Аденовіруси - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Аденовіруси вперше були знайдені в культурах тканини аденоїдів в 1953 р У. Роу з співробітниками.
Аденовіруси мають розмір від 30-50 до 120 ммк, добре ростуть в культурі тканини людини, мавпи, проявляючи цитопатогенну дію. Група аденовірусів складається з 31 типи вірусів, виділених від людини, і 12 типів, виділених від мавп. Вірус нестійкий до дії температури-гине при температурі 56 ° протягом 30 хвилин.
Вірус передається від людини до людини воздушнокапельним шляхом. Вхідними воротами служать слизові оболонки верхніх дихальних шляхів і кон`юнктиву ока. Клінічно захворювання проявляється в різних формах: атипова пневмонія, фарингіт, кон`юнктивіт, фарингіт-кон`юнктивальний лихоманка, бронхіт.
Для вірусологічного дослідження береться змив з носоглотки, наліт із зіву, виділення кон`юнктиви очі і після обробки антибіотиками засівається в культуру тканини. Типування вірусу проводиться реакцією нейтралізації типоспецифічними сироватками в культурі тканини.
Вірус натуральної віспи
Збудник віспи є вірусом, діаметр якого знаходиться в межах 0,125-0,175 ммк.
Під мікроскопом в мазках з вмісту віспяних і вакцинальних везикул і пустул виявляються дрібні кокковидной елементарні тільця Морозова- Пашена, які і являють собою вірус віспи (рис. 117). Елементарні тільця можна спостерігати за допомогою звичайного мікроскопа при фарбуванні їх спеціальними методами (сріблення по Морозову, орного і забарвлення за Романовським). Найбільш точні уявлення про розміри і форму елементарних тілець отримані останнім часом за допомогою електронного мікроскопа (рис. 118).
У 1892 р Г. Гварніері зробив спостереження, що при щепленні кролику в рогівку ока оспенного матеріалу (від людини) або вірусу вакцини рогова оболонка через 48-72 години мутніє, а на гістологічних зрізах і мазках в клітинах епітелію виявляються великі включення кулястої форми ( близько 1-4 мк в діаметрі). Поява в клітинах включень Гварніері - специфічний ознака віспи (рис. 119). Оспенний вірус можна культивувати на хоріоналлантоісной оболонці зародка курки, і в тканинних культурах.
Патогенність для тварин. Вірус натуральної віспи патогенний для більшості тварин. Віспою хворіють корови, коні, вівці, кури, мавпи і інші тварини. При експериментальному зараженні на місці щеплення вірусу зазвичай на шкірі виникає одна або декілька віспяних пустул.
За антигенними властивостями вірус натуральної віспи людини і вірус віспи рогатої худоби (вірус вакцини) цілком подібні. Це дозволяє застосувати вірус вакцини, як слабо патогенний, для вакцинації населення.
Мал. 117. Елементарні тільця Морозова - Пашена в оптичне
мікроскопі.
Рис 118. Вірус натуральної віспи в електронному мікроскопі: Н. Л. Утевський
Мал. 119. Включення Гварніері в клітинах епітелію.
Патогенез і клініка. Джерелом інфекції є хвора людина. Вірус віспи міститься в шкірних пустулах, скоринках і крапельках слизу верхніх дихальних шляхів.
Інфекція може передаватися краплинним шляхом, безпосереднім контактом з хворим і через інфіковані предмети (книги, іграшки, речі хворого та ін.). Збудник віспи найчастіше проникає в організм людини через верхні дихальні шляхи (ніс і носоглотку).
Інкубаційний період дорівнює 10-13, рідше 5 днях. Місцем первинного розмноження вірусу є слизова оболонка, переважно зіву. Звідси вірус на 8-9-й день після зараження потрапляє в кров, дає початок генералізації процесу, осідає в шкірі і слизових оболонках, в результаті чого розвиваються характерні віспяні поразки (папули, везикули, пустули).
Хвороба починається раптовим підйомом температури до 39-40 °, болями в потиличній і поперекової області і появою блювоти. На 3-4-й день вірус зникає з крові і осідає на шкірі, з`являється висип, характерна для віспи. Температура при цьому знижується. Коли шкірні везикули нагноюються, температура знову піднімається, гній підсихає в скоринки, з`являється сильний свербіж. На місці корок утворюються рубці, що залишаються на все життя.
Летальність від віспи коливається в межах 15-30%. Зустрічаються, проте, дуже важкі форми з геморагічним висипом (чорна віспа), при яких летальність може досягати 100%. У той же час відомі легкі доброякісні форми віспи, так звані варіолоід, серед осіб, вакцинованих проти віспи і частково втратили несприйнятливість до інфекції за давністю часу імунізації.
Імунітет. Перенесена віспа залишає після себе стійкий імунітет, зазвичай триває все життя. Однак відомі окремі поодинокі випадки, коли захворювання повторювалося через 20 років. ПРИЩЕПНИЙ імунітет менш тривалий і згасає в середньому через 7 років.
У крові перехворілих і щеплених виявляють аглютиніни, преціпітіни, що нейтралізують вірус і комплементсвязивающіе антитіла.
М. А. Морозов експериментально довів при вивченні механізму прищепного імунітету наявність специфічного лізису елементарних тілець під дією гіперімунних сироваток in vitro і in vivo.
На думку одних авторів, в основі імунітету лежить дію антитіл. На думку інших, на першому місці стоїть здатність клітин і тканин руйнувати вірус, що купується ними після вакцинації.
Лабораторна діагностика. Для діагностики віспи можна застосувати наступні методи:
- мікроскопічне дослідження вмісту везикул і пустул для виявлення тілець Морозова-Пашена;
- зробити посів крові або вмісту пустул в. культуру тканини або на хоріоналлантоісной оболонку курячих ембріонів. Вірус віспи в культурі тканини надає цитопатогенну дію, а на хоріоналлантоісной оболонці утворює білі бляшки;
- поставити реакцію зв`язування комплементу або гальмування гемаглютинації (для виявлення антитіл);
- провести люмінесцентну вірусоскопію пустулезного матеріалу.
Специфічна профілактика. Основним засобом запобігання від віспи є вакцинація Оспен детритом.
Вакцинація складається в щепленні живого, але ослабленого проведенням через тваринний організм вірусу віспи в гліцерині.
Для отримання оспенного детриту в поверхневі насічки, зроблені скарифікатором на поголеною, чисто вимитим і обеззараженной шкірі живота здорового теляти, втирають вірус вакцини (консервативний метод). За методом Гамалії ці насічки роблять на більш великій поверхні, захоплюючої боки, спинку і груди тваринного (інтенсивний метод). На 5-6-й день, коли на місці насічок утворюються гнійні пухирці-пустули, що містять велику кількість розмножилося вірусу, тварина вбивають, а вміст пустул знімають гострими ложечками і розтирають в спеціальних млинах. Отриману масу змішують з рівним за вагою кількістю 80% гліцерину і витримують 4-6 тижнів в льодовику. Під дією гліцерину потрапили з шкіри теляти сторонні мікроби відмирають, вірус же зберігається живим, будучи стійким до гліцерину.
Отриману масу (детрит) після обробки розливають по дрібним прямим капілярним трубочкам або ампулам і зберігають на льодовику. Оспенную вакцину після її приготування перевіряють на наявність патогенних мікроорганізмів і загальну мікрофлору.
Радянськими вченими розроблено ряд заходів, спрямованих на підвищення ефективності вакцини. Замість гліцерину в якості консерванту запропонований курячий білок (М. А. Морозов). Завдяки цьому препарат став більш теплостійких.
Особливо важливим досягненням є отримання сухої оспенной вакцини, яка має виняткову теплотривкістю і тривалим терміном придатності - 1 рік замість 4-6-місячної придатності, якою володіє звичайна гліцеринова вакцина. Суха оспенная вакцина, приготована М. А. Морозовим і співробітниками, представляє тонко подрібнений зішкріб вакцинальних віспинами теляти, висушений за допомогою вакуум-рефрижератора в суміші з білковим консервантом.
