Пневмококки - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Збудником крупозної пневмонії (запалення легенів) є пневмокок - Diplococcus pneumoniae, вперше виявлений Пастером в слині людини, яка загинула від сказу (1881).
Морфологія і тинкторіальних властивості. Пневмококки (рис. 67 і 68 на вклейці) представляють собою парних коків, що мають подовжену форму на зразок ланцета. Тому їх інакше називають ланцетоподібним диплококами. Утворюючи короткі ланцюжки, пневмококи набувають схожість зі стрептококами, в зв`язку з чим II. Ф. Гамалія назвав їх Streptococcus lanceolatus. Розмір клітин коливається в межах від 0,5X0,75 до 1X1,5 мк. Суперечка і джгутиків не мають. Відмінною особливістю пневмокока є утворення капсули, яка буває добре виражена в патологічних матеріалах (мокрота, кров і т. Д.). При культивуванні на поживних середовищах капсула втрачається. Пневмококки легко сприймають анілінові фарби і фарбуються за Грамом позитивно.
Культуральні та біохімічні властивості.
Мал. 68. Пневмококки в мазку з мокротиння.
На поверхні агару через 24 години утворюються дрібні колонії, що нагадують стрептококові, але більш дрібні і прозорі.
На скошеному агарі при рясному засіву виходить вельми ніжний прозорий наліт, що складається з найдрібніших, несліваемий колоній, на бульйоні - легке помутніння і невеликий пластівчастий осад.
На желатині свежевиделенние штами зростання не дають. Старі лабораторні штами пневмококів можуть давати дрібні білуваті колонії вже при 18-22 °. Желатину НЕ розріджують.
На молоці ростуть добре, створажівая його з утворенням кислоти.
На кров`яному агарі навколо колоній утворюється зона неповного гемолізу з зеленувато-бурим фарбуванням середовища.
Мал. 67. Пневмококки в чистій культурі з бульйону.
Пневмококки розкладають сахарозу, рафінозу і лактозу. Найважливішою ознакою є розкладання інуліну. Велика частина стрептококів цією властивістю не володіє. Вірулентні пневмококи розчинні в жовчі.
Антигенна структура і серологічні типи пневмококів. У цитоплазмі пневмококів знаходиться протеїновий антиген, загальний для всіх пневмококів. Цей антиген обумовлює їх видову специфічність. У капсулі містяться специфічні полісахаридні антигени (гаптен), що відрізняються за своїм хімічним складом у різних пневмококів (типові антигени). На підставі цих типових антигенів за допомогою реакції аглютинації і преципітації все пневмококи поділені на три основні групи (I, II, III) і четверту збірну групу (Х-групу). До складу Х-групи входить понад 70 типів.
Резистентність. На штучних поживних середовищах пневмококи швидко гинуть (4-7 днів). Під шаром вазелінового масла в рідких і напіврідких середовищах, що містять білок, вони зберігають життєздатність протягом 3-12 місяців.
Висушування пневмококи переносять добре: в сухий мокроті на розсіяному світлі вони зберігаються до 2 місяців. При нагріванні до 52-55 ° гинуть через 10 хвилин, при 60 ° - ще швидше. У розчині карболової кислоти (3%) пневмококи гинуть через 1-2 хвилини.
Особливо чутливі пневмококи до оптохіну. Під впливом останнього вони гинуть при концентрації 1: 1 000 000.
Токсиноутворення і патогенність для тварин. Яд пневмококів відноситься до ендотоксинів. З лабораторних тварин до пневмококи більш чутливі білі миші і кролики. Парентеральне введення вірулентних пневмококів через 24-48 годин викликає загибель тварин при явищах сепсису. При розтині на місці ін`єкції виявляється фібринозний екссудат- селезінка збільшена і гіперемійована.
Патогенез і захворювання у людини. Вхідними воротами інфекції служить зазвичай слизова оболонка зіву. Впровадження пневмококів в організм і проникнення їх в тканину легкого можуть, мабуть, відбуватися як через лімфатичну і кровоносну систему, так і безпосередньо через розгалуження бронхів. Найбільш частим захворюванням є крупозна пневмонія, яка характеризується раптовим початком, високою температурою, іноді з ознобом, болем у боці при диханні, головним болем, іноді втратою свідомості, маренням, сильним збудженням. Надалі з`являється кашель з характерною іржаво-червоною харкотинням. У легких спостерігається процес, захоплюючий частіше одну, рідше - дві-три частки.
Джерелами інфекції є хвора людина і бактеріоносій. Зараження ззовні відбувається як аерогенно - крапельним шляхом від носія, так і за допомогою пилової інфекції. Пневмококки можуть довго зберігатися в висохлої мокроті (близько 2 місяців) і надходити з пилом в повітря.
При обстеженні здорових людей в носоглотці нерідко виявляються патогенні пневмококи, тому не виключена можливість аутоинфекции, причому істотну роль відіграють фактори, що ослабляють опірність організму, наприклад переохолодження.
Крім крупозноїпневмонії, пневмококи викликають запалення середнього вуха, мозкових оболонок (менінгіт), а також слизової оболонки носа і повітроносних пазух, ангіну, повзучу виразку рогівки і запалення слізного мішка.
Імунітет. Перенесена пневмонія не дає імунітету. Захворювання може повторюватися неодноразово. Це пояснюється наявністю багатьох типів пневмококів і тим, що перенесена пневмонія підвищує чутливість організму до пневмококів.
У сироватці перехворіли містяться антитіла (аглютиніни і ін.).
До моменту кризи при пневмонії концентрація антитіл в крові досягає значного титру, і фагоцитоз різко посилюється (І. Я. Чистович). На підставі цих даних імунітет при пневмонії треба розглядати переважно як фагоцитарний, в якому велику роль відіграють антитіла (бактеріотропіни).
Лабораторна діагностика. Матеріалами для дослідження при пневмококових захворюваннях служить мокрота, кров і гній, взяті з різних осередків уражень, рідше спинномозкова рідина.
Патологічний матеріал (виключаючи кров) досліджують бактериоскопически, бактеріологічно і шляхом зараження білих мишей. До останнього способу доводиться вдаватися тому, що вихідний матеріал, особливо мокрота, зазвичай містить багату сторонню мікрофлору, яка при прямому посіві матеріалу на поживні середовища ускладнює виділення пневмокока.
Мазки з мокротиння, гною і т. Д. Забарвлюються за Грамом. Під мікроскопом виявляються оточені капсулою ланцетоподібні диплококи, пофарбовані по Граму позитивно.
Для виділення культур роблять посів на кров`яний агар або асціг-агар. Через 24-48 годин росту при 37 ° в разі присутності пневмокока з`являються характерні колонії. Колонії висівають на скошений сироватковий або асцит-агар і виділену культуру перевіряють на розчинність в жовчі і на здатність розкладати інулін.
Зараження білої миші - найбільш вірний шлях для виділення культури пневмокока. Матеріал від хворого або трупа (мокрота, гній, шматочок органу і т. Д.) Поміщають в стерильну чашку, потім розтирають у стерильній ступці, з 1-2 мл стерильного бульйону і 0,5 мл цієї суспензії вводять внутрішньочеревно білої миші. Після загибелі миші, що наступає протягом 12-48 годин, роблять посіви крові, взятої з серця, і майже у всіх випадках отримують чисту культуру пневмокока.
При підозрі на сепсис 10-20 мл крові засівають в асцитический або сироватковий бульйон. Після збагачення з бульйону роблять висіву на кров`яний агар і виділену чисту культуру ідентифікують за морфологічними і біохімічними ознаками.
Специфічна терапія і хіміотерапія. В даний час для лікування крупозної пневмонії з великим успіхом застосовують сульфаніламідні препарати і антибіотики (пеніцилін, біоміцин, тетрациклін та ін.).
