Фарбування сполучної тканини азур еозином - основи гістології
Відео: ТехнікаМетодиізученія тканин
Фіксація: Ценкер-формол по Максімову- дещо гірші фіксатори 10% формалін, рідина Ценкера, абсолютний спирт.
Це фарбування є одним з кращих методів виявлення клітинних елементів крові і сполучної тканини.
робочі розчини
Перший розчин - 0,1 г еозину розчинити в 100мл дистильованої води-другий-0,1 г Азура II розчинити в 100 мл дистильованої води. Для приготування розчинів необхідна дуже чистий посуд і дистильована вода абсолютно нейтральної реакції.
Суміш розчинів готують безпосередньо перед фарбуванням. Для цього в чистому хімічному стакані 10 мл першого розчину додають до 100 мл попередньо прокип`яченої і охолодженої дистильованої води. Воду кип`ятять 5-10 хв у відкритій плоскодонної колбі для видалення з води вуглекислоти, яка стоїть на заваді для успішного фарбування. Якщо цього мало, можна додати до 100 мл води 1-2 краплі слабкого (1: 1000) водного розчину бікарбонату натрію. Однак лужна реакція води також не годиться.
До отриманого розчину додають 10 мл другого розчину. При цьому посуд, де відбувається змішування розчинів, необхідно злегка похитувати. Готовий розчин темно-фіолетового кольору без пластівців. Якщо ж після змішування розчинів з`являється пластівчастий осад, то розчин вважається непридатним. Причиною найчастіше є нечиста посуд і дефекти приготування дистильованої води.
фарбування
- Зрізи з кип`яченою дистильованої води поміщають в розчин барвника на 12-24 год (при кімнатній температурі).
- Ретельно промивають у воді.
- Диференціюють в 96% спирті (під контролем мікроскопа). При появі червоного забарвлення еритроцитів диференціювання припиняють.
- Зрізи дуже швидко зневоднюють в абсолютному спирті, потім поміщають в чистий ксилол і укладають в бальзам.
Якщо еозин забарвлює зрізи слабо, потрібно подовжити диференціювання в 96% спирті. У деяких випадках можна збільшити вміст еозину в барвному розчині, наприклад першого розчину 16 мл, другого - 8 мл, дистильованої води 80 мл.
Результат. Цитоплазма клітин забарвлюється в різні відтінки синього кольору. Зернистість цитоплазми фарбується по-різному: оксифільні зерна світло-червоні, базофільні-темно-сині. Ядра клітин теж темносині. Гемоглобін набуває яскраво-червоний колір. При накопиченні гемоглобіну в цитоплазмі клітин забарвлення змінюється: чим більше гемоглобіну, тим яскравіше рожеве забарвлення цитоплазми клітин.
