Менінгококи - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Збудником цереброспинального менінгіту є диплококк, вперше описаний А. Вексельбаума (1887) і відомий під назвою менінгококу - Neisseria meningitidis (рис. 69 і 70 на вклейці).
Мал. 69. менінгокок в чистій культурі.
Морфологія. Менінгококи мають форму бобовидних коків величиною від 0,8 до 1 мк. Коки розташовуються попарно і звернені один до одного увігнутими сторонами. У гною вони зазвичай розташовуються усередині лейкоцитів.
У культурах поряд зі звичайними менингококками зустрічаються дрібні і гігантські коки, розташовані поодиноко, парами і групами по чотири клітини. Менінгококи добре фарбуються всіма аніліновими фарбами, грамнегативні.
Суперечка і капсул не утворюють, нерухомі.
Мал. 71. Колонії менінгококу на сироватковому агарі (повів. В 12 разів).
Культуральні та біохімічні властивості. Менінгококи розмножуються в аеробних умовах, оптимальна температура росту 37 °. Ростуть на живильних середовищах при додаванні білка, наприклад асцитичної рідини або крові. Після ряду пересівань менінгокок починає рости і на простих середовищах, даючи на них спочатку убогий, а в подальшому більш рясний ріст. Найкращими середовищами для вирощування служать асцит-агар і асцит-бульйон. На щільних середовищах колонії менінгококів мають вигляд дисків правильної округлої форми величиною близько 3 мм, з гладкою блискучою поверхнею і ніжними прозорими краями (рис. 71). На бульйоні менингококки дають дифузний ріст з утворенням невеликого осаду. Молоко не звурдженого. Менінгококи розкладають глюкозу і мальтозу з утворенням кислоти.
Антигенна структура. Відповідно відмінності в структурі полісахаридів менингококки підрозділяються на ряд серологічних типів. Розрізняють чотири типи менінгокока: А, В, С і D. У СРСР виявлені менингококки тільки перших двох типів (А і В). Тип менінгококу визначається реакцією аглютинації з типоспецифічними імунними сироватками.
Резистентність. Менінгококи нестійкі і поза організмом швидко гинуть. Нагрівання до 50 ° вбиває їх протягом 5 хвилин, висушування швидко губіт- 1% розчин карболової кислоти вбиває менінгококу майже моментально.
Токсиноутворення і патогенність для тварин.
Токсин, що утворюється менингококками, належить до ендотоксинів. Лабораторні тварини (кролики, морські свинки, миші) малочутливі до менінгококи.
Патогенез і клініка цереброспинального менінгіту.
Джерелом інфекції при цереброспінальної менінгіті є хвора людина, реконвалесцент і здоровий бактеріоносій. Захворювання передається переважно краплинним шляхом. Вхідними воротами для менінгококу служить слизова оболонка носоглотки, переважно мигдалин, звідки він проникає в мозкові оболонки по лімфатичних шляхах або через кров.
Інкубаційний період дорівнює 2-4 дням. Захворювання характеризується швидким підйомом температури, сильним головним болем, блювотою, ригідністю (напруженістю) м`язів потилиці, розширенням зіниць і т.д. Клінічні явища обумовлюються гнійним запаленням оболонок головного і спинного мозку. Спинномозкова рідина має гнійний характер.
Захворювання носить зазвичай спорадичний характер, але іноді переростає в великі епідемії.
Запалення мозкових оболонок можуть викликати і інші мікроорганізми (стрептококи, стафілококи, пневмококи, туберкульозна паличка та ін.). Однак обумовлені ними менінгіти на відміну від менінгококового не мають епідемічного поширення.
Крім мозкових оболонок, менінгокок може вражати суглоби, клапани серця і стати причиною сепсису - менінгококкцеміі.
Імунітет. Людина має природну стійкість до менінгококи. Про це свідчить той факт, що, незважаючи на широке носійство менінгококів серед людей, носії цього мікроорганізму хворіють порівняно рідко.
Тривалість і міцність імунітету, що виникає після перенесеного захворювання, вивчені недостатньо. У крові реконвалесцентів виявляються бактеріолізини, аглютиніни, преціпітіни і бактеріотропіни. Імунітет до менінгококів розглядається як клітинний фагоцитарний і гуморальний бактерицидний.
Лабораторна діагностика. При лабораторній діагностиці цереброспинального менінгіту матеріалом для дослідження служить спинномозкова рідина, що отримується шляхом люмбальної пункції. При менінгіті спинномозкова рідина витікає цівкою внаслідок підвищення тиску в спинномозковому каналі, в той час як при нормальному тиску вона випливає краплями.
Спинномозкову рідину збирають в стерильні пробірки і негайно піддають дослідженню. У разі пересилання матеріалу в холодну пору року необхідно вжити заходів до захисту його від охолодження (обгортання ватою і т. П.).
Рідина піддають центрифугированию і з осаду роблять мазки і посів на поживні середовища. Присутність в мазках грамнегативних диплококков характерної форми (форми кавового зерна), укладених в полінуклеари або знаходяться поза клітинами, говорить про наявність менінгококів. Однак діагноз слід підтвердити виділенням чистої культури. Посів рідини проводиться в чашки з асцит-агаром і кров`яним агаром. Зазвичай засівають одночасно не менше 2-3 чашок. При сприятливих умовах культивування зростання спостерігається через 18 годин іноді тільки до кінця 2-х діб. Ідентифікація проводиться в реакції аглютинації. Для визначення типу менінгококу необхідно мати агглютинирующие сироватки типу А і В.
Практичне значення для діагностики має також реакція преципітації, яка ставиться з відцентрифуговувати спинномозковою рідиною.
При менінгококцемія вдається виділити менингококки з крові. Посіви крові для виявлення бактеріємії виробляють на 100-200 мл асцитичної або сироваткового бульйону.
При дослідженні на бактеріоносійство слиз з носоглотки знімають стерильним ватним тампоном, укріпленим на вигнутій дроті.
У лабораторії отриману слиз засівають на асцитический або сироватковий агар. Ідентифікація культур, що виділяються при бактеріоносійстві, представляє деякі труднощі внаслідок того, що в зіві зустрічається ряд сапрофітних грамнегативних диплококков, морфологічно дуже схожих з менингококками. Їх відмінності представлені в табл. 10.
Таблиця 10 Біохімічні властивості бактерій, що виділяються із зіву
вуглеводи
вид мікроба | глюкоза | мальтоза | левулеза | галактоза | лактоза | сахароза | маннит | дульцит |
Micrococcus catarrhal is | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Micrococcus pharyngeus cinereus | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Neisseria gonorrhoeae | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Neisseria meningitidis А, В, C, D | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus flavus III | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
Diplococcus pharyngeus flavus II | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus flavus I | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus pharyngeus siccus | + | + | + | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
Diplococcus crassus | + | + | + | + | + | + | 0 | 0 |
Специфічна терапія і профілактика. Для лікування епідемічного цереброспинального менінгіту в даний час з великим успіхом застосовують препарати сульфаніламідного ряду і антибіотики (пеніцилін та ін.).
Ці ж препарати застосовуються для санації менінгококової носіїв.