Збудники черевного тифу і паратифів - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень

Бактерії черевного тифу і паратифів викликають захворювання, подібні по патогенезу, клініці і епідеміології. Збудник черевного тифу вперше описаний Еберта в 1880 р, паратіфозние бактерії - Ашаром і Бансодом (1896), і диференційовані Шоттмюллером на два види: S. paratyphi А. і S. schottmulleri.
У сучасній систематиці бактерії черевного тифу, паратифів та збудники харчових токсикоінфекцій на підставі їх антигенної структури та інших ознак об`єднані в один рід Salmonella (в честь бактеріолога Салмона).
Морфологія. Палички за розміром і формою схожі з кишковими, мають в середньому від 2 до 3 мк в довжину і від 0,5 до 0,7 мк в товщину (див. Рис. 78). Суперечка і капсул не утворюють, добре рухливі, грамнегативні.
Культуральні та біохімічні властивості. Тифозні і паратіфозние бактерії ростуть на простих поживних середовищах в аеробних умовах. Оптимум зростання між 30 і 37 °.

Мал. 79. Сальмонели паратифів Б. Колонії на м`ясо-пептонном агарі. Ув. 12
На чашках з агаром колонії палички черевного тифу і паратифів мають вигляд помірно опуклих вологих прозорих дисків, більш дрібних і ніжних, ніж колонії кишкової палички (рис. 79). Колонії палички паратифу В відрізняються характерною особливістю будови, яка полягає в утворенні з периферії колонії піднесеного слизового валика, що оточує плоский центр колонії на зразок бортика гудзики. Валик з`являється при зберіганні посівів (після 24-годинного стояння в термостаті) протягом кількох наступних днів при кімнатній температурі.
Колонії тифозною і паратіфозних паличок, виділені на початку і в розпалі хвороби, має гладку форму (тип S), а отримані в стадії одужання часто ростуть у вигляді шорсткуватих форм (тип R), що складаються з маловірулентних бактерій.
При посіві штрихом на скошеному агарі виходить суцільний по межах зростання, спочатку ніжний з блакитним відливом, потім грубий, але ніжніше зростання кишкової палички. На бульйоні з`являється дифузний зростання.
На молоці тифозні і паратіфозние палички рясно розмножуються, причому молоко не створаживается. Лактозу вони не зброджують, а глюкозу, мальтозу і маніт розкладають черевнотифозні бактерії тільки до кислоти, паратіфозние до кислоти і газу. Ферментативні властивості паратіфозних бактерій в загальному подібні, але бактерії паратифів А менш активні, газоутворення незначно і з`являється пізніше.

Біохімічні властивості бактерій кишково-тифозної групи

Умовні позначення: К - освіту кислоти-Г - освіту газу- - відсутність реакції-+ наявність реакції.

Бактерії В на лакмусовий молоці викликають луженні, яке виражається спочатку в появі на поверхні середовища синього обідка по краях плівки, a потім відбувається фарбування всієї середовища в синій колір. Палички черевного тифу і паратифів А викликають на лакмусовий молоці слабке кислотообразование, яке проявляється легким порозовеніе середовища (табл. 12).
Антигенна структура. Бактерії черевного тифу, паратифів та збудники харчових токсикоінфекцій характеризуються наявністю соматичного Про-антигену і жгутикового Н-антигену. Крім цих двох антигенів, Фелікс і Пітт виявили у брюшнотифозной палички додатковий антиген-антиген вірулентності (V1-антиген). Як соматический, так і жгутиковий антигени складні за складом. Вивчення складу цих антигенів дозволило Кауфману і Уайту скласти схему класифікації всієї групи сальмонел. В основу цієї класифікації покладено відмінності в будові О-антигенів, які дали можливість розбити сальмонели на ряд серологічних груп (А, В, С, D, Е і т. Д.). Бактерії кожної групи мають спільні соматичні антигени. Наприклад, брюшнотифозная паличка (група D) містить три різних О-антигену (9, 12 і Vi). Жгутиковий (Н) антиген теж неоднорідний. Відмінності в Н-антигени, як специфічних (I фаза), так і неспецифічних (II фаза), дозволило всередині окремих груп диференціювати типи (див. Табл. 12). Специфічна фаза Н-антигену аглютинується специфічної видової сироваткою, неспецифічна аглютинується не тільки видовий, а й груповий сироваткою.
Схема Кауфмана і Уайта дозволяє реакцією аглютинації на склі ідентифікувати бактерії роду Salmonella. Для цього необхідно мати набір монорецепторними сироваток (анти-О-і анти-Н-антигенів). О-сироватки відповідають окремим групам (А, В, С і т. Д.) Схеми Кауфмана і Уайта. Н-імонорецепторние сироватки відповідають специфічної фазі жгутикового антигену: а, в, с, d, g, m і т. Д. Сироватки застосовуються в нерозведеному вигляді.
При ідентифікації на предметне скло наносять краплі групових О-сироваток. У кожній краплі петлею емульгують невелика кількість досліджуваної агарної культури, знятої з верхньої частини скошеного агару. Поява агглютіната в тій чи іншій краплі вказує на групу, до якої належить культура. Потім ставлять реакцію аглютинації з Н-сироватками, що містять антитіла проти Н-антигенів специфічної фази сальмонел, види яких входять в дану групу. Мікробну масу в цьому випадку слід брати з нижньої частини скошеного агару і конденсаційної води. При наявності аглютинації визначають антиген специфічної фази і тим самим вид культури.
Резистентність. Пряме сонячне світло вбиває мікробів тифо-паратифозної групи протягом 4-8 годин. Низькі температури вони переносять тривалий час, зберігаючи життєздатність на льоду протягом декількох тижнів і місяців. Культури тифозною і паратифозної паличок при нагріванні до 60-65 ° гинуть через годину.
Тіфо-паратіфозние бактерії стійкі до висихання, можуть зберігатися довго в грунті, стічних і річкових водах і на різних продуктах харчування: м`ясо, молоко, овочі і т. Д. Швидке згубну дію надають на них дезинфікуючі речовини (5-10% розчин хлорного вапна , фенолу, лізолу та інших речовин).
Патогенність для тварин і токсінообразованіе.
У природних умовах на черевний тиф і паратиф хворіють тільки люди. Лабораторні тварини не чутливі до бактерій черевного тифу і паратифів. Справжні токсини на поживних середовищах не отримані.
Патогенез і клініка. Джерелом інфекції при черевному тифі і паратифах є хвора людина і бактеріоносій, які виділяють палички з випорожненнями і сечею. Зараження може відбуватися як контактно-побутовим шляхом (від хворих, реконвалесцентів і бактеріоносіїв), так і через воду і харчові продукти. Потрапляючи через рот в шлунок, бактерії черевного тифу і паратифів піддаються впливу несприятливих наслідків кислої реакції шлункового соку і часто гинуть. Тільки минаючи цей первинний бар`єр (при зниженій кислотності шлункового соку, при рясному питво і т. Д.), Палички виявляються в тонкому кишечнику, слизова якого і є вхідними воротами інфекції.
У кишечнику частина їх гине, а інша проникає в лімфатичний апарат тонкого кишечника (солітарні фолікули і Пейєрових бляшки), а потім в регіонарні (брижових) лімфатичні вузли. Тут бактерії посилено розмножуються і пригнічуючи їх бар`єрну функцію прориваються в кров`яне русло. Ця фаза називається
бактеріеміческого і знаменується появою початкових симптомів хвороби. Бактериемия - найважливіший елемент інфекційного процесу при черевному тифі і паратифах, який має місце протягом усього періоду захворювання. Внаслідок часткової загибелі мікробів в крові і лімфатичних вузлах звільняються ендотоксини, що викликають інтоксикацію організму, від якої потерпають в клінічній картині захворювання. З кров`ю палички розносяться по всьому організму і фіксуються в клітинах ретикулоендотеліальної системи лімфатичних вузлів, кісткового мозку, печінки та ін. Органів.
Настає фаза паренхиматозной дифузії. Цим обмежується поширення збудника в організмі, генералізована інфекція перетворюється в локалізовану (А. Ф. Білібін). Захисна реакція організму, яка виражається в наростанні фагоцитарної активності клітин ретикулоендотелію і виробленні ними специфічних антитіл тягне за собою звільнення крові і паренхіматозних органів від мікробів. Головна роль в цьому відношенні належить нирках і печінці. Зберігаються вони у великій кількості у вмісті кишечника і в жовчному міхурі, так як жовч послаблює дію антитіл і є гарним живильним середовищем для розмноження тифозних і паратіфозних паличок. Іноді після повного одужання бактерії протягом декількох років можуть залишатися життєздатними в жовчному міхурі і такі люди стають можливими джерелами інфекції.
Інкубаційний період дорівнює 10-21 дня. Початок захворювання характеризується поступовим підйомом температури при явищах наростаючої отруєння ендотоксинів. Останнє виражається в появі головного болю, загальної слабкості, безсоння, потьмарення свідомості і марення. Такий стан визначається терміном Status typhosus (по-грецьки typhos - туман). Температура поступово піднімається з кожним днем на 1-му тижні до 40 °, тримається на цій висоті протягом 10-14 днів, а на 4-му тижні поступово починає спадати. До кінця 1-го тижня хвороби пальпуються збільшені селезінка і печінку, на 8-10-й день з`являється плямистий висип (розеоли), які зникають при натискуванні.
Характерний патоморфологічні процес при черевному тифі розігрується в кишечнику. На першому тижні захворювання тифозні бактерії викликають гостре запалення лімфатичного апарату кишечника, в результаті чого Пейєрових бляшки і солітарні фолікули збільшуються в обсязі і набухають. Тифозні бактерії, будучи алергенами, одночасно сенсибилизируют ці освіти. На 3-й і 4-му тижні захворювання тифозні бактерії з жовчю знову потрапляють в кишечник, проникають в сенсибілізовані Пейєрових бляшки і солітарні фолікули і викликають в них алергічну реакцію, яка виражається в некрозі цих утворень. Ця фаза називається видільної-алергічної. Некротичні маси пеєрових бляшок і солітарних фолікул відпадають, що призводить до утворення тифозних виразок в кишкової стінки. При сприятливому перебігу хвороби відбувається загоєння цих виразок без всяких ускладнень. У важких випадках виникають кишкові кровотечі, а при глибокому виразковий процесі може статися прорив кишечника (перфорація) з наступним перитонітом.
Закінчується захворювання фазою реконвалесценції і відновленням фізіологічної рівноваги організму.
Паратіфозние захворювання протікають менш важко і менш тривало (особливо паратиф В) і не дають тих важких ускладнень, які мають місце при черевному тифі.
Імунітет. Перенесені черевний тиф і паратифи залишають після себе імунітет, хоча спостерігаються випадки повторних захворювань. У крові перехворілих є антитіла: аглютиніни, преціпітіни, бактеріолізини і ін.
Лабораторна діагностика. Для діагностики черевного тифу і паратифів застосовують: бактеріологічний метод дослідження і серологічний. Бактериоскопический метод є допоміжним, орієнтовним, так як всі бактерії тифо-паратифозної групи мають спільні морфологічними і тинкторіальних властивостями.

1. Бактеріологічний метод. Для дослідження беруть кров, пунктат кісткового мозку, кал, сечу, вміст розеол.

У перші дні захворювання (і протягом усього періоду хвороби) дослідженню піддається кров хворого з метою виявлення в ній збудника, так
як перша стадія захворювання, як було вказало вище, характеризується бактеріємією.
Цей метод ранньої діагностики черевного тифу носить назву методу гемокультур. Метод гемокультур вперше був введений в мікробіологічну практику російським лікарем вільчури в 1887 р
Кров для посіву беруть з вени, причому засівають великі кількості крові - не менше 8-10 мл, так як число збудників, що циркулюють в крові, може бути дуже незначним. Кров безпосередньо біля ліжка хворого засівають в колбу, що містить 100 мл жовчного бульйону (з 10-20% жовчі). При відсутності жовчі посів крові можна зробити на 75-100 мл стерильної дистильованої води.
Збудники черевного тифу і паратифів знаходяться в крові протягом усього гарячкового періоду, але кількість їх постійно знижується. Тому з 2-го тижня захворювання слід проводити посів 15- 20 мл крові.
Посіви поміщають в термостат на 24-48-72 години для збагачення, після чого виробляють пересівши на чашку із середовищем Ендо і на скошений агар (2-й день дослідження). Посів на чашку дозволяє виділити чисту культуру збудника при забрудненні середовища накопичення сапрофитной флорою. Через 18-24 години інкубації в термостаті вивчають посів на скошеному агарі і на середовищі Ендо. Якщо на скошеному агарі зросла чиста культура - ніжний, напівпрозорий наліт - приступають до її ідентифікації. До вивчення посіву на чашці вдаються в тому випадку, якщо на скошеному агарі забруднене зростання. Тоді з безбарвних колоній роблять пересів на скошений агар.
Виділену культуру (3-й день дослідження, а при пересеве з чашки з середовищем Ендо - 4-й день) ідентифікують посівом иа середу Ресселя, що містить м`ясо пептонний агар, глюкозу (0,1%), лактозу (1 ° / о) , індикатор Андреде, або по строкатому ряду вуглеводів і реакцією аглютинації адсорбованими сальмонельозне полівалентними і монорецепторними сироватками. Якщо аглютинація з О-сироватками не відбулася, слід поставити досліди з Vi-сироватками або зруйнувати Vi-антиген. Цього досягають шляхом прогріву культури при 60 ° протягом 30 хвилин або при 100 ° протягом 5 хвилин. На наступний день виробляють облік змін середовищ
строкатого ряду вуглеводів, остаточний облік реакцій аглютинації і видають результат дослідження.
Метод гемокультури може бути застосований протягом усього гарячкового періоду ( «завжди, коли у хворого підвищена температура» - А. Ф. Білібін), але відсоток висівання черевнотифозних бактерій неоднаковий. Так, на першому тижні захворювання гемокультура буває позитивною в 90-100% випадків, з 8-го до 15-го дня - в 70-80%, а в наступні дні - в 40-60% випадків.
Велику діагностичну цінність має посів пунктату кісткового мозку - метод міелокультури.
За допомогою голки Раскіна роблять прокол грудини і витягають 0,5-0,75 мл пунктату кісткового мозку і засівають в 3 мл жовчі або у флакон з жовчним бульйоном. Подальше дослідження ведеться аналогічно дослідженню на гемокультуру.
Починаючи з кінця 2-й і протягом 3-го тижня проводять дослідження випорожнень і сечі хворого - метод копрокультури і урінокультури.
Екскременти хворих збирають в підкладнесудно, яке повинно бути ретельно промиті кип`яченою водою. Фекалії в кількості 10 г переносять стерильною дерев`яною паличкою в стерильну баночку зі скляною або корковою пробкою. Досліджувані випорожнення емульгують в 15 об`ємах фізіологічного розчину (рідкі випорожнення розводять менше) і піддають відстоюванню протягом півгодини для осідання важких частинок. Потім випорожнення засівають на чашки з середовищем Ендо, Левіна та ін. Одночасно з цим проводять посів 1-2 г щільних або 1-2 мл рідких випорожнень на 10 мл рідкої збагачувальної середовища. Подальший хід дослідження сечі і калу такий же, як і при виділенні гемокультури.
Як збагачувальних середовищ застосовують середу Мюллера, Кауфмана та ін.
Середовища Мюллер. У стерильний флакон ємністю 200 мл насипають 4,5 г хімічно чистого крейди і стерилізують сухим жаром. Потім у флакон наливають 90 мл м`ясо-пептонного бульйону і стерилізують 20 хвилин при 120 °. Окремо готують: а) розчин гіпосульфіту (50 г в 100 мл дистильованої води простерилізувати текучим паром 30 хвилин) - б) розчин йоду в йодистим калії (кристалічного йоду 25 г, йодистого калію 20 г і дистильованої води 100 мл). Перед самим вживанням в колбу з 90 мл бульйону додають 10 мл розчину гіпосульфіту і 2 мл розчину йоду в йодистим калії, змішують і вносять 2-3 г випорожнень.

Щільні випорожнення попередньо розтирають з двойним- потрійним об`ємом фізіологічного розчину і відстоюють протягом 5 хвилин. Для посіву беруть верхній рідкий шар. Свіжоприготовлену середу можна розлити по 10 мл в пробірки, в які засівають по кілька крапель випорожнень.
Середа Кауфмана. До 100 мл середовища Мюллера додають 5 мл стерильної жовчі і 1 мл розчину фарби брілліантгрюн 1: 1000.
Копрокультура дає позитивний результат тільки в 30-40% випадків і в пізні терміни (на 3-4 тижні захворювання), в зв`язку з чим цей метод рідко застосовується з діагностичною метою.
Сечу для посіву збирають в стерильні пробірки (10-15 мл) стерильним катетером або при природному сечовипусканні після ретельної очистки і дезинфекції кола зовнішнього отвору сечовипускального каналу. Спочатку проводять посів декількох крапель сечі на чашку з агаром Плоскирева, потім сечу центрифугируют і знову сіють осад на чашку з агаром Плоскирева і на середу накопичення (жовчний бульйон).
Можна досліджувати на наявність бактерій тифо-паратифозної групи лімфу з розеол. При підозрі на бактеріоносійство дослідженню піддається кал, сеча і дуоденальне вміст. При дослідженні калу обстежуваний приймає натщесерце 30 г сірчанокислого натрію або сульфату магнію, розчиненої в 100-250 мл теплої води. Матеріал для Дослідження збирають в стерильну баночку.
Серологічний метод. Серологічна діагностика черевного тифу і паратифів заснована на постановці реакції аглютинації, введена в практику французьким мікробіологом Відалем і названа його ім`ям. Реакція Відаля ставиться з 2-го тижня захворювання (8-10-й день), так як до цього часу в крові хворого накопичується достатня кількість агглютінінов. Для реакції беруть 2-3 мл крові з ліктьової вени. При неможливості пунктировать вену слід брати кров з пальця або мочки вуха (20-30 крапель).
Реакція Відаля може бути поставлена крапельним або об`ємним способом. Крапельний спосіб зручний, коли сироватка хворого є в обмеженій кількості і коли не потрібно багатьох її розведень. Об`ємний спосіб має перевагу при масової постановці реакцій і при необхідності визначити дію сироватки в великих розведеннях. при краплинному
способі готують основне розведення сироватки 1:20 (1 крапля сироватки + 19 крапель фізіологічного розчину). Досвід ставлять в 5 агглютінаціонние пробірках. Пастерівської піпеткою накапують фізіологічний розчин за таким розрахунком: 14, 16, 17, 18 і 10 крапель. Потім тією ж піпеткою додають основне розведення сироватки: 4, 2, 1 і 10 крапель. Мікробну суспензію (диагностикум) по 2 краплі додають в усі пробірки крім останньої і враховують її як рідина при розведенні. Схема реакції Відаля буде представлена наступним чином (табл. 13).
Таблиця 13
Схема реакції Відаля

Ступінь розведення сироватки визначається наступним чином. Підраховують загальну кількість крапель рідини в пробірці і отримане число ділять на кількість крапель разводимой сироватки. У наведеній вище схемі в першій пробірці загальна кількість крапель 20, кількість крапель сироватки - 4. Якщо розділити 20 на 4, вийде розведення сироватки 1: 5. Але так як в 1-у пробірку була налита не суцільне сироватка, а попередньо розведена 1: 20, то, перемноживши ці два ступені розведення (1:20 і 1: 5), отримаємо загальне розведення 1: 100.
Об`ємний спосіб більш зручний і має широке застосування. При цьому способі реакція ставиться в звичайних бактеріологічних пробірках. У штатив встановлюють необхідну кількість пробірок. У всі пробірки, крім 1-й, відмірюють по 1 мл фізіологічного розчину. З попередньо приготованої диагностикум ОН, у другий ряд - О-антиген, в третій паратіфозний А-діагностикум і в четвертий паратіфозний В-діагностикумів. О-антигени (діагностикуми) готують кип`ятінням культури або обробкою її спиртом, ОН-антиген (диагностикум) -оброблення культури формаліном.
При читанні результатів реакції Відаля пробірки не слід сильно струшувати, так як утворилися пластівці ніжні і легко розбиваються. Облік реакції проводиться за схемою, викладеною на стор. 169.
Діагностичне значення в реакції Відаля має аглютинація, що починається з розведення сироватки 1: 200, так як тифо-паратіфозние аглютиніни нерідко виявляються у здорових людей, що раніше не хворіли на черевний тиф і не вакцинованих проти нього (нормальні аглютиніни), але їх титр зазвичай не перевищує 1 : 25-1: 50.
Якщо відбувається групова аглютинація з двома або трьома антигенами, то за збудника хвороби приймають того мікроба, з яким сталася аглютинація в найбільш високому розведенні сироватки. Позитивну реакцію Відаля можуть дати також сироватки людей, вакцинованих проти черевного тифу і паратифів (зі щеплення реакція), і сироватки людей, раніше перехворіли на черевний тиф - анамнестична реакція. Для того щоб диференціювати інфекційну реакцію Відаля від «прищепних» і «анамнестичних», вдаються до повторної постановки її через 5-6 днів. Якщо досліджуваний хворий на черевний тиф або паратиф, то за цей час кількість антитіл збільшиться і повторна реакція дасть позитивний результат з більш високим титром сироватки в порівнянні з попередньою. При «прищеплювальної» або «анамнестичних» реакції титр антитіл не зміниться.
Крім того, відрізнити інфекційну реакцію Відаля від «прищеплювальної» і «анамнестичних» можна також при постановці реакції окремо з ОН і О-антигеном (для чого остання і застосовується), визначивши, за рахунок яких (О або Н) агглютінінов позитивна ця реакція. Справа в тому, що в ході накопичення агглютінінов при брюшнотифозной інфекції спостерігається певна послідовність: в розпал хвороби в організмі хворого накопичуються тифозні О-аглютиніни, які з переходом в одужання незабаромзникають і
їх місце займають Н-аглютиніни. Точно так же після штучної імунізації (вакцинації) до черевного тифу в крові щеплених О-антитіла виявляються недовго, а тривало зберігаються тільки Н-аглютиніни.
Реакції непрямої (пасивної) гемаглютинації. При обстеженні осіб, підозрілих на носійство черевнотифозних паличок, ставлять реакцію аглютинації з сироваткою носія і Vi-антигеном або більш чутливу реакцію - непрямий (пасивної) гемаглютинації. Ця реакція заснована на здатності еритроцитів, оброблених таніном і з адсорбованим на них Vi-антигеном черевнотифозних паличок, склеюватися при впливі сироватки, що містить аглютиніни до цього антигену. Для реакції використовують еритроцити курей, барана або людини (О-групи). Техніка реакції полягає в наступному. Досліджувану сироватку нагрівають 30 хвилин при 56 °, розводять фізіологічним розчином від 1: 50 до 1: 1600 і наливають в ряд пробірок по 0,5 мл в кожну різних її розведень і по 2 краплі стандартного еритроцитарного Vi-діагностикумів. Пробірки залишають при кімнатній температурі або в термостаті на 24 години, а потім проводять облік реакції. Випадання еритроцитів в осад (гемагглютинация) свідчить про наявність антитіл в досліджуваній сироватці.
При діагностиці черевного тифу і паратифів можна поставити реакцію наростання титру фага. Ця високочутлива реакція дозволяє швидко (протягом 10-16 годин) виявити в матеріалі такі невеликі кількості бактерій, які не виявляються бактеріологічним методом. Методика цієї реакції аналогічна методиці, застосовуваної при дизентерії, з тією лише особливістю, що досліджуваний матеріал з індикаторним фагом витримується в термостаті до 16 годин замість 4-5 годин при діагностиці дизентерії.
Фаготіпірованіе черевнотифозних паличок. Дослідженнями радянських і зарубіжних авторів встановлено, що у черевнотифозних бактерій, що містять Vi-антиген, існує зв`язок між антигенною структурою і їх здатністю лізуватись бактериофагом. Розрізняють два різновиди фагів:
першу - Vi-1 фаги лизируют майже всі Vi-форми паличок черевного тифу (універсальний) -
другу - Vi-2 фаги лизируют тільки ті штами, на яких пасеровану.
В даний час налічують 78 фаготип бактерій черевного тифу. Вони стабільні і не змінюються ні в організмі людини, ні у зовнішньому середовищі. За допомогою типових фагів можна встановити фаготип збудника, що має велике практичне значення, дозволяючи розкрити епідеміологічну ланцюг. Наприклад, виявлення бактерій черевного тифу одного і того ж фаготип у бактерионосителя на молочній фермі, в молоці і у хворих, що харчувалися цим молоком, допомагає в цьому випадку встановити джерело і шляхи передачі інфекції.
Техніка фаготипирования наступна. Трьох-чотиригодинну бульонную культуру збудника тонкої платинової петлею або тонкої пастерівської піпеткою засівають на добре підсушені чашки з агаром у вигляді секторів або кружечків по числу наявних типів фага. Чашки ставлять в термостат на 30 хвилин для підсушування. Потім на висохлі краплі випробуваної культури петлею наносять однакові обсяги типових фагів (Vi-2) в критичному тест-розведенні. Зазвичай тест-розведення, т. Е. Робоча доза, вказується на етикетці ампули з фагом. Основний фаг розводять бульйоном до зазначеного розведення. Чашки знову ставлять в термостат на ніч і визначення фаготип виконується у відповідності зі схемою, що додається до наборів випускаються бактеріофагів.
Специфічна профілактика і терапія. Специфічна профілактика здійснюється хімічної вакциною TABte, до складу якої входять повні антигени палички черевного тифу, паратифів А і В і правцевий анатоксин.
Специфічне лікування хворих на черевний тиф і паратифи здійснюється антибіотиками: левоміцетином, синтоміцином, хлортетрациклин і ін.