Печінкові синусоїди і простір діссе - системи організму (гістологія)
На підставі досліджень, виконаних під світловим мікроскопом, було висловлено припущення про наявність простору між стінками синусоїдів і прилеглими до них гепатоцитами. Як було встановлено електронно-мікроскопічними дослідженнями, це простір, що отримало назву простору Діссе, що не артефакт, обумовлений стисненням тканини (рис. 22 - 15 і 22 - 16). Це реально існуюче простір містить плазму крові, однак клітини крові в нормі тут в постнатальної життя невідомі.
Мал. 22 - 15. Електронна мікрофотографія печінки щури- х5100 (з люб`язного дозволу Е. Rau).
Зверніть увагу на простір Діссе (7), розташоване між клітинами, що вистилають гепатоцитами (З). Між гепатоцитами можна бачити жовчні капіляри (4). У цитоплазмі гепатоцитів ділянки, що містять глікоген (5), чергуються з ділянками, в яких розташовується гранулярний ендоплазматичнийретикулум і мітохондрії. Видно також ліпідні краплі (6) і дві купферови клітини (7).
Мал. 22 - 16. Електронна мікрофотографія синусоїда (1) печінки щура, на якій видно ендотеліальна клітина (2), оточена з усіх боків гепатоцитами (J) - х 11 000 (з люб`язного дозволу A. Blouin) Численні микроворсинки на поверхні гепатоцита, зверненої в синусоид, тягнуться через простір Діссе (4), досягаючи ендотеліальних клітин. Зверніть увагу на те, що ендотеліальна клітина в області кордону з простором Діссе не оточений базальноїмембраною. Стрілкою відзначений виріст підтримуючої клітини (накопичує ліпіди), показаної на рис. 22 - 20.
У цьому просторі розташовується величезна кількість мікроворсинок, які виступають зі вільних поверхонь гепатоцитів, що обмежують простір Діссе (рис. 22 - 16 і 22 - 17).
Клітки, що утворять СТЕНКИ синусоїди
Розвиток уявлень. Під світловим мікроскопом вже давно було встановлено, що вистилання печінкових синусоїдів відрізняється від вистилки звичайних капілярів тим, що її утворюють два різних типи клітин. Клітини одного типу - відносно тонкі і плоскі, що нагадують ендотеліальні клітини звичайних капілярів, однак клітини другого типу значно більші. На зрізах вони часто мають зірчастий вигляд, чому свого часу вони і отримали найменування зірчастих клітин Купфера на ім`я дослідника, вперше описав їх в кінці минулого століття. Зараз вони відомі під назвою купферови клітин (рис.15). Вони за своїм походженням відрізняються від ендотеліальних клітин тим, що є похідними моноцитів і тому з усіх практичних міркувань їх слід розглядати як макрофаги.
Щільні тільця (ймовірно, вторинні лізосоми) видно приблизно в середині клітини-одне з них особливо велике і округле. Відзначте численні псевдоподии в цьому типі макрофага- вони добре помітні правіше центру. Видно також окремі мітохондрії, особливо в лівій половині клітини.
При описі кісткового мозку і лімфатичних вузлів зазначалося, що синусоїди в цих тканинах вистелені звичайними ендотеліальними клітинами. Дослідження за допомогою електронного мікроскопа вказують, що фагоцитирующие клітини лише пов`язані з цими синусоїдами. Може все ж здатися, що такі клітини входять до складу вистилання синусоидов, тому що, хоча вони розташовуються уздовж зовнішньої поверхні стінок синусоїда, вони зазвичай за допомогою псевдоподий проникають між ендотеліальними клітинами в просвіт синусоїдів. У печінці, однак, купферови клітини дійсно утворюють частину вистилки, так як вони лежать між ендотеліальними клітинами.
Ультраструктура купферови клітин.
Мал. 22 - 17. Електронна мікрофотографія купферови клітини (1) в просвіті синусоїда (2) печінки щури- х 9700 (з люб`язного дозволу A. Blouin).
Як можна бачити на рис. 22 - 17, купферови клітини мають неправильні обриси - їх цитоплазма утворює виступи у вигляді псевдоподий і мікроворсинок, а між відростками в цитоплазму вдаються щілини. Особливістю купферови клітин є те, що в їх цитоплазмі знаходяться своєрідні трубочки, схожі на черв`ячків, які, ймовірно, являють собою депо клітинної мембрани, необхідне для швидкої фагоцитарної реакції у відповідь на потрапляння в клітину будь-яких частинок. Ядро купферови клітин схоже з ядром макрофагів.
В цитоплазмі видно укладені в мембрану простору, які, можливо, представляють собою піноцитозні або фагоцитозного бульбашки. У цитоплазмі може перебувати фагоцитований матеріал, наприклад залізо в формі гемосидерину, що утворюється при фагоцитозі і руйнуванні «старих» еритроцитів. Є також мітохондрії (рис. 22 - 17), деяка кількість цистерн шорсткогоЕПР (як видно на рис. 22 - 17) - апарат Гольджі розвинений слабо. Вельми часто зустрічаються щільні тільця (вторинні лізосоми) - кілька таких тілець видно на рис. 22 - 17. Віссе (Wisse Е., 1972) виявив, що цитоплазма купферови клітин на відміну від цитоплазми ендотеліальних клітин дає позитивну реакцію на пероксидазу. Це створює ще одну можливість розрізняти купферови і ендотеліальні клітини і, звичайно ж, свідчить на користь їх моноцитарного походження (дня моноцитів також характерно присутність гранул, що дають реакцію на пероксидазу).
Мал. 22 - 18. Електронна мікрофотографія синусоїда (1) печінки щура на поперечному зрізі, на якому видно ендотеліальна клітина (2) вистілкі- х 14300 (з люб`язного дозволу A. Blouin).
Міжклітинні щілини або цитоплазматичні фенестри (3) забезпечують сполучення між просвітом синусоїда і простором Діссе (4). Зверніть увагу на те, що в просторі Діссе відсутня базальна мембрана. Стрілками відзначені цитоплазматичні вирости підтримують клітин (клітин, що накопичують ліпіди, одна з яких показана на рис. 22 - 20). Видно також численні мікроворсинки на зверненої до синусоїди поверхні гепатоцитів (5).
Мал. 22 - 19. Мікрофотографія синусоїда і простору Діссе печінки щура, отримана за допомогою скануючого електронного мікроскопа (Brooks S., Haggis G., 1973).
Поверхня відколу, зробленого після заморожування, йде через синусоид в центрі і включає частини двох гепатоцитів (/) по обидва боки синусоїда. Добре видно мікроворсинки (2), що йдуть з поверхонь гепатоцитів в простір Дисс. Показана внутрішня поверхня (3) ендотеліальної стінки синусоїда (сколота косо). Зовнішня поверхня синусоїда відзначена зірочкою. На зовнішній поверхні синусоїда видно окремі ретикулярні волокна. Фенестрірованного зони в ендотелії (гратчасті пластинки) показані стрілками.
Ультраструктура ендотеліальних клітин, що вистилають синусоїди. Після того як при використанні електронної мікроскопії було підтверджено існування простору Діссе, виник інтерес до питання про те, чому плазма крові і хиломікрони проникають через стінку судини, а тромбоцити і інші формені елементи крові нею затримуються. Численними електронно-мікроскопічними дослідженнями встановлено наявність дрібних отворів в вистиланні синусоидов (рис. 22 - 18), які можуть бути або щілини між сусідніми ендотеліальними клітинами, або фенестри в їх цитоплазмі. Можна, однак, заперечити, що такі дрібні дефекти в вистиланні можуть виникнути в результаті артефакту фіксації.
Віссе в своїх дослідженнях печінки при перфузії її фіксуючим розчином прийшов, однак, до інших висновків про вистиланні синусоидов - він не виявив зазорів між сусідніми ендотеліальними клітинами і тому говорив про синусоїдах як про судинах із суцільними стінками. Більш того, він виявив, що пори концентруються в дуже стоншених ділянках цитоплазми, які він назвав гратчастими пластінкамі- останні показані на рис. 22 - 19. Згідно з його уявленням, пори ґратчастих пластинок є єдиним шляхом сполучення між просвітом синусоїдою і простором Діссе. Пори в ґратчастих пластинках мають овальну форму і не перекриті діафрагмами, як в фенестрірованного капілярі звичайного типу-їх середній діаметр становить 100 нм. За відсутності будь-яких інших щілин в стінках синусоїдів, гратчасті пластинки грають роль фільтрів, так що хиломікрони, наприклад (які мають приблизно той же розмір, що і пори), здатні проникати в простір Діссе, а більші частки затримуються. Більш того, з ендотеліальними клітинами не пов`язана базальнамембрана, яка могла б стати на заваді проникненню речовин через них (як показано на рис. 16 і 22 - 18).
Як підтримується цілісність стінок синусоїдів. У зв`язку з тим що ендотелій, що вистилає синусоїди, не має підтримуючої його базальної мембрани, слід розглянути питання про те, що ж утримує цю вистилання і не дає їй розпластатися, притулившись до поверхні гепатоцитів, зверненої в синусоїди, викликаючи облітерацію простору Діссе.
Перш за все слід враховувати, що пори в ґратчастих пластинках не перешкоджають вільному проходженню плазми в простір Дисс. Тому гідростатичний тиск в просторі Діссе не відрізняється від тиску в синусоїді і зусилля, що прагне притиснути ендотелій до гепатоцитах, не створюється.
Мал. 22 - 20. Електронна мікрофотографія, на якій показана клітина, що накопичує ліпіди (ліпоціт) - х 11 500 (з люб`язного дозволу A. Blouin).
Ліпоціт (1) розташований між двома гепатоцитами (2) - він пов`язаний з купферови кліткою (3) в синусоїді (просвіт якого видно, як світлий простір внизу праворуч). Просвіт іншого синусоїда з ендотеліальної клітиною {4) вистилання видно вгорі праворуч. Глобули (5), що містять ліпіди, в ліпоціте частково екстрагованих фіксатором. Стрілкою показаний відросток цитоплазми, що відходить від ліпоціта- вважається, що такі відростки забезпечують опору для ендотеліальних клітин, що вистилають синусоїди (як це видно вгорі праворуч), а також для купферови клітин в стінках синусоїдів.
Далі, сам простір Діссе містить різні структури, які виконують підтримуючі функції. Як можна бачити на рис. 22 - 16 і 22 - 18, в нього проникають численні мікроворсинки, розташовані на поверхні гепатоцитів, зверненої до синусоїди. Крім цього, як показав Віссе, шар ендотеліальних клітин місцями підтримується цитоплазматическими відростками накопичують ліпіди клітин, які іноді називають липоцитов. Ці клітини розташовуються між гепатоцитами і пов`язані з простором Діссе синусоидов, тому їх можна розглядати як особливий тип інтерстиціальних клітин в паренхімі. Ліпоціт, що містить ліпідні трофічні краплі, видно на рис. 22 - 20 відзначений також і один з його відростків (стрілка). Два відростка липоцитов, підтримують ендотеліальну вистилання іншого синусоїда, показані на рис. 22 - 18.
Крім того, слід враховувати, що цитоплазма ендотеліальної клітини, ймовірно, не така тендітна, якою вона представляється, так як в ній містяться мікротрубочки і філаменти. Більш того, ендотеліальні клітини пов`язані один з одним міжклітинних контактів, очевидно, типу fascia осcludens. І нарешті, в просторі Діссе є ретикулярні волокна. Деякі з них видно внизу праворуч на рис. 22 - 19. Ці тонкі міжклітинні волокна, як вважають багато дослідників, є головними опорними утвореннями не тільки в стінках синусоїдів печінки, але також і м`якої тканини печінкової часточки в цілому.
