Поліоми - рак: експерименти і гіпотези
Лейкози мишей також можна перевивали за допомогою безклітинних екстрактів. У 1951 р JI. Гроссу вдалося приготувати безклітковий екстракт з органів лейкозної миші, який викликав лейкоз у новонароджених мишенят.
Досліди Гросса повторила Сара Стюарт- вона також перев лейкоз мишей. Однак, на подив дослідниці, у інбредних штамів лейкози були відсутні. Зате через 10 міс. у них виникли пухлини привушної залози і наднирників. А потім почалися звичні вже осічки: з пухлин привушної залози не вдавалося приготувати активних безклітинних екстрактов- вірус, який викликає пухлину, «пропадав».
Незабаром Сара Стюарт почала співпрацювати з Б. Є. Едді з Національного інституту охорони здоров`я. Едді створив велику лабораторію, що спеціалізується на веденні культури тканин-в цій лабораторії була проведена значна частина роботи, згодом призвела до створення вакцини проти поліомієліту. Клітини нирок мавпи виявилися ідеальною «живильним середовищем» для вірусу поліомієліту.
Стюарт і Едді спробували розмножити новий «паротідний вірус» на таких клітинах нирки. Результати виявилися досить скромними: як і раніше, «вихід» пухлин був досить низьким. Можливо, справа полягала в тому, що даний вірус, що викликає пухлини у мишей, не міг розмножуватися на клітинах мавпи. Тому Стюарт повторила досвід, тепер уже на клітинах культури миші. З ембріонів миші після ретельного подрібнення і тріпсінізаціі готували суспензії клітин, які потім висівали в судини для культівірованія- отримані в результаті шари клітин обробляли органним екстрактом лейкозних мишей.
Тепер вірус показав все, на що був «здатний»: безклітинні препарати інфікованих клітин мишачих ембріонів индуцировали злоякісні пухлини майже у 100% тварин. Однак дивним виявився не тільки високий вихід пухлин: збагачені вірусом екстракти більш не давали пухлин привушної залози.
«Часто дивувався тимус (вилочкова залоза), який знаходився безпосередньо над сердцем- в багатьох випадках пухлина цієї залози заповнювала всю грудну порожнину. Всупереч правилу, згідно з яким пухлина молочної залози розвивається лише у
самок, цей вірус викликав рак молочної залози і у самців. Пухлини легкого були зазвичай того типу, коли уражається мезотелий плеври, причому покривали все легке як би чохлом, який можна було спостерігати неозброєним оком. Раки шкіри часто покривали поверхню всього тіла. Пухлини розвивалися і в потових залозах, які перебувають лише на безволосих ділянках шкіри лапок. Всі злоякісні пухлини були епітеліального типу і класифікувалися як раки. Однак вірус викликав і саркоми: пухлини сполучної тканини, кісток, нирок, вистилання кровоносних судин і кісти печінки. Ми спостерігали навіть пухлини нервової тканини, індуковані даним вірусом »(Стюарт).
При великих дозах спостерігалася вражаюча вірулентність. Іноді у однієї миші розвивалося до 10 різних типів пухлин. Тому дослідники дали новому вірусу назву «поліоми» - «викликає багато пухлин».
Але один чи це вірус? Чи не замішано тут ціле сімейство вірусів? Якщо це різні віруси, то можна очікувати, що при утриманні вірусів в культурі тканини одні з них розмножувалися б краще, ніж інші. У такому випадку після численних пасажів одні віруси повинні були б загинути, тоді як інші отримали б перевагу. Однак навіть після майже 100 пасажів в культурі тканини вірус продовжував викликати такий же спектр пухлин. На підставі цього дослідники зробили висновок, що поліоми не є сумішшю різних вірусів, що мають спорідненість до різних органів. Цей висновок знайшов остаточне підтвердження в дослідах на «генетично чистих» штамах поліоми - штамах, отриманих від однієї вірусної частки. Кожна така чиста культура поліоми викликала таке ж розмаїття пухлин, як і початкові препарати вірусу.
Однак на цьому сюрпризи поліоми не закінчилися. Пухлинні віруси, відомі раніше, були вельми перебірливі у виборі господаря. Так, вірус Біттнера зростає лише на деяких штамах мишей. Поліоми ж з легкістю долала бар`єри не тільки між штамами мишей, але і між видами: вірус викликає пухлини у хом`яків, щурів і кроликів. Найбільш чутливими виявилися хом`ячки: у них пухлини розвиваються через два тижні.
Виникає питання: чому не доводиться стикатися з вірусом поліоми в природі? Скептики знову отримують можливість заявити, що пухлинні віруси - всього лише штучний лабораторний продукт. Однак для цього є «природні» пояснення.
Віріони поліоми є чудовими антигенами. У крові тварин, яким інокулював даний вірус, є антитіла, спрямовані специфічно на цей вірус, незалежно від того, чи є у тварини пухлини чи ні. Навіть у тварин, які просто перебували в одній клітці з обробленими вірусом мишами, у багатьох випадках розвивалися антитіла. Та й до людини поліоми не має ніякої поваги: у багатьох співробітників Стюарт, які протягом ряду років працювали з цим вірусом, також є антитіла, специфічні по відношенню до нього.
У колоніях мишей вірус поширюється через слину і екскременти. Антитіла поліоми можуть передаватися мишенятам від матері, тому спонтанні пухлини поліоми рідкісні. Лише в культурі тканини, де антитіл немає, віруси поліоми можуть розвиватися у великих кількостях.
Віруси лейкозу і саркоми у мишей
Як ми вже відзначали, лейкози у мишей можуть передаватися безклітинним екстрактом так само, як і лейкози у курей. Є серія різних вірусних штамів, названих на ім`я першовідкривачів: Гросс (1951), Френд (1957), Раушер (1962).
Захс запропонував простий кількісний тест на вірус Раушера: розведений розчин вірусу ін`єктують в хвостову вену дорослої миші. Через дев`ять днів в селезінці утворюються вузлики, які можна легко підрахувати.
Лейкозні віруси миші знаходяться у родинних стосунках з лейкозних вірусами птахів (вірус саркоми Рауса і недавно відкритий вірус саркоми мишей також належать до цього сімейства). Про це свідчить імунологічне та морфологічний сімейне схожість:
- Віруси мають загальні (що володіють груповий специфічністю) антигени.
- Під електронним мікроскопом вони виявляють характерні форми (темна серцевина з кілька відстоїть зовнішньою оболонкою) - так звані З-частинки належать до цього сімейства.
Пухлинні РНК-віруси, що володіють такими імунологічними і морфологічними ознаками, нещодавно були виявлені також у кішок, хом`яків і собак. Іноді С-частинки виявляються і в клітинах людини.
