Організація робочого місця лаборанта-гістолога - основи гістології

Організація робочого місця багато в чому визначає ефективність і якість роботи лаборанта. Раціональна розстановка і розміщення лабораторного посуду, інструментарію, необхідних розчинів і реактивів дозволяють без суєти, з найменшою витратою зусиль виконати за один і той же час більший обсяг роботи.
Робочий стіл. При відсутності спеціальних столів для лаборанта з успіхом може бути пристосований будь-який стіл (бажано з ящиками) з площею робочої поверхні не менше 60 х 120 см.
Якщо кришка столу не має спеціального покриття, то його слід зробити з будь-якого влагоустойчивого матеріалу (настільний або товсте віконне скло, лінолеум, пластик або клейонка). Однак ділянку столу, призначений для безпосередньої роботи з приготування препаратів, в будь-якому випадку необхідно накрити склом і розташувати під ним невеликі (9 х 12 см) аркуші білого або чорного паперу. Цим створюється відповідний фон, який полегшує роботу з пофарбованими (білий аркуш) і незабарвленими (чорний лист) об`єктами. Рекомендується також на обидва листи нанести контури предметного скла з позначенням місця розташування і розмірів покривного скла. Цей простий прийом дозволяє раціонально розмістити на предметному склі зрізи в процесі їх укладення.
Для того щоб зручніше розташувати необхідне обладнання, слід мати двоярусну полку для реактивів, розчинів і посуду, яка встановлюється або перед працюючим (уздовж заднього краю стола), або збоку в залежності від розташування столу по відношенню до джерела денного світла.
Достатня освітленість робочого місця є одним з найважливіших умов, так як виготовлення гістологічних препаратів вимагає значного напруження зору. Необхідно максимально використовувати денне світло. Краще ставити робочий стіл біля вікна.

Однак навіть при достатньому світлі робоче місце повинно бути оснащено спеціальним освітлювачем до мікроскопа або настільною лампою (з нахиляється верхньою частиною) для забезпечення постійної освітленості препаратів при мікроскопірованіі, так як зміна освітленості несприятливо позначається на сприйнятті кольору препарату і ускладнює оцінку якості його забарвлення.
Лаборант повинен містити свій стіл в належному порядку: не захаращувати робочу поверхню зайвої посудом і предметами, що не застосовуються в даний момент в роботі. Після закінчення робочого дня лаборант зобов`язаний перевірити, чи виключені електроприлади, з якими він працював.

Відео: Організація столу! Моє робоче місце! 1 частина! / Оксана Близнюк /

ЛАБОРАТОРНА ПОСУД

У будь-гістологічної лабораторії застосовують великий набір різноманітної лабораторного посуду. У цьому розділі дається опис лише найнеобхідніших зразків.
Широкогорлі банки з притертими пробками різної місткості - від 50 до 200 мл - використовують для складання гістологічних батарей, призначених для підготовки шматочків тканин до заливання різними середовищами (див. Розділ «Промивання і зневоднення матеріалу»). Більші банки застосовують для фіксації та зберігання шматочків тканин в фіксують рідинах, обробки предметних стекол, приготування нейтрального формаліну і ін. Перед приміщенням в банки легко випаровуються рідин (спирт, ефір, ацетон і т. Д.) Необхідно ретельно перевірити, чи добре прітерти пробки. Для цього досить виконати пробу з ефіром: якщо пробка добре притерта, то налитий в банку ефір не визначається за запахом.
Бюкси - невеликі круглі скляні стаканчики різного діаметру і висоти з шліфованими кришками - найбільш поширена посуд для обробки гістологічних зрізів і маленьких шматочків тканин.
Біологічні стаканчики - круглі, овальні або чотирикутні (як і високі бюкси) - застосовують для проводки гістологічних зрізів, монтованих на предметних стеклах. Для додання стаканчиках більшої стійкості і забезпечення певного порядку в розстановці їх поміщають в спеціальні стійки, виготовлені з дерева або пластмаси, по кілька штук в ряд в залежності від методики обробки.
Кювети - чотирикутні скляні чашки з кришками, які мають на двох протилежних сторонах прорізу, в які вставляють предметні скельця. Застосовують для одночасної забарвлення декількох зрізів, наклеєних на предметні скельця.
Чашки Петрі - широкі, плоскі скляні чашки з кришками - придатні для різних маніпуляцій (забарвлення вільно плаваючих і наклеєних на предметні скельця зрізів, використання в якості підставок під бюкси і т. Д.).
Мірний посуд - циліндри і мензурки різної ємності (від 10 до 250-500 мл), воронки різних розмірів.
Хімічні стаканчики - круглі скляні стаканчики без кришок місткістю 50-100 мл - знаходять широке застосування при проведенні гістохімічних реакцій, забарвлення зрізів, наклеєних на скла і т. Д.
Колби (плоскодонні) місткістю від 50 мл до 2 л. Малі колби застосовують для приготування і зберігання розчинів різних барвників, великі - під дистильовану воду та інші рідини, що витрачаються в великих кількостях.
Кристалізатори - круглі глибокі чашки з товстого скла (різної місткості) - застосовують для масової промивання наклеєних на скла зрізів, зливання відпрацьованих рідин та інших потреб.
Піпетки звичайні (призначені для закапування ліків) використовують для наколювання на зрізи барвників і різних рідин, градуйовані (місткістю 0,1-100 мл) застосовують для відмірювання малих кількостей різних рідин при складанні розчинів (особливо в гистохимической практиці).
Вартові скла (різного діаметру) застосовують для обробки вільно плаваючих зрізів, які потребують контролі під мікроскопом (сріблення нервової тканини і ін.).
Правильна розстановка і етикетування лабораторного посуду грають істотну роль, так як дозволяють уникнути зайвих рухів і плутанини в процесі обробки препаратів, стандартизують робочий процес і в кінцевому підсумку підвищують продуктивність праці. Перш ніж приступити до будь-якого етапу приготування гістологічних препаратів (зневоднення, забарвлення і т. Д.), Слід відібрати необхідну чистий посуд, позначити її призначення і доцільно розташувати.
Особливу увагу слід приділяти своєчасної етикетування посуду.
Недотримання цього правила може призвести не тільки до перешкод в процесі обробки матеріалу, а й до більш серйозних наслідків аж до нещасних випадків. Посуд, що вживаються постійно для одних і тих же цілей, етикетують за допомогою паперових наклейок (для цієї мети можна застосовувати і лейкопластир), на які нанесені чіткі позначення вмісту. Напис слід робити чорною тушшю, але, щоб вона не розпливалася при попаданні розчину, необхідно етикетку покрити плівкою з 1-2% целлоидин або коллодия. Посуд, що підлягає разовому вживання, позначають спеціальним олівцем для письма по склу.
Крім лабораторного посуду, для приготування мікропрепаратів необхідні предметні і покривні скла.
Предметні скла - прямокутні пластини розміром 76 х 26 мм і товщиною 1-2 мм, призначені для розміщення гістологічних зрізів в процесі приготування постійних препаратів.
Покривні скла являють собою тонкі (0,15-0,2 мм товщини) пластинки різних розмірів. Служать для покриття оброблених зрізів, розташованих на предметному склі.
Чистота посуду є одним з найважливіших умов в гістологічної техніки. Тому весь посуд, що йде в вживання, попередньо ретельно миють у теплій мильній воді спеціальними щітками, потім в холодній проточній воді і на закінчення обполіскують дистильованою. У тих випадках, коли посуд повинна бути особливо чистої (приготування розчинів, проведення гістохімічних реакцій), її поміщають в суміш наступного складу:

Біхромат калію -
К2Сl2О7 (насичений розчин) 100 мл
Вода гаряча 1000 мол
Сірчана кислота (концентрований розчин) 100 мл

Мал. 55.
Пристосування для промивання піпеток.

Для приготування цієї суміші спочатку розчиняють в гарячій воді біхромат калію, потім розчин охолоджують і тільки після цього додають сірчану кислоту тонкою цівкою. У цьому складі предметні скельця (і будь-яку іншу посуд) витримують 2-3 дні, а потім промивають у проточній воді протягом 1-2 днів. Приготування розчину вимагає дотримання техніки безпеки: робота в гумових рукавичках і обов`язково у витяжній шафі. При цьому особливу увагу слід звернути на те, щоб додавати не водний розчин до сірчаної кислоти, що може призвести до розбризкування кислоти і опіків, а кислоту до водного розчину. Зберігати розчин з поміщеними в нього стеклами також рекомендується в витяжній шафі.
Вимиту лабораторний посуд не витирати, а поміщають для сушіння в сушильну шафу, так як при витирання на ній можуть залишитися волокна від тканини.
Предметні скла підсушують на повітрі (або в сушильній шафі), закладають в широкогорлую скляну банку і, заливши сумішшю з рівних частин спирту і ефіру (або бензолу), щільно закривають.
Така обробка не тільки очищає скла від бруду, а й знежирює їх поверхню, що дуже важливо для гарного приклеювання зрізів. Перед вживанням скло дістають пінцетом і витирають чистою (бажано лляної) ганчіркою, стежачи при цьому, щоб на поверхні не залишалися волоконця від матерії і пилинки. Тримати скло потрібно за краї, щоб не залишати на поверхні слідів пальців.
Подібним же чином готують покривні скла, поміщаючи їх після промивання в бюкси зі спирт-ефіром. Протирання покривних стекол через їх тонкощі вимагає великої обережності і відповідних навичок.
Для промивання піпеток доцільно мати спеціальне пристосування, зображене на рис. 55. Головну трубку за допомогою перехідного гумового шланга надягають на водопровідний кран, а на відвідні трубки, також забезпечені гумовими муфточками, - піпетки. Відкривши кран, виробляють їх промивання під напором, після чого опускають на кілька годин в циліндр, заповнений розчином біхромату калію (на дно циліндра обов`язково потрібно покласти скляну вату, щоб попередити відколювання носиків у піпеток). Після цього піпетки знову ретельно промивають в проточній воді, обполіскують дистильованою водою і поміщають в сушильну шафу.
Має бути прийнято за правило - не залишати використаний посуд тривалий час без промивання. Якщо немає можливості її тут же остаточно вимити, то необхідно обполоснути і залити водою. Для видалення засохлих реактивів потрібно значно більше зусиль, а іноді їх зовсім неможливо відмити.

ІНСТРУМЕНТИ

У повсякденній роботі лаборанту необхідно мати набір інструментів: ножиці з прямими браншамі, середні і малі (очні) - пінцети різних розмірів і зразків: анатомічні (кінці браншей плоскі з насічками), хірургічні (кінці з виступами), спеціальні (з тонкими загнутими кінцями) - скальпелі середні і малі (очні), препарувальні голки тонкі прямі або вигнуті з ручкою (застосовуються для наколювання об`єктів при фіксації, расправления згорнулися зрізів, перенесення їх з однієї чашки в іншу і т. д.) - скляні гачки для виловлювання та перенесення зрізів - кровоспинні затискачі для пережимания судин і захоплення тканин при розтині тварин-корнцанг - затиск з довгими ручками - для вилучення предметних стекол з банок з спирт-ефіром, а також для захоплення дрібних лабораторних тварин-шпателі - металеві або пластмасові прямі і вигнуті лопатки для перенесення зрізів і шматочків тканин, взяття різних сипучих речовин-
шприци різної місткості для ін`єкцій барвників при прижиттєвої забарвленні тканин і інших процедур.
За інструментом необхідний ретельний догляд. Після застосування його слід відразу ж мити (якщо потрібно, очищати) і насухо витирати (або висушувати в сушильній шафі).
Зберігати інструменти слід в певному місці. Его полегшує їх знаходження і економить робочий час.
Лаборанту необхідно також мати спиртівку, невелику м`яку волосяну пензлик (для зняття зрізів з мікротомних ножа), голку, нитки і щільний папір для етикетування матеріалу, олівці для письма по склу, фільтрувальну і індикаторну (для визначення pH розчину) папір. Для вирізання шматочків з органів необхідні також леза безпечної бритви і дошка, пластикова або дерев`яна, розміром 40x25 см.
Кожен лаборант повинен мати кілька зошитів для записів. Основна зошит служить для записів освоєних і освоюваних методик обробки матеріалу, бо, незважаючи на наявність методичних посібників, у кожного лаборанта в процесі роботи з`являються свої спостереження, що викликають часом доповнення або деякі видозміни окремих етапів обробки.
У лаборантів, які працюють з експериментальним матеріалом, повинна бути зошит (вірніше, книга), в яку записують протокол експерименту (вид і порядковий номер тварини, дата і характер експерименту, щоденник спостережень, дата умертвіння, який матеріал взято для дослідження і в які фіксатори поміщений ). Єдиної форми протокольному зошиті немає. Наводимо одну з форм
(Табл. 1).   

Таблиця 1
Форма протокольному зошиті

Слід пам`ятати, що ретельна і своєчасна запис в протокольний зошит - обов`язкова умова як для успішного і якісного гістологічного дослідження об`єкта, так і для спільних наукових висновків експериментатора.