Вивчення культуральних властивостей мікроорганізмів - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Відео: Техніка бактеріологічного посіву
Для ідентифікації культур виділених мікробів Їх піддають детальному вивченню. Характеристика даного мікроорганізму складається з морфологічних, культуральних, біохімічних та серологічних ознак, які дозволяють його ідентифікувати, т. Е. Визначити його природу.
Морфологічні властивості визначаються шляхом бактеріоскопії забарвлених мазків і вивчення мікробів в живому вигляді (висяча крапля). При мікроскопірованіі звертають увагу на форму мікроба, його розташування, величину, наявність спор, капсул, ставлення до методів забарвлення.
Культуральні властивості. Так як бактериоскопически не завжди вдається визначити вид мікроба, то наступним етапом є бактеріологічне дослідження, т. Е. Вивчення росту мікробів на поживних середовищах.
Біохімічні властивості. Для більш точного визначення виду застосовують вивчення біохімічних властивостей мікробів (див. Стор. 88). При цьому визначають ставлення мікроба до кисню, його ферментативні і редуцирующие властивості, утворення в культурах певних продуктів обміну і зміна реакції середовища.
Характеристика росту бактерій на щільних і рідких середовищах. При вивченні колоній макроскопически (неозброєним оком) розрізняють її величину, форму, колір, прозорість, характер поверхні.
За величиною розрізняють колонії дрібні, т. Е. 1-3 мм, середні - 2-4 мм, великі - 4-6 мм і більше в діаметрі.
За формою колонії бувають круглі, мають різко окреслені контури. Колонії з нервовими неправильними краями, різоідние, т. Е. Що нагадують переплетені корені дерева, і гірозние, що складаються з переплетених валиків, схожі на звивини мозку. Колонії можуть бути плоскими, піднятими і куполоподібними.
Колір колоній може бути різноманітним: сероватобелого, жовтим, помаранчевим, червоним і т. Д.
За прозорості колонії розрізняють прозорі, т. Е. Такі, через які видно контур предметів, і непрозорі (каламутні), які світла не пропускають.
Поверхня колонії може бути гладка, зморшкувата, блискуча, тьмяна, волога, суха, слизова.
Більш детально структура колонії вивчається через лупу, окуляр або під мікроскопом з малим збільшенням (№ 3 або 8). Тоді чашку ставлять на столик мікроскопа дном вгору, щоб на колонію можна було встановити об`єктив.
При такому збільшенні можна розглянути характер країв колонії (рівні, зазубрені, фестончатие), характер поверхні (гладка, шорстка), структура колонії [однорідна (гомогенна), т. Е. Має одноманітну будову у всіх частинах колонії-дрібно-, среднеее грубозерниста, ниткоподібна].
Кожному виду мікробів властивий певний характер колоній. Так, кишкова паличка утворює колонії середньої величини, напівпрозорі з блакитним відтінком, а стафілококи - дрібні, щільні, жовтуватого або білого кольору. Нерідко характер колонії має діагностичне значення для визначення виду мікробів.
Зростання мікробів на скошеному агарі. На скошеному агарі зростання вивчають неозброєним оком і відзначають ті ж характерні особливості, що і при дослідженні колоній. Слід розрізняти зростання пишний, убогий і умеренний- непрозорий, прозорий і полупрозрачний- вологий, матовий і сухой- безбарвний, сероватобелого або з наявністю пігменту.
Зростання при посіві уколом в стовпчик середовища. При зростанні по ходу уколу в стовпчику агару зазвичай спостерігається форма зростання по Лінії уколу. Вона може бути ниткоподібна з бічними розгалуженнями або без них і четкообразно. При зростанні на желатині відзначають ще наявність або відсутність розрідження. Якщо спостерігаються розрідження, то характер його може бути різним: кратероподібне розрідження, воронкообразное і пошарове, т. Е. Йде зверху, горизонтально, по напрямку вниз. Методом посіву уколом в стовпчик живильного середовища можна визначити рухливість бактерій. Для цього досліджувану культуру засівають в стовпчик напіврідкої живильного середовища (0,25% агар, напіврідкі вуглеводні середовища). Посів ставлять в термостат на 24 години. Якщо бактерії не мають джгутиків, то зростання буде тільки уздовж лінії уколу або у вигляді пальцеобразних виростів. У рухливих бактерій зростання - дифузний, по всій товщині живильного середовища.
Зростання на рідких середовищах. За інтенсивністю росту на бульйоні розрізняють: зростання рясний, помірний і скудний- за характером - рівномірна муть, осад або плівка на поверхні. Осад буває зернистий, порошкоподібний, пластівчастий, туманний і в`язкий. Плівка на бульйоні може бути дуже ніжною, як хмарка, щільною, сухою і зморшкуватою.
Зростання на молоці. При зростанні на молоці може не відбутися ніяких видимих змін, і тоді зростання мікробів визначають шляхом бактеріоскопічного дослідження молока. Велика група мікробів викликає згортання молока або пептонізацію.
