Кишкова паличка - мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень

Кишкова паличка відкрита в 1885 р Ешеріхія і названа Escherichia coli. Ці бактерії, що мешкають в кишечнику людини і тварин, при деяких умовах можуть придбати вірулентність і з`явитися збудниками ряду патологічних процесів.
Морфологія і тинкторіальних властивості. Е. coli має вигляд прямої палички з закругленими кінцями розміром від 2,5 до 3 мк в довжину і 0,5 до 0,8 мк в ширину. Іноді зустрічаються форми, що наближаються до коків, або довгі нитки (рис. 78).
Культуральні та біохімічні властивості. Кишкова паличка розмножується в аеробних умовах при температурі 37 °. До живильних середовищ невибаглива. На звичайному агарі через добу росту утворюються дрібнозернисті молочно-блакитного кольору колонії діаметром 2-3 мм. На бульйоні дає рівномірне помутніння. До кінця доби утворює індол. Молоко створаживаться через 1-4 доби внаслідок утворення молочної кислоти. Е. coli розкладає з утворенням кислоти і газу глюкозу, мальтозу, лактозу і маніт. Желатину НЕ розріджує.

Мал. 78. Бактерії кишково-тифозної групи.
1 джгутики у брюшнотифозной палочкі- 2 - колонії-3 - мазки з культури: а - брюшнотіфозной- б - паратіфозной- в - дізентерійной- г - кишкової палочкі- 4 - валообразованіе колоній у S. Schottmti lleri.
Відрізняючись широкою пристосованістю до мінливих умов існування, кишкова паличка може змінювати свої біохімічні властивості. У зв`язку з цим розрізняють такі різновиди:

Відео: Дослідження проби питної води на загальне мікробне число (ОМЧ)

Антигенна структура. Дослідженнями Кауфмана встановлено, що кишкові палички володіють складною антигенною структурою, що складається з трьох різного роду антигенів:

1. соматичного термостабильного антигену (О-антиген);
2. жгутикового, термолабільного антигену (Н-антиген);
3. соматичного поверхневого, оболочечного або капсульного термолабільного К-антигену, який містить різні поверхневі, капсульні антигени (L, В, Vi - термолабільні антигени і А, М-термостабільні).

Резистентність. При нагріванні у зважать кишкова паличка гине при 55 ° через годину, а при 60 ° через 15 хвилин. У 1% розчині карболової кислоти гине через 5-15 хвилин.
Патогенність для тварин і токсінообразованіе. Деякі різновиди кишкової палички мають патогенні властивості. Парентеральне введення таких культур лабораторним тваринам нерідко викликає загибель останніх при явищах сепсису.
Е. coli містить ендотоксин. Однак зустрічаються палички, які продукують екзотоксини, що діють на нервову систему.
Захворювання людини, викликані кишковою паличкою. Кишкова паличка є постійним мешканцем кишечника здорової людини (переважно в товстому кишечнику) і відноситься до умовно патогенних мікробів. У природних умовах вона навіть грає позитивну роль, будучи антагоністом дизентерійних, тифозних і деяких гнильних мікробів. В процесі своєї життєдіяльності утворює вітаміни В і Е. Встановлено, що застосування деяких антибіотиків широкого спектру дії пригнічує життєдіяльність кишкової палички і призводить до тяжких кишкових розладів. При деяких умовах, що викликають зниження резистентності макроорганізму (перевтома, виснаження і т. Д.), Цей мікроорганізм може викликати різні гнійні захворювання кишечника (наприклад, апендицит) і сечовивідних шляхів. Іноді вона є причиною запалення жовчних шляхів, жовчного міхура. Проникаючи через виразки кишечника при черевному тифі і дизентерії, кишкова паличка може викликати перитоніт. Можливо проникнення кишкової палички в кров через неушкоджену слизову оболонку кишечника, чим пояснюються колібаціллярние інфекції.
Наведені захворювання носять характер ендоінфекціі (аутоинфекции) і не передаються від хворої до здорової. Однак кишкові палички можуть викликати захворювання екзогенного порядку. Це так звані ентеропатогенні штами Е. coli. За своїми морфологічними та біохімічними властивостями вони нічим не відрізняються від звичайних кишкових паличок, але володіють великою патогенностью для дітей, більш стійкі до дії шлункового і дуоденального соків. Головна їхня відмінність в антигенної структурі, в тіпоспеціфічності. О-антиген притаманний усім варіантам кишкової палички, поверхневий К-антиген - тільки ентеропатогенних. Виявлення К-антигенів дозволило побудувати діагностичну антигенну схему і розділити з її по- міццю ентеропатогенні кишкові палички на ряд серологічних типів (0-25, 0-26, 0-55, 0-86, 0-127, 0-128 та ін. ). К-антиген строго специфічний для кожного серотипу кишкової палички. Наприклад, 0-26 має «К» 6, 0-11 - «К» 4, 0-55- «К» 5 і т. Д. В даний час налічується близько 40 ентеропатогенних Е. coli.
Ентеропатогенні кишкові палички викликають гастроентерити і коліентеритів у новонароджених і дітей раннього віку, що супроводжуються іноді ураженням печінки, значною інтоксикацією. Епідемічні спалахи таких захворювань в дитячих установах носять контактний або контактно-харчової характер. Вони можуть також викликати гнійно-запальні процеси і харчові токсикоінфекції (харчові отруєння).
Лабораторна діагностика. При ендогенної інфекції надісланий матеріал (жовч, сеча, виділення з матки і т. Д.) Підлягає лабораторному дослідженню.
Перший день. Посів матеріалу на чашки з середовищем Ендо або Левіна. Посіви ставлять в термостат на 24 години при 37 °.
Другий день. Бактериоскопическое вивчення червоних з металевим відтінком або безбарвних вологих колоній. При наявності в них дрібних грамнегативних паличок роблять пересів на скошений агар і ставлять в термостат на 24 години при 37 °.
Третій день. Пересівши чистої культури бактерій на вуглеводи строкатого ряду - лактозу, глюкозу, мальтозу, маніт, сахарозу і бульйон (для визначення індолу).
Четвертий день. Облік посівів.
Культуру, що не розклали лактозу і не образовавшую індолу, перевіряють в реакції аглютинації зі специфічними сальмонельозне сироватками. Якщо реакція аглютинації дала негативний результат, виділений штам слід вважати паракішечной паличкою (Е. paracoli).
По-іншому ведеться дослідження при гастроентеритах і коліентеритів у дітей.
Перший день. Посів випорожнень і блювотних мас на чашки з середовищем Ендо або Левіна витримують в термостаті 24 години при 37 °.
Другий день. Не менш 10 колоній, червоних з металевим блиском, рожевих або безбарвних, перевіряють за допомогою орієнтовною реакції аглютинації полівалентної агглютинируют ОК-сироваткою (містить антитіла проти декількох серотипів кишкової палички). Сироватку готують змішуванням типових сироваток найбільш часто виділяються серотипів кишкової палички. Колонію, яка дала агглютинацию з полівалентною сироваткою, перевіряють моновалентною типоспецифічними сироватками в розведенні 1: 10, т. Е. Встановлюють серотип кишкової палички. Потім з колонії, дала позитивну реакцію аглютинації, роблять пересів на скошений агар і цю пробірку ставлять у термостат на 24 години при 37 °. Якщо аглютинація бактерій з колоній не відбулася, результат негативний.
Третій день. Культуру на скошеному агарі змивають стерильним фізіологічним розчином, змив переносять в стерильну пробірку і кип`ятять на водяній бані протягом 1-2 годин. З прогрітій культурою ставлять орієнтовну реакцію аглютинації з тієї типоспецифічними сироваткою, яка агглютініровалісь бактерії в живому стані,
При позитивній реакції видається орієнтовний відповідь, наприклад:

Відео: Дослідження проби питної води на ОКБ (загальні коліформні бактерії)

АНАЛІЗ № калу дитини Петрова Сергія (6 місяців).
При бактеріологічному дослідженні калу виділено патогенну кишкову паличку (серотип 0-26).
лаборант
Рекомендується закінчити дослідження розгорнутої реакцією аглютинації. На етикетці ампули з агглютинируют сироваткою відзначені титри для О-і К-антигенів. Тому сироватку розводять в двох рядах пробірок. Для виявлення К-антигену в один ряд пробірок вносять змиту зі скошеного агару живу культуру- для виявлення О-антигену використовують кип`ячену протягом години культуру. Кип`ятіння викликає руйнування В-антигену, розташованого поверхностнее О-антигену. Пробірки поміщають на добу в термостат при 37 °. Гомологічні сироватці штами агглютинируются до титру або до половини титру.
Специфічна терапія. Для лікування хронічних запальних процесів, викликаних кишковою паличкою, показана аутовакцина і бактеріофаг. Останнім часом рекомендують застосування сульфаніламідних препаратів, стрептоміцину, левоміцетину, хлортетрациклина, міцеріна, коліміцина і неоміцину.