Ти тут

Фарбування жирів і ліпідів, виявлення заліза - основи гістології

Зміст
основи гістології
Короткий нарис історії гістології
цитологія
клітка
цитоплазма
ядро
життєдіяльність клітини
розподіл клітин
епітеліальна тканина
Сполучна тканина
кров
Ще не зцементована неоформлене сполучна тканина
ретикулярна тканина
Щільна волокниста сполучна тканина
хрящова тканина
Кісткова тканина
М`язова тканина
нервова тканина
Нервові волокна і закінчення
Серцево-судинна система
органи кровотворення
Травна система
залози
шкіра
система виділення
Органи дихання
Нервова система, органи чуття
статева система
Організація робочого місця лаборанта-гістолога
Техніка виготовлення гістологічних препаратів
Взяття і етикетування матеріалу
Завдання і правила фіксації
фіксуючі засоби
Промивання, зневоднення гістологічного матеріалу
Просочування і заливка гістологічного матеріалу
Підготовка тканин для електронно-мікроскопічного дослідження
Мікротоми і робота з ними
Мікротом заморожують, охолоджуючий столик
Догляд за мікротомів, мікротом-кріостат
мікротомних ножі
Ультратом
Приготування зрізів з парафінових блоків
Приготування целлоідінових зрізів
Фарбування і висновок зрізів
Просвітлення і висновок зрізів, висновок в смоли
Висновок в водні середовища
Методи фарбування препаратів
Приготування і фарбування мазка крові для підрахунку лейкоцитарної формули
Фарбування тканини за методом ван-Гізоном, Маллорі
Фарбування сполучної тканини АЗУР еозином
Фарбування еластичних волокон методом Унни-Тенцера, резорцин-фуксином
Виявлення аргірофільних волокон, елементів нервової системи
Імпрегнація за методом Більшовского-Грос
Виявлення нервових елементів методом прижиттєвого фарбування метиленовим синім
Імпрегнація елементів макрогліі
Безин`екціонний метод вивчення судин по В. В. Купріянова
Обробка і фарбування кісткової тканини, декальцинація, фарбування
гістохімічні методи
Виявлення (сумарне) білків
виявлення полісахаридів
Виявлення та ідентифікація кислихмукополісахаридів
Комбіновані гістохімічні методи (для полісахаридів і протеидов)
Фарбування жирів і ліпідів, виявлення заліза
Гистохимія нервової системи
Гистохимія ферментів
Застосування ізотопів в гістології
Приготування пленчатих препаратів
Обробка матеріалу біопсії

Термін «ліпіди» збірний. Їм позначають всі жироподібні речовини, що екстрагуються розчинниками жирів (бензин, ефір, хлороформ та ін.).
В основі методів фарбування лежать чисто фізичні процеси. Суть їх полягає в тому, що речовини, фарбувальні жири, добре в них розчиняються і тому легко переходять з розчину в ліпіди.
Фарбування Суданом III. Є найбільш поширеним методом виявлення жиру.
Приготування розчину барвника. У 100 мл гарячого 70% спирту засипають 0,2-0,3 г порошку Судану III, кілька разів збовтують і ставлять в термостат (при 58 ° С) на кілька годин, потім охолоджують і фільтрують.
Метод. 1. Заморожені зрізи (зі свіжої або фіксованого у формаліні тканини) на кілька хвилин переносять з води в 50% спирт.

  1. Поміщають в спиртовий розчин барвника на 15-30 хв (бюкси слід закривати, так як випаровування спирту призводить до випадання опадів барвника).
  2. Швидко споліскують в 50% спирті.
  3. Промивають в дистильованої воді.
  4. Підфарбовують ядра кислим гемалауном.
  5. Промивають і укладають в желатин або гліцерин-желатин (зневоднення в спиртах екстрагує жири).


результат. Жирові речовини інтенсивно оранжевого кольору, ядра -сині. Препарати вицвітають порівняно скоро, тому відкладати дослідження не рекомендується.
Забарвлення шарлахом. Барвники: в суміш з 50мл ацетону і 50 мл 70% спирту засипають 0,2-0,3 г шарлаха. Добре закривають і збовтують. Отриманий розчин перед вживанням фільтрують.
Метод. 1. Заморожені зрізи зі свіжої або фіксованого у формаліні тканини поміщають в 50% спирт на 2-4 хв.

  1. Фарбують в розчині барвника 2-3 хв.
  2. Швидко споліскують в 70% спирті.
  3. Промивають у воді.
  4. Підфарбовують ядра кислим гемалауном.
  5. Промивають у воді і укладають в гліцерин або гліцерин-желатин.


Результат. Жирові речовини оранжево-червоні, ядра - сині.



Виявлення заліза методом з утворенням турнбулевої синього

Залізо може перебувати в тканинах як у вільному вигляді (неорганічне), так і в хімічній зв`язку з молекулами органічних речовин (гемоглобін еритроцитів). Гистохимическое дослідження тканин на вміст заліза виробляють при вивченні пігментного обміну, особливо при захворюваннях, пов`язаних з гемолітичними процесами в крові.
Метод заснований на хімічній реакції між сульфідом заліза і гексациано-Феррата калію, в результаті якої утворюється турнбулевої синій. Реакція специфічна, надійна, препарати стійкі.
Метод (фіксація формаліном, абсолютним спиртом, зрізи заморожені, парафінові, целлоідіновие).

  1. Помістити зрізи з дистильованої води в 10% розчин сульфіду амонію на 1-24 год.
  2. Ретельно відмити в декількох працях дистильованої води.
  3. Помістити в свежеприготовленную суміш з рівних частин 20% розчину гексациано-феррата (3) калію і 1% розчину хлористоводневої кислоти на 10-20 хв.
  4. Ретельно прополоскати в дистильованої воді.
  5. Підфарбувати ядра карміном.
  6. Промити, збезводнити, просветлить, укласти в бальзам.

Результат. Ділянки, що містять залізо, пофарбовані в інтенсивно-синій колір, ядра червоні.
Примітка. Необхідно виключити застосування в процесі роботи металевих предметів. Посуд слід ретельно промити слабкою хлористоводневою кислотою, а потім дистильованою водою, отриманої зі скляного апарату (щоб виключити сліди металу). Розчин сульфіду амонію повинен мати чистий жовтий колір і зберігатися не довше ніж 2-3 тижнів в добре закривається посуді. При доступі повітря з`являється коричнево-жовте забарвлення, яке свідчить про інактивації розчину.



Поділися в соц мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Схожі повідомлення

Увага, тільки СЬОГОДНІ!