверхні центрів зв`язування високоактивних молекул, здатних активізувати різні ферменти, які відщеплюють позитивно заряджені угруповання, що, в свою чергу, може привести до зростання сумарного негативного заряду клітинної поверхні і зниження ЕФП. Показано, що вплив ЕМВ малої інтенсивності призводить до зменшення ЕФП еритроцитів крові [389].
Нашими дослідженнями продемонстровано, що мікрохвильове опромінення трансформованих фібробластів лінії L929 призводить до зниження їх електрофоретичної активності: в різному ступені в залежності від опромінення різними частотними діапазонами (табл. 13). З табл. 13 видно, що найбільше зниження ЕФП клітин лінії L929 спостерігали при опроміненні клітин наступними діапазонами частот: 36,1 -38,1- 42,1 -44,1- 44,1 -46,1 ГГц. Цікавим є той факт, що саме дія цих частот в найбільшою мірою пригнічує клітинну проліферацію. Подібні дослідження проводили і на первинних культурах нормальних фібробластів мишей, але достовірного зниження ЕФП при опроміненні ЕМВ не виявлено. Мабуть, фібробласти лінії L929 мають трансформовану клітинну мембрану, і вплив мікрохвиль змінює її Z-потенціал, на відміну від клітинної мембрани нормальних фібробластів. Отже, неушкоджені мембрани нормальних мишачих фібробластів володіють деякою резистентністю до впливу міліметрового опромінення КВЧ-діапазону, що підтверджується і результатами стабільної кінетики клітинного росту in vitro.
При сумарному опроміненні трансформованих фібробластів лінії L929 по черзі всіма частотними інтервалами або ж відразу всім діапазоном ЕМІ в хитному режимі виявили &ldquo-нейтральне&rdquo- дію такого роду випромінювання, що ще раз підтверджує гіпотезу &ldquo-резонансного&rdquo- характеру дії мікрохвиль. Ймовірно, ефект пригнічення або стимуляція спостерігається лише в тому випадку, коли &ldquo-частотне вікно&rdquo- збігається за спектром коливання з мікроструктурами клітини і входить з ними в резонансна взаємодія. І чим ближче випробувана частота наближається до істинного значення автоколивань клітинних структур, тим сильніше виявляється ефект впливу мікрохвиль на життєдіяльність клітин. При зміні значення частоти на 0,01 ГГц іноді спостерігали часткову або повну нейтралізацію ефекту пригнічення або стимуляції проліферації клітин. Ці явища найбільш виражені на наступних частотних діапазонах: 36,1 - 38,1- 44,1 - 46,1 і 54-55 ГГц, що схоже з даними, отриманими на бактеріальних культурах зарубіжними дослідниками [130].
З метою виявлення ефекту посилення диференціювання трансформованих фібробластів лінії L929 вивчали частотний діапазон ЕМІ 42,1 -44,1 ГГц, на якому відбувалося максимальне пригнічення розмноження пухлинних клітин, а саме - на 60% контролю. Для проведення експерименту діапазон ЕМІ &ldquo-дробили&rdquo- на частоти, що розрізняються на 0,01 ГГц. При фарбуванні препаратів в розчині судан 3 + 4 виявили накопичення в цитоплазмі клітин нейтральних ліпідів, але повного дозрівання фібробластів в адипоцити не відбувалося. Можна зробити висновок, що процес диференціювання фібробластів по адіпоцітарному типу стимулюється, але не завершується. Для цього необхідний комплекс додаткових умов. Виявили, що максимальне число жирових включень викликало опромінення клітин частотами 46,2 -46,3 ГГц.
Таким чином, частотні діапазони ЕМВ НВЧ за характером впливу на клітинну проліферацію можна розділити на наступні частотні інтервали, &ldquo-резонансні клітинному розмноженню&rdquo-: 48,1 - 50,1 ГГц - стимуляція клітинного росту в середньому на 33% в порівнянні з контролем, інтервали 40,1 -42,1- 42,1 - 44,1- 44,1 -46,1 ГГц -ефект гноблення клітинної проліферації в середньому на 45% в порівнянні контролем. Подібна дія мікрохвильове випромінювання надавало тільки на трансформовані фібробласти лінії L929 і не впливало на нормальні мишачі фібробласти і трансформовані клітини лінії SH2. Встановлено нейтральні частотні діапазони, що не роблять впливу на морфологію, ЕФП і розмноження клітин лінії L929, такі, як 46-48,1- 50,1 -52,1 і 52,1 -54,1 ГГц. Саме їх в подальшому можна застосовувати в дослідженнях по ірідопунктуре ЕМІ. Можна також зробити висновок, що трансформовані фібробласти SH2 набувають резистентності до мікрохвильового впливу, що має певне теоретичне значення.
Гнітюче дію мікрохвиль описаних вище частотних діапазонів проявляється в тому, що їх дія затримує вступ клітин в логарифмічну стадію зростання приблизно на 10 год в порівнянні з контролем, про що свідчить низька мітотична активність на 2 - 3-е добу після пересіву. І навпаки, ефект стимуляції клітинної проліферації частотним діапазоном 48,1 - 49 ГГц супроводжується зменшенням стадії спокою клітин після пересіву приблизно на 6,5 год.

Оскільки ЕМВ НВЧ-діапазону певним чином впливає на клітини, ряд даних свідчить про прояв синергізму при комбінованому застосуванні ЕМВ НВЧ-діапазону і протипухлинних препаратів, представляли інтерес вивчення їх взаємодії на клітини в культурі і виявлення особливостей зазначеного впливу на нормальні і пухлинні клітини. В якості моделі цитостатичної дії використовували ранній ембріогенез морського їжака. Для дослідження характеру впливу ЕМВ НВЧ-діапазону і протипухлинних препаратів застосовували лімфоцити периферичної крові щурів 1,5 -2-місячного віку і клітини лімфосаркомі плісе. З цитостатиків були обрані препарати цисплатин і адріабластін. Для вивчення ЕМІ КВЧ діапазону використовували пристрій &ldquo-Поріг&rdquo-, що генерує поодинокі імпульси із середньою потужністю випромінювання не більше 1 * 10&ldquo-`2 Вт / см2 як прилад, широко застосовуваний в клінічній практиці.
Оцінку впливу протипухлинних препаратів в поєднанні з ЕМВ НВЧ-діапазону на ранній ембріогенез морського їжака проводили через 5, 10 і 24 годин після запліднення яйцеклітин. У контрольній суспензії запліднені яйцеклітини протягом усього періоду спостереження перебували в процесі активного дроблення і до 24 год досягли середньої гаструли 2. Така сама картина в поле зору спостерігалася в перші години і після інкубації ембріонів морського їжака з протипухлинними препаратами. У міру збільшення інкубації з протипухлинними препаратами відзначалася затримка розвитку ембріонів морського їжака. Збільшення концентрації цитостатиків призводило до більш вираженого процесу гальмування ембріогенезу. При цьому цитостатический ефект зміщувався вліво. Принципово інший цитостатический ефект виявили при одночасному впливі ЕМВ НВЧ-діапазону і цитостатиків. Гальмування процесу ембріогенезу відзначено в перші години спостереження. Загибель і лізис ембріонів морського їжака відбувалися вже через 10 годин після інкубації. При аналізі процесу ембріогенезу через 24 ч встановлено, що цитостатический ефект цисплатину збільшився в 2 рази, а адріабластін - в 20 разів.
Отже, в результаті зазначених видів впливу розвивається цілий комплекс мембранних і внутрішньоклітинних змін, що призводять до порушення процесів ембріогенезу морського їжака. основну роль &ldquo-пускового агента&rdquo-, на думку різних дослідників [110], грають зміна мембранного потенціалу і стан цитоскелету.
Подібність транспортних процесів в мембранах запліднених яєць морського їжака, соматичних і лімфобластних клітин стало підставою для подальшого вивчення цих процесів з використанням інших підходів. Тому було визнано за доцільне досліджувати поєднане вплив цитостатиків і ЕМІ на електрофоретичний заряд клітинної поверхні з метою розширення уявлень про механізм дії протипухлинних препаратів і явищ синергізму при накладенні ЕМП КВЧ-діапазону.
У наших дослідженнях величина ЕФП лімфоцитів при впливі цисплатину і адріабластін істотно змінюється по відношенню до контролю і має різні величини. При цьому зміни для різних видів впливу мають свої особливості. Застосування цитостатиків в комбінації з ЕМІ різко змінює як характер залежності кривої ЕФП від часу впливу, так і самі величини ЕФП. Примітно, що всі спостерігалися зміни ЕФП були ранніми, т. Е. Відзначалися вже через 5 хвилин після початку впливу. У наступні терміни характер реакції ЕФП на різні види впливу мав свої особливості. Так, при дії адріабластін спостерігалося подальше збільшення ЕФП клітин. Через 15 хв відзначалося деяке його зниження. Одночасне застосування адріабластін і ЕМІ призводило до &ldquo-фіксації&rdquo- досягнутих значень ЕФП.
При інкубації лімфоцитів з цисплатином ЕФП клітин підвищувалася в меншому ступені в порівнянні з адріабластін. Крива зміни ЕФП під впливом ЕМВ була подібна до такої динаміки ЕФП лімфоцитів під дією платини. Спільне застосування цисплатину і ЕМІ призводило до значного збільшення ЕФП тільки в перші хвилина спостереження, що може свідчити про мембранної компоненті як першій ланці реалізації біологічної дії зазначених факторів.
Інша реакція спостерігалася при впливі на лімфобластні клітини лімфосаркомі щурів. Так, в перші хвилини після введення адріабластін ЕФП пухлинних клітин незначно збільшувалася, а потім слід було різке її гальмування. Слід зазначити, що гальмування ЕФП було оборотним. Реакція пухлинних клітин на введення цисплатину була більш виражена і адекватна чутливості нормальних клітин. При комбінованому впливі характер кривої ЕФП пухлинних клітин принципово відрізнявся від такої, яка описує реакцію клітини на введення цитостатика.
При зіставленні реакції ЕФП нормальних і пухлинних клітин на обробку цитостатиками звертає на себе увагу подібність змін ЕФП (чи не абсолютні значення, а їх відносні величини) при дії цисплатину на лімфоцити і лімфобластні клітини. Характер дії адріабластін на лімфоцити виражений в набагато меншому ступені, ніж на лімфоцити. Реакція пухлинних клітин на ЕМВ принципово відрізнялася від такої нормальних клітин: відмінності були особливо виражені в перші 15 хв. Тому комбіноване впливу ЕМІ і цитостатиків призвело до іншого характеру зміни ЕФП: збільшення ЕФП лімфобластних клітин в даному випадку було набагато менш вираженим, ніж при дії на лімфоцити.
Аналізуючи ЕФП клітин через 1 год після початку впливу, слід зазначити функціональну &ldquo-глухоту&rdquo- пухлинних клітин в порівнянні з лімфоцитами. Так, ЕФП лімфоцитів після комбінованого впливу ЕМІ і цисплатину зросла на 97%, в той час як лимфобластов підвищилася тільки на 49% - при впливі ЕМВ і адріабластін ЕФП лімфоцитів збільшилася на 190%, а лимфобластов -на 71%. Інтерпретуючи коефіцієнт кореляції між ЕФП лімфоцитів і лімфобластних клітин при різних видах впливу, можна припустити, що модифікуючу дію ЕМВ і цитостатиків у нормальних і пухлинних клітин реалізується на рівні мембранних процесів і клітинних сигналів.
З огляду на функціональні особливості плазматичних мембран нормальних і пухлинних клітин і їх відмінність в реакції на фактори екзогенного впливу, можна припустити, що підвищення ефективності цитостатиків спостерігається не стільки за рахунок синергізму, скільки через підвищення вибірковості їх дії.
Таким чином, відсутність односпрямованість реакції нормальних і пухлинних клітин на впливу ЕМВ НВЧ-діапазону служить підставою як для підбору оптимальних модифікаторів біологічної дії цитостатиків, так і для підвищення вибірковості їх дії шляхом створення оптимальних схем і режимів введення препаратів [388, 389].
* * *
Уважний читач, звичайно, помітив, що теоретичні розділи 3.1 і 3.2 цієї глави складають дисонанс з розділом 3.3 і 3.4, де описується стан справ в клінічній практиці і експерименті. І цей дисонанс обумовлений, на жаль, аж ніяк не розходженням наукових інтересів авторів розділів або улюблених ними стилів викладу. Причина його криється в об`єктивних відмінностях стану теоретичної та практичної рефлексології.

У фундаментальній рефлексології дослідник має можливість будувати концепцію на основі найбільш фундаментальних фізіологічних і біофізичних закономірностей, т. Е. Що називається &ldquo-з перших принципів&rdquo-. У практичній же рефлексології історично склалася зовсім інша ситуація. Удавана світоглядна і методологічна несумісність традиційних навчань східної медицини і західної позитивної біології привела до того, що на протязі багатьох десятиліть, ще до недавнього часу, європейський рефлексотерапевт - будь то клініцист або експериментатор - був змушений не тільки будувати цілісні патогенетичні концепції, скільки будь-якими доступними шляхами доводити собі самому і своїм колегам, що рефлексологія - не казка, що не повітряний замок, а сукупність методів, що дають реальні біологічні ефекти.
При цьому зміст поняття &ldquo-доступні шляхи&rdquo-, природно, було різним для різних дослідників і в кожному конкретному випадку визначалося спрямованістю наукових та клінічних інтересів автора, методичної та технічної оснащеністю досліджень і т. п. В результаті був накопичений великий масив досить різнорідною біологічної інформації, проте визначити місце кожної конкретної комірки цього масиву в цілісній системі біологічного знання виявилося вельми проблематично.
Тому, відмовившись від яких би то не було спроб чисто вербально &rsquo-&rsquo-згладити&rdquo- дисонанс між розділами даної глави, ми сподіваємося, що саме характер цього дисонансу допоможе з`ясувати, яких саме даних в кожній конкретній галузі практичної рефлексотерапії не вистачає для того, щоб отримати можливість будувати патогенетичну концепцію і відповідно терапевтичну стратегію на основі &ldquo-перше принципів&rdquo- фізіології і біофізики.
Все сказане стосується не тільки до рефлексотерапії, але і до інших областей комплементарної медицини: гомеопатії, електромагнітної терапії та ін. Тут мають місце приблизно ті ж труднощі суб`єктивно-психологічного характеру, і тому точно так же відбувається накопичення розрізнених даних. Сподіваємося, що матеріал цієї глави буде корисний не тільки рефлексотерапевтам.