Мікротоми і робота з ними - основи гістології
Відео: Мікроскоп. Microscope 1
Мікротом - спеціальний механічний пристрій, призначений для приготування гістологічних зрізів певної товщини.
Вітчизняна промисловість випускає три типи мікротомів: 1) санний (МС-2) -щоб одержати парафінових і целлоідінових срезов- 2) для парафінових зрізів - призначений для отримання серійних зрізів матеріалу, залитого в парафін- 3) заморожують - мікротом, що має спеціальний пристрій для заморожування об`єкта, що дозволяє різати нефіксований, свіжий матеріал.
Санний мікротом (МС-2)
Прилад отримав назву завдяки тому, що ніж і механізм подачі з затискачем для блоку (об`ектодержателем) рухаються на спеціальних санчатах (рис. 63).
Основні частини мікротома: станина, механізм мікроподачі, механізм підйому, затиск для блоків (об`ектодержатель), ножові санчата з ножедержателем.
Мал. 63.
Санний мікротом. Пояснення в тексті.
Станина - масивна чавунна основа, на якій монтуються всі інші вузли (1). У верхній частині є паз для переміщення ножових санчат, які несуть ножедержатель (2). На бічній поверхні розташовані похилі напрямні (3) для переміщення санчат з механізмом підйому.
Механізм підйому складається з тригранної призми (4), вставленої в спеціальну оправу (5), забезпечену гвинтом для підйому призми і рукояткою для її закріплення в потрібному положенні. Оправа в свою чергу міцно прикріплена до санчат, що несе механізм підйому.
Затиск для блоків (рамковий) складається з внутрішньої (призначеної для зміцнення блоку) і зовнішньої рамок (6). Система рукояток і гвинтів дозволяє змінювати положення рамок в поздовжньому і поперечному напрямках. Від заснування затиску відходить штифт, за допомогою якого затиск для блоків вставляють в спеціальне гніздо, наявне в тригранної призмі. Фіксування на потрібному рівні виробляють спеціальною рукояткою.
Ножові санчата (7) - масивні стійкі санчата, забезпечені ручкою для пересування і несуть на собі ножедержатель (8), який зміцнюють на санчатах спеціальною рукояткою, що дозволяє змінювати горизонтальний кут розташування ножа. Сам же затиск забезпечений рухомий циліндричної втулкою (9), переміщення якої за допомогою важеля змінює кут нахилу ножа.
Механізм мікроподачі - найбільш складний вузол мікротома. Він складається з стрижня (10), з`єднаного жорстко з тягою (несучої на своєму кінці собачку), храповика і мікровінта.
Автоматична мікроподачі блоку здійснюється наступним чином. При кожному зворотному (холостому) ході ножа ножові санчата штовхають стрижень мікроподачі і переміщають його. Це в свою чергу викликає переміщення тяги, яка за допомогою собачки повертає храповик. Обертання його через конічні шестерні передається мікрогвинти (11), який через роз`ємну гайку (12) переміщує по похилих напрямних знизу вгору санчата з затискачем для блоку.
Система тяга - стрижень кожен раз за допомогою спеціальних пружин повертається у вихідне положення. Отже, чим більше стрижень мікроподачі висунутий назустріч ножовим санчатах, тим більшим виявиться його крок (а відповідно, і поворот храповика), тим вище переміститься блок і тим товщі буде зріз. Завдяки тому що стрижень має мікрометричний шкалу і спеціальний затиск, що дозволяє змінювати його положення, можна точно регулювати ступінь подачі блоку.
Так як з кожним зрізом блок піднімається все вище, то періодично потрібно від`єднувати мікрогвинт від рознімної гайки і опускати санчата з механізмом подачі в крайнє нижнє положення.
Крім описаної конструкції мікротома, існують і інші. Є також варіанти способу подачі блоків і пристрою затискачів для них. Однак, незважаючи на існуючі відмінності моделей мікротомів, всі вони мають загальні принципи пристрою, знання яких дозволить успішно освоїти їх експлуатацію.
Мікротом для парафінових зрізів (МПС-2)
Прилад (рис. 64а, б) складається з підстави, приводного механізму, механізму мікроподачі, об`ектодержателя, ножедержателя з механізмом подачі транспортної стрічки, транспортера.
Підстава (1) - лита чавунна плита, на якій змонтовані всі вузли приладу.
Приводний механізм складається з маховика (2), з`єднаного з кривошипним валом, що несе косозубой шестерню, важелів, кривошипа, собачки і кареток (для вертикального і горизонтального переміщення об`ектодержателя). При повороті маховика насаджена на вал косозубая шестерня через парну з нею шестерню передає обертання кривошипа (3), від якого рух передається важелю (4), качати важіль (5) з укріпленої на ньому собачкою (6). Завдяки тому що вал має форму кривошипа, він при обертанні маховика одночасно повідомляє зворотно-поступальний рух (по вертикальних напрямних) каретці підйому (7), що має в свою чергу горизонтальні напрямні для каретки подачі (8), що несе на собі об`ектодержатель (9). Здійснюючи рух по вертикалі, каретка підйому через водило (18) приводить в дію механізм подачі транспортерної стрічки.
Механізм мікроподачі складається з храповика, диференціального механізму, мікровінта, лімба, косозубой передачі і кулачка.
Мал. 64.
Мікротом для виробництва парафінових зрізів. Пояснення в тексті.
Відео: Тканини растеній.AVI
При повороті вала описаний вище приводний механізм за допомогою собачки (6) повертає на певне число зубів храповик (10), на осі якого посаджено зубчасте колесо (11), яка передає через шестерню обертання мікрогвинти. Розташовуючись в горизонтальній площині, гвинт переміщує каретку подачі об`ектодержателя (8).
Установку товщини зрізів виробляють шляхом повороту лімба (12) (на задане число ділень), обертання осі якого через косозубой передачу передається кулачку, що регулює величину повороту храповика, т. Е. Величину подачі каретки з об`ектодержателем.
Об`ектодержатель (9) - гвинтовий затиск, вмонтований в кульову оправу каретки подачі об`ектодержателя. Шарнірний механізм дозволяє надавати блоку будь-яке потрібне положення. Фіксацію об`ектодержателя виробляють спеціальною рукояткою.
Ножедержатель (13) - масивна чавунна підставка, що має дві вертикальні стійки, забезпечені власниками (14), що дозволяють надавати ножу потрібний кут нахилу, відлічуваний по шкалі, розташованій на бічній поверхні стійки (ціна ділення шкали 5 °). Фіксацію ножа виробляють гвинтами. У передньо-задньому напрямку ножедержатель переміщається по спеціальних напрямних і закріплюється рукояткою.
Механізм подачі транспортерної стрічки: через стійку ножедержателя пропущена вісь, на яку між стійками насаджений барабан для транспортерної стрічки (15), а зовні - храповик (16). За допомогою кронштейна (17), вставленого в спеціальне гніздо, транспортерна стрічка натягується між барабаном і роликом кронштейна і закріплюється рукояткою. Коли при повороті маховика мікротома відбувається рух каретки підйому, храповик автоматично через спеціальне водило (18), кулачок (19) і собачку (20) повертається і пересуває стрічку транспортера на задану відстань. Для регулювання кроку храповика на кулачку нанесена шкала з ціною поділки 5 мм.