Реакція преципітації - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень

Відео: Імуноферментний аналіз

Відео: Хімічні досліди в домашніх умовах

Реакцію преципітації вперше описав Ф. Я. Чистович. Найбільше практичне значення реакція преципітації має при діагностиці сибірки (реакція Асколі), чуми, пневмококових, менінгококової захворювань і ін.
В основі реакції преципітації лежить утворення мутного кільця, що випадає в осад, при взаємодії антитіл і молекулярних антигенів. Реакція преципітації аналогічна реакції аглютинації, але відрізняється тим, що в реакції аглютинації застосовується корпускулярний антиген, а в реакції преципітації - колоїдне речовина білкової або полисахаридной природи.
Застосовується реакція преципітації для визначення видів мікробів, для вивчення антигенного складу мікроорганізмів, білків і т. Д.
У судовій медицині реакція преципітації застосовується для визначення походження плям крові і сперми, а в харчовій санітарії - для визначення походження м`яса і молока від того чи іншого виду тварини. Здебільшого реакція преципітації ставиться з сироваткою, специфічні властивості якої відомі, з метою визначення природи антигену. У рідкісних випадках за відомим антигену визначають властивості сироватки.
Реакція преципітації проявляється в тому, що при взаємодії імунної сироватки з прозорим розчином антигену з`являється помутніння, а через деякий час утворюються осідають на дно пластівці. Антитіла імунної сироватки, які беруть участь в реакції преципітації, називаються преціпітіни. Для антигену прийнятий термін преципітиногену, специфічний осад, що спостерігається при реакції, - преципітат.
Реакція преципітації дозволяє відкрити невелику кількість антигену. Вона в цьому відношенні більш чутливими багатьох хімічних реакцій.
Техніка постановки реакції преципітації. Вона полягає в тому, що різні розведення антигену нашаровуються на поверхню рівної кількості сироватки. Наявність преципитации проявляється у вигляді утворення непрозорого кільця на кордоні дотику рідин. Для того щоб не відбулося змішування рідин, пробірку в момент нашарування антигену тримають в похилому положенні і окремими краплями антиген наливають по внутрішній поверхні стінки, користуючись пастерівської піпеткою з довгим тонким капіляром. Наявність фізіологічного розчину так само необхідно для реакції преципітації, як і для реакції аглютинації, причому реакція також протікає в дві фази. Позитивний результат реакції проявляється протягом 5-30 хвилин в умовах кімнатної температури.
Для реакції преципітації застосовують сироватку імунізованих тварин, зазвичай в нерозведеному вигляді. За титр Преципітуючих сироватки приймають то граничне розведення антигену, при якому ще спостерігається утворення преципітату. Антигеном для реакції служать екстракти з бактерій, фільтрати бульйонних культур, екстракти з патологічних продуктів (мокрота, гній) і органів хворих тварин, а також кров`яна сироватка, спинномозкова рідина та ексудати, що містять розчинених, мікробів або продукти їх життєдіяльності. антиген
для реакції застосовується розведений, так як його надлишок перешкоджає утворенню і випадання осаду - преципитата. Преціпітірую.щая сироватка і антигени для преципітації повинні бути абсолютно прозорі.
Реакція преципітації в агарі (по Аухтерлоні). Цей метод вивчення складних антигенних сумішей, загальних антигенів у мікроорганізмів, ступеня очищення бактеріологічних препаратів заснований на здатності антитіл і антигенів дифундувати в агарі назустріч один одному. При зустрічі відповідних антитіл і антигенів утворюються видимі неозброєним оком білі лінії преципитата, кількість яких може бути по-різному в залежності від кількості відповідних пар антиген-антитіло в досліджуваних рідинах.