Ти тут

Санітарно-бактеріологічне дослідження молока - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень

Зміст
Мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень
Розвиток медичної мікробіології
Морфологія мікроорганізмів
будова бактерій
Бактеріологічна лабораторія, її пристрій і призначення
Види мікроскопічного дослідження
мікроскопія
забарвлення
Хімічний склад мікробів
Харчування і розмноження мікробів
живильні середовища
Підготовка посуду, приготування фізіологічного розчину
Принципи культивування мікроорганізмів
Вивчення культуральних властивостей мікроорганізмів
ферменти
дихання мікробів
Пігменти, фотогенія і ароматичні речовини мікроорганізмів
Поширення мікробів в природі
Вплив зовнішніх факторів на життєдіяльність мікроорганізмів
бактеріофаг
Антагонізм мікробів і антибіотики
Вчення про інфекцію та імунітет
Джерела інфекційних захворювань
Основні ознаки інфекційного захворювання
Роль макроорганізму в інфекційному процесі
Значення зовнішнього середовища на резистентність
Форми поширення інфекційних захворювань
Загальні відомості про імунітет
вроджений імунітет
набутий імунітет
реакція преципітації
Реакція лізису і гемолізу
Реакція зв`язування комплементу
опсоніни
алергія
Специфічна терапія і профілактика інфекційних захворювань
генетика мікроорганізмів
стафілококи
стрептококи
пневмококки
менінгококи
гонококи
Паличка синьо-зеленого гною, вульгарний протей
Бактерії коклюшу і параклюша
клебсієли
Бактерії кишково-тифозної групи
Кишкова паличка
Збудники черевного тифу і паратифів
сальмонели
дизентерійні бактерії
холерний вібріон
збудник дифтерії
збудник туберкульозу
Збудник прокази, пастерелли і бруцелли
збудник чуми
збудник туляремії
бруцели
Збудник сибірської виразки
збудник сапу
збудник правця
Збудник газової гангрени
збудник ботулізму
спірохета сифілісу
Спірохета поворотного тифу
спірохета Венсана
лептоспіри
збудник содоку
рикетсії
Група висипного тифу
Група плямистих лихоманок, цуцугамуши, риккетсиозов
віруси
вірус грипу
параміксовіруси
рабдовіруси
ентеровіруси
арбовіруси
аденовіруси
герпесвіруси
вірус гепатиту
паповавіруси
Санітарно-бактеріологічне дослідження води
Санітарно-бактеріологічне дослідження води і харчових продуктів на виявлення холерного вібріона
Санітарно-бактеріологічне дослідження напоїв
Санітарно-бактеріологічне дослідження молока
Санітарно-бактеріологічне дослідження м`яса
Санітарно-бактеріологічне дослідження продуктів на наявність стафілокока
Дослідження мікрофлори повітря
Санітарно-бактеріологічне дослідження грунту
Бактеріологічне дослідження калу на бактеріоносійство
Бактеріологічне дослідження змивів з рук, інструментарію, інвентарю
Збирання і пересилання матеріалу для дослідження

МОЛОКО І МОЛОЧНІ ПРОДУКТИ

Молоко і молочні продукти піддають мікробіологічному дослідженню:

  1. в порядку контролю за дотриманням санітарно-гігієнічного режиму в процесі обробки, зберігання та реалізації молочних продуктів;
  2. у всіх випадках, коли виникає сумнів у якості продуктів та підозра, що вони можуть викликати захворювання у людей;
  3. у випадках харчової інтоксикації, яку пов`язують з вживанням цих продуктів.

Взяття проб. Молоко, вершки, кисле молоко, сметана, кефір, ацидофільне молоко та інші молочнокислі продукти добре перемішують черпаком або ложкою, беруть 50 мл в стерильну пляшку з ватно-марлевою пробкою і паперовим ковпачком.
При необхідності провести повний мікробіологічний аналіз необхідно 250-300 мл. Розфасовані продукти надходять на мікробіологічне дослідження в оригінальній упаковці-1-2 зразка. Морозиво беруть з середини маси. Для цього верхній шар в 2,5 см знімають стерильною ложкою або шпателем і набирають 50 г в стерильну банку. Від розфасованого морозива беруть 1-2 зразка, знімають упаковку (папір, целофан або свинцева папір) і кладуть в стерильну банку. До дослідження морозиво зберігають на холоді (-2 °). Масло, сирні вироби беруть стерильним щупом на відстані 3-5 см від краю, похило направляючи щуп до протилежної сторони, опускаючи на 1 3 його довжини. З щупа відбирають 20 г продукту в стерильну банку. При дослідженні сиру поверхню зразка протирають ватою, змоченою етиловим спиртом і обпалюють. Стерильний щуп вводять похило і відбирають 10 г в стерильний посуд. При підозрі на харчову інтоксикацію поверхневий шар зразка беруть в окремий посуд і роблять окремий посів.
Час з моменту взяття проб і до посіву не повинно перевищувати 4 годин. Якщо термін доставки і зберігання подовжений, то це вказується в напрямку і відзначається в лабораторному журналі.
Методика дослідження пастеризованих молочних продуктів. Перший день. Молоко відкривають, дотримуючись правил стерильності, добре перемішують стерильною піпеткою і роблять посіви на загальне бактеріальне обсіменіння і на колі-титр.
Для визначення загальної кількості мікроорганізмів роблять розведення молока 1: 10- 1: 100 1: 1000. 1 мл з кожного розведення вносять в одну чашку Гейденрейха-Петрі і заливають 12-15 мл агару, як це описано при дослідженні води, і ставлять в термостат при 37 ° на 48 годин.

Загальна кількість бактерій в морозиві визначається так само, як і в молоці.
У молочнокислих продуктах (ацидофільне молоко, кисле молоко, кефір, сир, сметана та ін.) Загальну забрудненість не визначають, а контролюють склад молочнокислої мікрофлори. Для цього готують препарати з молочнокислих продуктів, фарбують їх метиленовим блакитним і микроскопируют.
Для визначення колі-титру молоко і молочнокислі продукти (кефір, кисле молоко, ацидофільне молоко, кумис та ін.) Засівають в 6 пробірок із середовищем Кесслера. У 3 пробірки засівають по 1 мл цільного продукту і в 3 пробірки по 1 мл з розведення продукту 1: 10v Морозиво засівають в 3 пробірки з розведення 1: 10. Для сирого молока роблять додаткові розведення 1: 100, 1: 1000, 1: 10 000, 1: 100 000 і засівають по 1 мл кожного розведення.
Масло, сир, бринзу засівають в середу Кесслера по пробірки з кожного розведення, сир і сметану по 1 пробірці з кожного розведення. Розведення роблять, починаючи з 1: 10 і закінчуючи 1: 100 000- при дослідженні масла сіють 1 мл цільного продукту і по 1 мл з розведення продукту 1:10, 1: 100, 1000.
Посіви ставлять в термостат при 43 ° на 24 години. При дослідженні морозива пробірки з посівом витримують в термостаті при 43 ° 48 годин.
Другий день. З пробірок роблять висіву на середовище Ендо і ставлять в термостат при 37 ° на 18-24 години.
Третій день. Чашки переглядають, з характерних колоній (червоних з металевим блиском, рожевих, блідо-рожевих) роблять мазки, фарбують за Грамом і мікроскопують.
При виявленні грамнегативних неспорових паличок решту колоній висівають на середовище з глюкозою і на середу Козера. Пробірки з посівами на середовищі Козера поміщають в термостат при температурі 37 °, на середовищі з глюкозою - при 43 ° на 18-24 години. Чашки на загальне бактеріальне обсіменіння виймають і підраховують кількість колоній, що виросли.
Для сирого молока норми коли-титру не існує.
Четвертий день. Проводиться облік результатів. Освіта кислоти і газу в середовищі з глюкозою і відсутність зростання на цитратной середовищі Козера є підставою для остаточної відповіді на присутність бактерій групи кишкової палички (цитрат негативною різновиди), які враховують при визначенні кіль- титру. Чи не враховують різновиди кишкової палички, що дають зростання на цитратной середовищі Козера, змінюючи її при цьому з оливково-зеленого кольору в волошковий.
Відповідь для пастеризованого молока, вершків і молочнокислих продуктів (кефір, кумис, ацидофільне молоко, кисле молоко) визначають по табл. 32.
Таблиця 32
Коли-титр пастеризованого молока, вершків, морозива, ацидофільного молока, кислого молока

Кількість пробірок з засіваються матеріалом

результат

1 мл

1 мл

1 мл

0,1 мл

ОД мл

0,1 мл

Відео: Робота в лабораторії:

бродіння

-

gt; 3 мл

»

+

-

-

-

-

-



3 »

»

+

+

-

+

-

-

0,3 »

»

+



+

+

+

+

lt; 0,3 »

»

+

+

+

+

+

-

lt; 0,3

»

+

+

-

+

+

+

lt; 0,3 »

Якщо ні в одній пробірці не виявлено газоутворення, то вважають колі-титр більше 3 мл.
Якщо в одній пробірці з 1 мл продукту виявлені ознаки бродіння, то вважають колі-титр 3 мл.
Якщо бродіння виявлено більш ніж в одній пробірці з 1 мл продукту або хоча б в одній з пробірок з 0,1 мл, то вважають колі-титр 0,3 мл.
Якщо бродіння виявлено у всіх пробірках від обох розведень або в 3 пробірках одного (будь-якого) розведення та в 2 пробірках іншого, то вважають кіль- титр менше 0,3 мл.
Для морозива, молочних коктейлів відповідь визначають, керуючись наступним:

  1. Якщо ні в одній пробірці з 3 засіяних по 0,1 обсягу не виявлено газоутворення, то вважають колі-титр більше 0,3 мл.
  2. Якщо в одній пробірці з 0,1 продукту виявлені ознаки бродіння, то вважають колі-титр 0,3.
  3. Якщо бродіння виявлено в двох або трьох пробірках, то коли-титр вважають менш 0,3.

Коли-титр для інших продуктів встановлюють, керуючись табл. 33.
Таблиця 33
Коли-титр масла, сиру, бринзи

а) якщо ні в одній пробірці не виявлено ознак бродіння, то коли-титр вважають 1,1-
б) якщо бродіння виявлено у всіх пробірках, то коли-титр вважають lt; 0,0001, тобто менш найменшого засіяного обсягу-
в) якщо бродіння виявлено тільки в першій пробірці, то коли-титр дорівнює 1,1 (загальною вагою продукту в усіх засіяних обсягах) -
г) якщо бродіння виявлено в перших двох пробірках, то коли-титр дорівнює 0,1
д) якщо бродіння виявлено в кількох пробірках, то за колі-титр приймають кількість продукту в найбільшому розведенні, що дав зростання кишкової палички.
Середа Козера. До 1 літру дистильованої води додають: 1,5 г фосфорно-кислого натрію-аммонія- 1 г - фосфорно-кислого однозамещенного калію- 0,2 г - сірчанокислого магнія- 2,5-3 г - лімоннокіслого натрію. Розчин стерилізують в автоклаві при 1 атмосфері протягом 15 хвилин.
Перед посівом до нього додають 10 мл 0,5% спиртового розчину бромтимолового синього і розливають в стерильні пробірки.
Середа набуває волошковий колір.

ДОСЛІДЖЕННЯ МОЛОЧНИХ СУМІШЕЙ З ДИТЯЧИХ МОЛОЧНИХ кухонь

Дитячі молочні кухні випускають для дітей грудного віку молочні суміші (№ 1, 2, 3, КРС2, КРС4 і т. Д.) І молочнокислі продукти (кефір, кисле молоко, ацидофільне молоко).
Молочні суміші доставляють у лабораторію в посуді, приготовленої до видачі. Для визначення колі-титру засівають на середу Кесслера в кількості 10 1 0,1 і 0,01 мл. На загальну кількість бактерій засівають 1 мл з розведення 1: 10. Вирощують 2 діб при 37 °.
Результат дослідження визначають по табл. 31 для обсягів 10- 1 0,1 і 0,01 мл.
Загальну забрудненість кефіру не визначають, так як в кефірі та інших молочнокислих продуктах є виробнича молочнокислая мікрофлора (молочнокислі стрептококи, гриби). Для визначення якісного. складу мікрофлори в молочнокислих продуктах готують препарати, фіксують сумішшю Нікіфорова і фарбують водної синню.
У добре підготовленому кефірі при мікроскопічному вивченні пофарбованого мазка повинні бути виявлені молочнокислі стрептококи, дріжджі в достатній кількості. Відсутність дріжджів в мазках показує, що кефір не відповідає своєму призначенню.

ДОСЛІДЖЕННЯ МОЛОКА НА Бруцели

Бактеріологічне дослідження. Молока в кількості 10 мл центрифугируют. З вершків і осаду готують препарат і роблять посів (0,1-0,2 мл) на печінковий агар або на печінковий бульйон. Препарат забарвлюють за методом Козловського і микроскопируют. Можна вирощувати бруцелл також на м`ясо-пептонном агарі або бульйоні (pH 6,8-7,0) з 1% глюкози і 1: 100 000 генціанвіолета.
Хоча культури бруцел з продуктів вдається отримати і в звичайних аеробних умовах, все ж слід провести одночасно посів і в умовах підвищеного вмісту вуглекислоти.

Дослідження молока серологічним методом. Виявити антитіла (аглютиніни) в молоці можна в такий спосіб. У пробірку діаметром 0,5-0,8 см вносять 1 мл цільного свіжого молока і додають 0,05 мл (1 краплю) антигену, що представляє собою суспензія вбитих і забарвлених гематоксиліном клітин бруцел. Пробірку ретельно струшують до появи рівномірного блакитним забарвлення молока, поміщають на водяну баню або в термостат при 37 ° на 30-40 хвилин і враховують результат реакції. При відсутності термостата пробірку можна витримати при кімнатній температурі протягом 75-90 хвилин.
Позитивна реакція характеризується появою шару вершків - кільця синього кольору, що складається з пофарбованих склеєних бактерій. Стовпчик молока в інших його частинах робиться світлішим.

ДОСЛІДЖЕННЯ ВИРОБІВ ІЗ КРЕМА

Бактеріологічне дослідження крему проводиться в плановому порядку і при підозрі на харчове отруєння.
При плановому бактеріологічному контролі вироби з крему відбираються по ходу технологічного процесу (з кремосбівательних машин, з осадових мішечків і з готової продукції).
Дослідженню підлягають:

  1. Масло, з якого готувався крем.
  2. Крем вершковий і заварний.

Для дослідження крем беруть стерильною ложкою з різних ділянок в кількості 20-50 г і поміщають в стерильні банки, обв`язані двома шарами паперу. Перед дослідженням крем розтоплюють на водяній бані при 45 ° і ретельно перемішують.
Кремові вироби досліджують: 1) на загальну мікробну забрудненість, 2) на колі-титр, 3) на наявність стафілокока.
Для визначення загальної кількості мікроорганізмів на чашки Гейденрейха-Петрі засівають по 1 мл з розведення 1: 100 і 1: 1000, розведення крему роблять у стерильній воді, підігрітої до 45 °. Чашки заливають розплавленим і охолодженим до 45 ° м`ясо-пептони агаром і ставлять в термостат при 37 ° на 24 години.
Для визначення колі-титру крем засівають в пробірку з середовищем Кесслера в обсягах: 1 мл, 0,1 мл, 0,01 мл і 0,001 мл, кожне розведення засівають в 2 пробірки (другий ряд служить контрольним для підтвердження результатів першого ряду).

При визначенні колі-титру в кремових виробах враховують всі різновиди кишкової палички. Кіль титр визначається так само, як у вершковому маслі.
Для виявлення стафілококів роблять посів 1-2 крапель розплавленого крему на чашки з желточно-сольовим агаром (середа Чистовича) і в сольовий бульйон.    



Поділися в соц мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Схожі повідомлення

Увага, тільки СЬОГОДНІ!