Специфічна терапія і профілактика інфекційних захворювань - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень

ВАКЦИНИ

Метод отримання активного імунітету за допомогою вакцин називається вакцинацією, а що виникає при цьому активний штучний імунітет - поствакцинальних. Вакцинація, вироблена із запобіжною метою, носить назву вакцинопрофілактики і. Застосування вакцин з лікувальною метою називається звакцинотерапію.
В даний час в якості вакцин для запобіжних щеплень застосовують: 1) живі вакцини- 2) вакцини з тіл убитих мікробів 3) хімічні вакцини, приготовлені з певних компонентів бактеріальних клітин 4) анатоксини, виготовлені з бактеріальних екзотоксинів.
Живі вакцини одержують з ослаблених в своїй вірулентності мікроорганізмів. Чи не викликаючи захворювання живі вакцини, проте, відтворюють в організмі несприйнятливість до зараження вірулентними збудниками.
Вакцини з живих мікробів були отримані різними методами: тривалим пассированием мікроба через організм лабораторних тварин, чутливого до цього возбудітелю- тривалим культивуванням бактерій на спеціальних поживних середовищах, несприятливих для їх розвитку або з додаванням якихось речовин (наприклад жовчі) - методом селекцій і відбору лабораторних штамів.
У 1881 р Л. Пастер розробив метод отримання живої вакцини проти сибірської виразки, а в 1885 р проти сказу. У 1919 р А. Кальметт і Ш. Герен у Франції отримали ослаблений варіант туберкульозної палички, застосовуваний для профілактики туберкульозу. Отримано живі вакцини і проти інших інфекційних хвороб (чуми, поліомієліту, грипу, жовтої лихоманки). Відносно ефективності живі вакцини є найбільш повноцінними препаратами, так як
дозволяють успішно відтворювати міцний щеплення імунітет там, де убиті вакцини малоефективні.
Вакцини з убитих мікробів виготовляються з культур патогенних мікробів, убитих або термічним впливом зазвичай при температурі 56-58 ° протягом години (гріти вакцина), або дією хімічних речовин (спиртом, формаліном, мертіолята). При дії формаліну виходять: 1) формолвакцину, в яких мікроби вбиті формаліном, і 2) анавакціни, виготовлені за принципом отримання анатоксинів, т. Е. За допомогою комбінованої дії формаліну і температури 39-40 °.
Хімічні вакцини являють собою специфічні антигени певного хімічного складу, які виходять з бактеріальних клітин шляхом ферментативного перетравлення з подальшим осадженням спиртом або витягом відповідним розчинником (трихлороцтової кислота). При належному приготуванні повні антигени мають дуже високим імунізують властивістю, але в той же час можуть бути токсичними. Такий вакциною є хімічна вакцина TABte. Препарат цей являє собою суміш з обложених повних антигенів для одночасної імунізації проти черевного тифу, паратифів А і В і очищеного концентрованого правцевого анатоксину.
Для того щоб продовжити час всмоктування вакцини і, отже, подовжити імунологічне роздратування організму до вакцин, додають неспецифічні речовини, що уповільнюють всмоктування, наприклад фосфорнокислий кальцій, галун, ланолін або рослинні масла.
Ці речовини отримали назву ад`ювантов (від англ. Adjuvant - помічник), дія яких проявляється не тільки в тому, що вони затримують антиген в місці введення, а й значно підвищують синтез антитіл.
Анатоксини. При деяких захворюваннях, коли основне значення в патогенезі має екзотоксин збудника, вакцину готують з бактерійних екзотоксинів. Анатоксин - це екзотоксин, позбавлений отруйних властивостей, але зберіг свою антигенність. Для його отримання до екзотоксину (див. Стор. 130) додають 3-4% формаліну, витримують в термостаті при температурі 38-40 ° протягом 3-4 тижнів, періодично струшуючи, очищають і адсорбують на алюмінієвих галун. Силу анатоксину визначають методом флокуляції і позначають в імуногенних (антигенних) одиницях (ИЕ).
Анатоксини використовують для активної імунізації проти дифтерії, правця, газової гангрени, ботулізму, рецидивних гнійничкових уражень шкіри стафилококкового походження і для отримання антитоксических сироваток.
Види вакцин. Вакцина, до складу якої входить тільки один вид мікроба, називається моновакциною (наприклад, протитифозних вакцина), приготована з двох мікробів - дивакциной (з бактерій черевного тифу і паратифів). Полівакцини містять суміш збудників багатьох інфекційних захворювань. Вакцини, до складу яких входять два збудника або більше, називаються асоційованими. У асоційовані вакцини можуть входити не тільки мікроби, але і анатоксини, наприклад, коклюшно-дифтерійно-правцевим вакцина (КДС), що складається з дифтерійного і правцевого анатоксинів та убитих кашлюкових бактерій.
Аутовакцини є моновалентні вакцини, приготовлені з культури, виділеної від хворого, і призначені для його лікування. Аутовакцінотерапія має на меті підвищити імунологічну реактивність. Цю ж мету переслідує аутогемотерапия, при якій у хворого беруть кров з вени і вводять в сідничний м`яз.
Приготування убитих вакцин. Убиті вакцини готують в великих мікробіологічних інститутах. Мікроби, з яких готується вакцина, засівають в великі плоскі пляшки з агаром, так звані матраци. Культуру, що виросла на агарі, змивають фізіологічним розчином і отриману маткову суспензія стандартизують, т. Е. Встановлюють необхідну концентрацію мікробів (в 1 мл вакцини повинно міститися певна кількість мікробних тіл). Титрування вакцини (стандартизація) виробляють оптичним методом шляхом порівняння, опалесценции (густоти) маткової суспензії зі стандартами.
Стандартизація вакцин проводиться таким чином. У порожню пробірку, рівну по діаметру і товщиною стінки пробірки стандарту, поміщають 1 мл маткової суспензії. Потім в неї додають стільки фізіологічного розчину, скільки потрібно для того, щоб ступінь каламутності зрівнялася з мутностью стандартної пробірки. Для порівняння обидві пробірки ставлять поруч перед світлом. Наприклад, якщо до 1 мл маткової суспензії довелося додати 9 мл фізіологічного розчину, для того щоб прирівняти її густоту до концентрації стандарту в 1 млрд., Це означає, що в 1 мл маткової суспензії міститься 10 млрд. Бактерій. Отже, щоб приготувати вакцину з титром 1 млрд., Потрібно розвести основну суспензія в 10 разів, з титром 2 млрд. - В 5 разів і т. Д.
Стандарт складається з 4 запаяних пробірок - еталонів, що містять рідину різного ступеня каламутності. Пробірки містять суспензію найдрібніших частинок скла пирекс, відповідних за величиною бактеріям. Випускаються стандарти державним контрольним інститутом медичних біологічних препаратів імені Л. А. Тарасевича. На стандартах вказується, якій кількості мікробних тіл в 1 мл відповідає каламутність даного стандарту. Готова вакцина в обов`язковому порядку перевіряється на стерильність і густоту місцевої контрольної лабораторією і органами державного контролю. На етикетках ампул позначають назву вакцини, місце і час приготування, кількість мікробів в 1 мл, номер серії, номер державного контролю і термін придатності.
Вакцини треба зберігати в сухому прохолодному місці. Зазвичай рідкі вакцини являють собою білувату каламутну рідину, що дає незначний, при струшуванні зникаючий осад. Якщо вакцина нестерильних, то мікробні тіла можуть лізуватись і вакцина буде прозора або в ній утворюються великі пластівці за рахунок сторонніх мікробів. І в першому, і в другому випадку вакцини не придатні для вживання.
Методи введення вакцини і їх дозування. Вакцини вводять в організм переважно парентеральним шляхом (минаючи кишечник). Вакцини проти кишкових інфекцій і анатоксини вводять під шкіру-оспенную, сібіреязвенную, туляремійную - накожно, туберкульозну (вакцину БЦЖ) - під шкіру, проти поліоміеліта- ентерально, грипозну - через слизову оболонку носа.
Ефективність вакцинації залежить від правильності введення, від точності дозування і дотримання ревакцинаций і в значній мірі від загального стану вакцинируемого.

СИРОВАТКИ

Піддаючи тварин, наприклад коней, активної імунізації по відношенню до якого-небудь мікроби або його екзотоксину, можна отримати сироватки, що володіють специфічними антимікробними або антитоксичні властивості. Така сироватка, введена людині, створює несприйнятливість його організму до того виду мікроба або токсину, яким користувалися для імунізації коней. Імунітет створюється при цьому шляхом введення в організм готових антитіл, чому і називається пасивним.
Застосування імунних сироваток для лікувальних цілей називається серотерапія, а з метою профілактики (що буває рідше) - Серопрофілактика.
Розрізняють два основних види лікувальних сироваток: 1) антитоксичні і 2) антимікробні.
Отримують антитоксичні сироватки гипериммунизации коней невеликими, а потім все зростаючими дозами анатоксину і токсину. При накопиченні в крові достатньої кількості антитіл проводять часткове або повне кровопускання. Зібрану при цьому в спеціальні скляні посудини кров залишають для згортання. Після того як від утворився кров`яного згустку відокремиться прозора сироватка, до неї додають невелику кількість консерванту (хінозол, фенол, хлороформ та ін.). Для того щоб видалити з сироватки шкідливі для організму баластні білки, які не є антитілами, її необхідно чистити і концентрації. В основі цих процесів лежить ферментативне перетравлення неімунних білків сироватки з наступним її очищенням діалізом. Тому очищені цим методом сироватки звуться «д і а ф е р м». Потім сироватку витримують при температурі 8 ° С протягом 4-6 місяців і розливають по ампулам. Перед розливанням в ампули витриману сироватку відчувають на стерильність, пірогенність (здатність викликати підвищення температури), нешкідливість і зміст антитоксина.
Титруванням отриманих сироваток в досвіді на тварин визначають антитоксичну силу сироватки. Сила антитоксина позначається умовною одиницею - міжнародної одиницею (ME).
Міжнародної одиницею антитоксина називають то найменша кількість імунної сироватки, яке нейтралізує певні кількості смертельних доз токсину.
Лікувальна сила антитоксических сироваток може бути визначена також і in vitro за допомогою реакції флоккуляции. До антитоксическим сироваткам відносяться противодифтерийная, протиправцева, протівогангренозная і ін.
Антимікробні сироватки виходять шляхом гіперімунізаціі тварин убитими і живими культурами мікробів або екстрактами з них, а також лізатамі- продуктами розчинення мікробних клітин. Для імунізації користуються штамами, що володіють високими імунізують і повноцінними антигенними властивостями.
Сироватки, отримані при імунізації коней однієї певної культурою, звуться моновалентних.
Сироватки, отримані після обробки коня декількома штамами одного і того ж мікроба, називаються полівалентними. До антимікробну сироваткам відносяться протичумна, протівосібіреязвенний, протигрипозна, антирабическая.
З лікувальною метою широко використовуються антитоксичні сироватки. Лікувальні антимікробні сироватки застосовуються рідше. Антитоксичні сироватки призначаються в певних кількостях ME, антімікробние- в мілілітрах. Кількість призначається сироватки залежить від тяжкості і дня захворювання, віку хворого. Вводять сироватку звичайно внутрішньом`язово, в рідкісних випадках (при особливих показаннях) внутрішньовенно і інтралюмбально, проти грипу - інтраназально. Сироватку вводять дрібно по методу Безредки: на початку 0,1 мл, через 30 хвилин - 0,5 мл і через 1,5 г години решта.
Лікувальні сироватки, як і інші бактерійних препаратів, призначені для парентерального введення людині, перед випуском їх до вживання піддаються перевірці в Державному контрольному інституті медичних біологічних препаратів імені Л. А. Тарасевича. Сироватка забезпечується етикеткою, на якій позначають найменування препарату, де і коли він виготовлений, кількість його в ампулі, титр, номер серії державного контролю і обов`язково вказують термін придатності препарату.
З метою профілактики та лікування при деяких захворюваннях (кір, коклюш, поліомієліт) вводять гамма-глобуліни, отримані з плацентарної крові людини, шляхом спеціальної обробки (висолюванням, спиртовим осадженням на холоду і ін.). Цей препарат (гамма-глобуліни), що містить достатню кількість антитіл, вводять в значно меншому обсязі, ніж сироватку.