Ти тут

Мікротомних ножі - основи гістології

Зміст
основи гістології
Короткий нарис історії гістології
цитологія
клітка
цитоплазма
ядро
життєдіяльність клітини
розподіл клітин
епітеліальна тканина
Сполучна тканина
кров
Ще не зцементована неоформлене сполучна тканина
ретикулярна тканина
Щільна волокниста сполучна тканина
хрящова тканина
Кісткова тканина
М`язова тканина
нервова тканина
Нервові волокна і закінчення
Серцево-судинна система
органи кровотворення
Травна система
залози
шкіра
система виділення
Органи дихання
Нервова система, органи чуття
статева система
Організація робочого місця лаборанта-гістолога
Техніка виготовлення гістологічних препаратів
Взяття і етикетування матеріалу
Завдання і правила фіксації
фіксуючі засоби
Промивання, зневоднення гістологічного матеріалу
Просочування і заливка гістологічного матеріалу
Підготовка тканин для електронно-мікроскопічного дослідження
Мікротоми і робота з ними
Мікротом заморожують, охолоджуючий столик
Догляд за мікротомів, мікротом-кріостат
мікротомних ножі
Ультратом
Приготування зрізів з парафінових блоків
Приготування целлоідінових зрізів
Фарбування і висновок зрізів
Просвітлення і висновок зрізів, висновок в смоли
Висновок в водні середовища
Методи фарбування препаратів
Приготування і фарбування мазка крові для підрахунку лейкоцитарної формули
Фарбування тканини за методом ван-Гізоном, Маллорі
Фарбування сполучної тканини АЗУР еозином
Фарбування еластичних волокон методом Унни-Тенцера, резорцин-фуксином
Виявлення аргірофільних волокон, елементів нервової системи
Імпрегнація за методом Більшовского-Грос
Виявлення нервових елементів методом прижиттєвого фарбування метиленовим синім
Імпрегнація елементів макрогліі
Безин`екціонний метод вивчення судин по В. В. Купріянова
Обробка і фарбування кісткової тканини, декальцинація, фарбування
гістохімічні методи
Виявлення (сумарне) білків
виявлення полісахаридів
Виявлення та ідентифікація кислихмукополісахаридів
Комбіновані гістохімічні методи (для полісахаридів і протеидов)
Фарбування жирів і ліпідів, виявлення заліза
Гистохимія нервової системи
Гистохимія ферментів
Застосування ізотопів в гістології
Приготування пленчатих препаратів
Обробка матеріалу біопсії

Різання досліджуваного об`єкта на мікротому виробляють за допомогою спеціальних мікротомних ножів.
Існує кілька різновидів мікротомних ножів. В основу їх класифікації покладено форма леза. Ножі типу А мають одну поверхню увігнуту, а іншу рівну. У ножів типу В увігнутість менш виражена.

Типи мікротомних ножів
Мал. 68. Типи мікротомних ножів (А, В, С).

Відео: Робимо рукоять ножа з G10



мікротомних ніж
Мал. 69.
Приготування до виправлення (точці).
I - мікротомних ніж з обушком- 2 -з ручкою.

 Ножі типу С мають рівну поверхню з обох сторін. Звуження ножа від спинки до ріжучого краю досить значна, завдяки чому торцева частина має характерний вигляд, за яким легко визначити тип ножа (рис. 68).
Ріжучий край мікротомних ножа на відміну від звичайної бритви має так званий фасеточний ш л і ф, т. Е. Кут перетину леза, що утворюється в результаті заточування леза під деяким кутом щодо його поверхні.
Ножі типу А роблять з відносно м`якою стали, застосовують при різанні дрібних об`єктів, залитих в целлоидин складаються з тканин малої і середньої щільності (залози, стінка внутрішніх органів і т. Д.).
Ножі типу В (мають меншу увігнутість леза, ніж тип А) виготовляють з більш твердої сталі і вживають як для приготування целлоідінових зрізів, так і при різанні матеріалу, залитого в целлоидин-парафін.
Ножі т і п а С (з твердої сталі) служать для різання найбільш щільного матеріалу (кістка, хрящ, шкіра), залитого в різні середовища, парафінових блоків, а також для отримання зрізів при роботі на заморожувати мікротому. Довжина ножів може бути різною - від 10 до 50 см.
Слід пам`ятати, що отримати хороший тонкий зріз можна тільки при наявності правильно заточеного, дуже гострого мікротомних ножа. Існує ряд способів точки ножів, але найбільш надійним досі є ручна точка на спеціальному точильному камені з наступним шліфуванням на ремені.

Мал. 70.
Порядок руху мікротомних ножа при точці.



Однак цей спосіб вимагає великої практики і вміння, придбаних поступово в процесі роботи.
Однією з умов успішного заточування і правки є збереження такого положення ножа, коли ріжучий край і площину леза знаходяться під кутом один до одного. Для цього ніж повинен бути забезпечений з боку спинки спеціальним металевим пристосуванням - обушком. Для зручності під час роботи необхідно мати пригвинчувався ручку (рис. 69).
Спочатку мікротомних ніж точать на камені, попередньо змоченим водою або маслом, для чого правою рукою ніж беруть за ручку, а лівою - за вільний кінець і кладуть на протилежний від себе край каменя таким чином, щоб ріжуча поверхня стикалася з усією поверхнею каменю по всій його глибині і була звернена в сторону точа. Для того щоб все лезо заточувалося рівномірно, ножа надають таке вихідне положення, при якому край ножа збігається з краєм каменю (рис. 70). Після цього починають точку рухом ножа на себе, поступово зміщуючи ніж в сторону з таким розрахунком, щоб під час руху вся ріжуча поверхня від одного кінця ножа до іншого пройшла по каменю. При цьому весь час треба стежити за постійним зіткненням заточуваного краю ножа з поверхнею каменю і не натискати на ніж, а лише водити його в заданому напрямку. Після закінчення руху ніж перевертають через спинку (щоб уникнути пошкодження ріжучого краю) і виробляють рух в зворотному напрямку. Час заточування різне, так як воно залежить від багатьох факторів: стану ножа, марки стали, якості каменю, кваліфікації точильника. Крапку можна вважати закінченою, якщо при розгляді в мікроскоп (при малому збільшенні) ріжучий край виглядає рівним. При гарному догляді за ножем, правильної їх експлуатації загострювання займає 20-30 хв. Запущені ножі, з великими зазублинами вимагають тривалої точки (до декількох годин).
Після того як загострювання закінчено, ніж слід вимити, насухо витерти і направити на ремені (відшліфувати). Точильний ремінь повинен мати тверду основу, інакше важко рівномірність руху ножа і стирається кут заточки. Якщо в лабораторії немає фабричного ременя, його можна зробити самим. Для цього необхідно мати ремінь з натуральної шкіри (типу поясного ременя шириною 5-6 см) і чотиригранний брусок з шириною граней, що дорівнює ширині ременя, і довжиною 25-35 см. За допомогою столярного або іншого відповідного клею шматки ременя щільно приклеюють шорсткою поверхнею назовні . Три сторони ременя покривають рівномірним шаром спеціальної пасти, яка на кожній стороні різниться за складом, а четверту залишають вільною.
Правку мікротомних ножа роблять за допомогою таких же рухів, як і загострювання, тільки ніж розташовують на ремені таким чином, щоб під час руху на себе він був звернений до Точа спинкою, а не ріжучим краєм, як під час точки. Спочатку правлять на стороні, покритої грубої пастою (№ 1), потім переходять послідовно на більш ніжні пасти (№ 2 і 3) і закінчують шліфуванням на чистому ремені. По кожній поверхні проводять по 20-30 разів. Добре відточений і спрямований мікротомних ніж повинен легко перерізати підтримуваний за один кінець людську волосину і не залишати борозен на поверхні парафіну та блоку при його різанні.
Для того щоб додати стійкість точильного каменя і оберегти його від поломки, рекомендується вставити камінь у дерев`яну оправу, яка повинна бути нижче його верхнього краю на 0,5-1 см. Рекомендується також при заточуванні і правці бритв камінь і ремінь закріплювати на столі. Це значно полегшує процес роботи.

Мал. 71.
Кут нахилу мікротомних ножа.
а- занадто великий-б - занадто маленький-в - правильний (15 °).


Мал. 72.
Кут різання мікротомних ножа.
а - найбільш распространенний- б - для серійних срезов- в - для різання целлоідінових блоків.
Існують і інші способи точки і правки мікротомних ножів за допомогою більш складних пристроїв.

Правила різання на мікротому

Загальні відомості. Передумовою для отримання хороших гістологічних зрізів служить правильний вибір кута нахилу ножа (рис. 71) і кута різання (рис. 72).
Під кутом нахилу розуміють кут, утворений нижньою поверхнею ножа з площиною різання. Найкращим вважається такий кут нахилу, при якому площина заточування ножа розташована паралельно верхньої поверхні блоку. Зазвичай він дорівнює 13-15 °. Якщо ніж встановлений так, що кут нахилу більше оптимального, то зріз буде кришитися, якщо менше - різка неможлива, так як лезо ножа буде лише ковзати по поверхні блоку.
Під кутом різання на увазі кут між довгою віссю ножа і уявною лінією, що йде через центр блоку паралельно руху санчат, які несуть ніж. Величина кута різання залежить від властивостей оброблюваного матеріалу: чим він м`якше, тим кут менше, і, навпаки, чим твердіше, тим кут більше. При косому розташуванні ножа зменшується опір його ріжучого краю поверхні блоку, що полегшує різання м`яких блоків. Максимальний кут різання дорівнює 90 °, мінімальний - 20-30 °.
Спосіб приготування гістологічних зрізів залежить від виду заливки і властивостей самого матеріалу.


Відео: Верстат для заточування ножа до бритвеною гостроти


Поділися в соц мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Схожі повідомлення

Увага, тільки СЬОГОДНІ!