Пухлинні днк-віруси в культурі тканини - рак: експерименти і гіпотези
В даний час дослідники відкривають все більше число пухлинних вірусів і пухлин, які можуть викликатися вірусами. Однак довгий час становище вірусології в онкології було вельми сумнівним.
У багатьох випадках були відсутні докази того, що пухлини дійсно були вірусного характеру, оскільки з багатьох пухлин, що викликаються вірусами, вірус «зникав». Таким чином, довести вірусну етіологію, користуючись класичними критеріями бактеріології, було неможливо.
Зустрічалися труднощі і чисто методичного порядку: через тривалі латентних періодів, які тривають кілька місяців, а то й понад рік, ставити швидкі досліди було не можна. Точні експерименти залишалися нездійсненими: багато піддослідні тварини по-різному реагували на вірусні препарати, а самі препарати по своїй активності істотно відрізнялися в різних серіях. Стан справ в корені змінилося лише тоді, коли вчені вдалися до методів культур тканин для вирішення поставлених перед вірусологією пухлинних проблем. «Деякі пухлинні віруси легко розмножуються в таких культурах, що робить можливим як точну кількісну оцінку, так і ефективне відтворення вірусу- іноді віруси викликають трансформацію нормальної клітини в клітину, що має властивості пухлинної. І все це вдається продемонструвати не протягом місяців, а протягом декількох днів! »(Хабел).
Перш ніж ми звернемося до розгляду поведінки пухлинних ДНК-вірусів в культурах тканини, обговоримо деякі практичні проблеми.
Підрахунок живих вірусів з використанням тесту з просветлениями
Віруси можна підраховувати безпосередньо під електронним мікроскопом, однак, оскільки при цьому вважають як мертві віруси, так і «порожні оболонки», висновки можуть не відповідати істині. Ось чому доцільніше підраховувати лише активні частинки. З цією метою слід підібрати тип клітин, в яких добре розмножується даний вірус (клітини нирок мавпи для вірусу поліомієліту, клітини зародків миші для вірусу поліоми), інокулювати ці клітини в чашки Петрі і чекати утворення щільного шару клітин. Потім клітини інокуліруют розведеним розчином вірусу, дають можливість вірусу увійти в клітини і покривають культуру шаром агару. Описаний прийом дозволяє уникнути безперешкодної дифузії вірусних частинок, що вивільняються з інфікованих клітин в результаті лізису. 
ПІДРАХУНОК ВИРУСОВ ЗА ДОПОМОГОЮ ПРОБИ З просвітленими
Продукування та ТРАНСФОРМАЦІЯ
Демаскування ПІСЛЯ ЗЛИТТЯ
Пухлинних ДНК-ВІРУСИ В КУЛЬТУРІ КЛІТИН
Тому вірусні частинки здатні інфікувати тільки клітини, що знаходяться в безпосередньому сусідстві, і лише в них розмножуватися. В результаті окремий вірус як би «проїдає» дірку (просвітлення) в шарі клітин, видну неозброєним оком. Якщо в розчині вірусу є всього кілька віріонів (множинні або індивідуальні вірусні частки), то кілька дірок, що з`являються на платівці, не будуть прилягати в одну. У такому випадку їх легко підрахувати і тим самим зробити оцінку числа активних вірусних частинок-«інфекційних одиниць» (фіг. 39).
Описаний метод дозволяє дати кількісну оцінку багатьох вірусів, що виявляють патогенність у тварин: вірусів поліомієліту, аденовірусів, а також пухлинних вірусів.
