Збудник сибірської виразки - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Паличка сибірки - Вас. anthracis (рис. 96) належить до групи грампозитивних аеробних спороутворюючих бацил, широко поширених в природі. Сібіреязвенная паличка є єдиним патогенним представником цієї групи.
Бацили сибірської виразки були вперше виявлені: в крові тварин німецьким вченим А. Паллендером в 1839 р Ці ж мікроорганізми спостерігав в крові тварин у Франції в 1850 р К. давен. Однак справжнє значення цих мікробів в етіології сибірської язеи встановив в Росії проф. Ф. А. Брауель в 1855 р Р. Кох своїми класичними дослідженнями щодо сибірки остаточно довів бактерійних природу паличок Паллендера і Давена, встановив їх здатність до спороутворення, отримав чисту культуру і успішно заразив нею досвідчених тварин.
Морфологія і тинкторіальних властивості. Бацили сибірської виразки - великі товсті палички, що мають 1-2 мк в ширину і 8 мк у довжину. Розташовуються переважно парами або ланцюжками. Нерухомі, кінці паличок на забарвлених препаратах представляються як би обрубаними.
Мал. 96. Паличка сибірки.
1 - колонії на агаре- 2 - сібіреязвенние бацили в чистій культуре- 3 - зростання при посіві уколом в желатину.
Морфологічної особливістю сибіркових бацил є їх здатність утворювати спори і капсули (рис. 97 і 98 на вклейці).
Мал. 97. Спори палички сибірської виразки. Забарвлення по Ганзеном.
Культуральні та біохімічні властивості. Паличка сибірки добре росте на всіх поживних середовищах, аероб. Температурний оптимум 37 °
На чашках з агаром виростають досить великі шорсткі колонії, матові з бахромчатой периферією. Це хвороботворні R-колонії.
При малому збільшенні мікроскопа колонії мають волокнисту будову, причому волокна зібрані у вигляді завитків волосся, тому їх і порівнюють з левовою гривою або головою медузи.
Рідше зустрічаються гладкі, з рівними краями колонії (S-колонії), що містять слабо вірулентні або авірулентние форми бацил.
На скошеному агарі через 24 години росту утворюється сірувато-білий наліт з завитками по краях. Зростання на бульйоні характерний: середа залишається прозорою, а на дні відзначається осад, що нагадує клубок вати. Желатину повільно розріджується зростання нагадує ялинку, перекинуту вниз вершиною. Молоко створаживается на 3-4-й день росту, потім казеїн пептонізіруется. На картоплі виходить сухою сірувато-білий наліт. Мікроб сахаролітічен: розкладає з утворенням кислоти (без газу) глюкозу, мальтозу, лактозу, гемолітичними властивостями не володіє.
Антигенна структура. Сібіреязвенная паличка має специфічні антигенами: полісахаридних соматичним і білковим, що знаходяться в капсулі. Полісахаридних антиген термостабільний, довго зберігається в трупах і шкурах тварин. Видалений з них за допомогою кип`ятіння він дає позитивну реакцію преципітації з типоспецифічними сироваткою.
Резистентність. Вегетативні форми сибіркових бацил малостійкі, суперечки ж відрізняються великою резистентністю. Вони витримують кип`ятіння до 5-10 хвилин, пряме сонячне світло протягом 100 годин. У висушеному стані спори можуть зберігатися життєздатними до 20 років. До дезінфікуючих речовин дуже стійкі. У 15% хлорного воді залишаються життєздатними протягом 6 годин, в 4% соляній кислоті-15 днів, в 5% розчині сулеми-15 днів. Для знезараження при сибірку застосовують: сухе хлорне вапно, хлорно-вапняне молоко, прояснені розчини цього молока, активовані розчини хлораміну, гарячі розчини їдкого натру.
Токсиноутворення і патогенність для тварин.
Питання про токсини паличок сибірської виразки до теперішнього часу неясний. Спроби отримати токсин in. vitro не увінчалися успіхом: ні екзо-, ні ендотоксину виявити не вдалося. Введення чутливим тваринам фільтратів бульйонних культур або убитих мікробних тіл токсичної дії майже не робить.
До сибірку особливо сприйнятливий велику і дрібну рогату худобу, трохи менше - коні. Свині хворіють на неї набагато рідше. Несприйнятливі до сибірки кішки і собаки. З лабораторних тварин найбільш чутливі до сибірки білі миші і морські свинки. Підшкірне введення невеликої кількості вірулентних бацил викликає загибель тварини протягом 2-4 днів.
Патогенез і клініка. Джерелом інфекції є хворі тварини (велика і дрібна рогата худоба, коні) і одержувані від них продукти і сировину. У людей це захворювання зустрічається рідко і пов`язано найчастіше з певною професією. Зараження настає в результаті безпосереднього контакту з хворими тваринами (пастухи, робочі боєнь і ін.) Або при зіткненні з зараженими продуктами тваринного походження (кожум`яки, меховщики, шерстобіти). Легенева форма зустрічається у робітників, зайнятих обробкою забрудненої ганчір`я ( «хвороба ганчірників»). Зараження відбувається через шкіру, слизову оболонку верхніх дихальних шляхів і кишечник, в залежності від місця вхідних воріт сибірська виразка у людини проявляється в трьох формах: шкірної, легеневої і кишкової. Найбільш часто зустрічається шкірна форма, рідше легенева і дуже рідко кишкова.
Мал. 98. Капсули у палички сибірської виразки. Забарвлення фуксином.
Шкірна форма виражається у вигляді так званої злоякісної пустули (сибірки карбункул- Pustula maligna). Спочатку з`являється червона плямка, яке швидко переходить в папули (вузлик), а потім в пухирець, наповнений кров`яною рідиною. Центр бульбашки некротизируется, стає чорним, що характерно для сибиреязвенного карбункула. Чорний колір сибиреязвенного карбункула послужив приводом назвати його углевіком (anthrax - вугілля).
Некротичний центральну ділянку карбункула часто обростає немов би намистом, що складається з дрібних бульбашок. Тканина в окружності карбункула набрякає, найближчі лімфатичні вузли збільшуються.
Захворювання супроводжується підйомом температури до 40 °, важкими загальними явищами, слабкістю серцевої діяльності, затьмаренням свідомості, сама ж виразка
З патологічного матеріалу роблять мазки і фарбують їх по Граму. Виявлення в мазках характерних великих грампозитивних паличок, оточених капсулами, з нахилом мікробів розташовуватися ланцюжками дає можливість поставити попередній діагноз. Однак для того щоб поставити цілком точний діагноз, одного бактеріоскопічного дослідження недостатньо. Тому необхідно виділити ще чисту культуру Вас. anthracis. Для цієї мети досліджуваний матеріал засівають на чашки з простим агаром і в пробірки з бульйоном. Через 20-24 години вирощування вивчають типові колонії, які при слабкому збільшенні мікроскопа представляються у вигляді переплетених ниток. З колоній роблять висів на скошений агар і потім досліджують виділену чисту культуру.
Отримані дані бактеріологічного дослідження підтверджуються зараженням тварин. Виділену культуру вводять підшкірно білої миші або морській свинці, і якщо культура складається з сибіркових паличок, то тварина гине через 24-48 годин при картині гострого сепсису.
При підозрі на сепсис виробляють посіви крові. Якщо в досліджуваному матеріалі (шкіра, шерсть і т. Д.) Бацили або їх спори не можуть бути виявлені бактеріоскопічного і бактеріологічного шляхом, вдаються до серологічного дослідження за допомогою реакції термопреципітації по Асколі. Для постановки реакції необхідні такі інгредієнти.
- Преципітуючих сибиреязвенная сироватка;
- нормальна сироватка тваринного, від якого отримана Преципітуючих сироватка;
- сибірки стандартний антиген для контролю (готують в інститутах вакцин і сироваток);
- антиген з матеріалу, що підлягає дослідженню.
Найчастіше для термопреципітації беруть шматочки органів, шерсть, шкіру і т. Д. Зазначений матеріал заливають 5-10-кратним об`ємом фізіологічного розчину і кип`ятять на водяній бані (при слабкому вогні) протягом 10-20 хвилин, а потім фільтрують через паперовий фільтр до повної прозорості.
Позитивний результат реакції полягає в негайному (іноді через 5-10 хвилин) появі кольцевидного преципитата па кордоні дотику рідин. Поява кільця пізніше 10 хвилин враховується як неспецифічна або сумнівна реакція.
Профілактика і терапія. Специфічна профілактика сибірки широко застосовується з часів Л. Пастера шляхом вакцинації тварин аспорогенних культурами сібіреязвенной палички. Застосовують дві вакцини, які отримують шляхом вирощування палички при температурі 42-43 ° протягом 24 (перша вакцина) і 12 (друга вакцина) днів.
У Радянському Союзі до недавнього часу застосовувалася вакцина Ценковського, яка готується за принципом Пастера, але є більш безпечною.
В останні роки широко використовується нова бескапсульних вакцина СТІ (Санітарно-технічного інституту), що відрізняється високою ефективністю і безпекою.
З лікувальною метою хворим вводять внутрішньовенно або внутрішньом`язово, імунну протівосібіреязвенний сироватку в кількості 50-100 мл.
Крім сироватки, при сибірку застосовують також новарсенол по 0,45-0,6 г внутрішньовенно. За своїм лікувальній дії цей препарат поступається сироватці. Позитивний результат дає пеніцилін при введенні його по 300 000-400 000 ОД на добу до отримання стійкого ефекту.
