Дослідження сечового осаду - практичні навички педіатра
Відео: Визначення з реактивного білка в сироватці крові
Кількісна ОЦІНКА ЕЛЕМЕНТІВ сечового ОСАДУ
Кількісна оцінка елементів сечового осаду широко впроваджена в педіатричну практику по відношенню до органічних елементів. Визначення в осаді кількості еритроцитів, лейкоцитів, циліндрів, клітин Штернгеймера-Мальбина, активних лейкоцитів має діагностичне та диференційно-діагностичне значення.
Метод Каковского-Аддиса. Сечу збирають протягом 12 год. Напередодні дослідження, для того щоб сеча була більш концентрована і мала кислу реакцію (а це зберігає клітини крові, що потрапили в сечу, від руйнування), дитина повинна приймати білкову їжу і менше пити. Увечері перед сном дитина повинна спорожнити сечовий міхур. При цьому важливо точно зазначити час. Потім протягом 12 год (при природному бажанні дитини помочитися) сечу збирають в посудину.
Для консервації сечі в неї додають кристалик тимолу або кілька крапель трікрізола. Вранці дитина мочиться останній раз (знову слід зазначити час), після чого сеча підлягає дослідженню Зібрану сечу перемішують, вимірюють її кількість і 10 мл наливають в градуйовану центрифужную пробірку. Центрифугують сечу 10 хвилин при 1500 об / хв, потім піпеткою знімають 9 мл надосадової рідини. У залишеному 1 мл сечі суспензії осад і краплю суспензії поміщають в камеру Горяєва. Під мікроскопом при середньому збільшенні окремо підраховують еритроцити і лейкоцити зазвичай в 15 великих квадратах. Циліндри підраховують при малому збільшенні в 150 великих квадратах. Результати підрахунку ділять на 10 (число мілілітрів сечі, з якої одержано осад при центрифугуванні), потім множать на 1000 (для перекладу кубічних міліметрів в кубічні сантиметри) і ще на 2 (для перерахунку на добову сечу).
Швидкий розрахунок можна зробити за формулою v4 = ЛГ - 1 000 000 (для еритроцитів і лейкоцитів) і А = X • 100 000 (для циліндрів), де А - кількість еритроцитів, лейкоцитів або циліндрів, виділених за добу-X - кількість полічених еритроцитів , лейкоцитів, циліндрів.
У нормі при кількісному дослідженні елементів осаду по Каковскому-Аддіс у дітей за добу виділяється близько 2 млн лейкоцитів, 1 млн еритроцитів і 20 тис. Циліндрів.
Метод Амбурже. Відрізняється від описаного вище тим, що сечу збирають за 3 год (приблизно з 8 до 11 год). Після визначення елементів осаду в камері Горяєва розраховується, скільки їх виділяється в хвилину. У нормі при зборі сечі за методом Амбурже за хвилину у хлопчиків виділяється не більше 1500 лейкоцитів і 1000 еритроцитів, у дівчаток відповідно до 2000 і 1000.
Метод Нечипоренко. Використовується зазвичай при ускладненнях в зборі сечі за той чи інший проміжок часу. Для дослідження беруть свежесобранную сечу, 5-10 мл се центрифугируют і в осаді, як було показано при описі методу Каковского-Аддиса, підраховують формені елементи і циліндри. Перерахунок ведеться на 1 мл сечі. У здорової дитини в 1 мл свіжозібраної сечі міститься не більше 2000 лейкоцитів і 1000 еритроцитів.
Збільшення кількості лейкоцитів в сечі при дослідженні осаду характерно для микробно-запальних захворювань органів сечовиділення (пієлонефрит, цистит, пієлоцистит і ін.). Збільшення числа еритроцитів вище зазначених норм при відносно низькому вмісті лейкоцитів спостерігається при дифузному захворюванні нирок інфекційно-алергічного генезу, спадкових нефропатіях, туберкульозі нирок, сечокам`яної хвороби.
Відео: "Лабораторія і нефролог. Спільна трактування результатів загального аналізу сечі і осаду"
ЦИТОЛОГІЧНІ ДОСЛІДЖЕННЯ сечового ОСАДУ
Методи цитологічного дослідження сечового осаду застосовуються для встановлення діагнозу при латентно поточних формах нефриту. У таких випадках буває важко визначити, який процес лежить в основі хвороби: мікробно-запальний або інфекційно-алергійний.
Для цитологічного дослідження беруть свіжу ранкову сечу слабокислою реакції. Для концентрування осаду 10 мл сечі розливають в 5 центрифужних пробірок і центрифугують при 1000 об / хв протягом 2-3 хв. Потім, обережно знявши надосадову рідину, осад з усіх пробірок зливають в одну і знову 2-3 хвилин центрифугують при 1000 об / хв. Отриманий осад суспензії в декількох краплях надосадової рідини з додаванням 2-3 крапель сироватки. Отриману суспензію наносять на предметні скельця, готують мазки, фіксують їх на протязі 5 хвилин в метиловий спирт, висушують і фарбують за Романовським-Гімзою. Готові мазки микроскопируют під иммерсией. Для виведення лейкоцитарної формули підраховують 100- 300 лейкоцитів. Якщо в основі хвороби лежить мікробно- запальний процес, в лейкоцитарній формулі переважають нейтрофіли (до 75%), при гломерулонефриті виявляється велика кількість мононуклеарів, а при спадковому нефриті - лімфоцитів.
Визначення клітин Штернгеймера-Мальбина. Це один з методів діагностики, за допомогою якого можна диференціювати латентно протікають микробно-запальні процеси в нирках і сечових шляхах (пієлонефрит, цистит та ін.) І дифузні захворювання нирок. Клітини Штернгеймера-Мальбина великі за розмірами, мають овальну, круглу або грушоподібної форми.
Протоплазма їх майже безбарвна, містить сірі гранули, які вчиняють броунівський рух. Ядра при фарбуванні барвником розчином Штернгеймера-Мальбина приймають блідо-синій або блідо-фіолетовий колір.
Для дослідження в центрифужную пробірку поміщають 5-10 мл свіжої ранкової сечі і центрифугують протягом 2-3 хвилин при 1000 об / хв. До отриманого осаду додають 1-2 краплі барвника розчину Штернгеймера -Мальбіна, розмішують і одну краплю суспензії наносять на предметне скло. Краплю покривають покривним склом і мікроскопують при масляній імерсії.
Барвний розчин Штернгеймера-Мальбина готується заздалегідь і може зберігатися в лабораторії до трьох місяців. Він складається з розчинів № 1 і № 2. У розчин № 1 входять генціан-фіолетовий - 3 г, спирт етиловий 95% - 20 мл, щавлевокислий амоній - 0,8 г, тричі дистильована вода - 80 мл. Розчин № 2 містить сафранін - 0,25 г, етиловий спирт-10 мл, тричі дистильовану воду - 100 мл. Обидва розчину змішують в пропорціях: розчину № 1 - 1 частина і розчину № 2 - 97 частин.
Клітини Штернгеймера-Мальбина представляють собою видозмінені гранулоцити, набряклі при низькому осмотичний тиск сечі, вони зустрічаються на деяких стадіях пієлонефриту.
Визначення активних лейкоцитів (по В. С. Рябінскому і В. Е. Родоману). При зниженні осмотичного тиску сечі проникнення води в активні лійкою ціти посилюється, що веде до збільшення їх розмірів у 1.5- = 2 рази і рухливості гранул протоплазми. Для виявлення активних лейкоцитів до осаду сечі додають краплю дистильованої води і краплю насиченого розчину фарби сафраніну або еозину. Ці лейкоцити активно вбирають воду. Сафранін в них не проникає, і вони залишаються блідо-сірими, тоді як «мертві» лейкоцити забарвлюються. Препарат розглядають під мікроскопом при збільшенні в 40 разів або з иммерсионной системою. Підраховують число активних клітин на 100 лейкоцитів. При пієлонефриті виявляється 70-80% активних лейкоцитів. При інших захворюваннях нирок їх кількість не перевищує 10%.
Для більш достовірної діагностики мікробно-запальних захворювань сечової системи (пієлонефрит, пієліт, пієлоцистит) важливо переконатися в участі в патологічному процесі інфекції. Бактеріологічне дослідження вимагає отримання сечі за допомогою катетера і являє собою тривалий процес. У зв`язку з цим було запропоновано методи виявлення справжньої бактериурии за допомогою хімічних проб.
Реакція на нітрити. Під впливом життєдіяльності бактеріальної флори додані в сечу нітрати переходять у нітрити. Виявляють їх наступним чином: до 1 мл сечі додають 0,04 мл розчину калію нітрату, після чого пробу інкубують в термостаті протягом 4 6 год при температурі 37 ° С. Потім до проби додають кілька мл суміші, що складається з розчинів А і Б. У розчин А входять сульфаниловая кислота - 1,25 г, оцтова кислота 30% - 500 мл-в розчин Б: альфанафтіламін-2,5 г, оцтова кислота 30% - 500 мл. Реакція вважається позитивною (що вказує на наявність в сечі нітритів) при появі червоного або рожевого забарвлення.
У нормі у здорових дітей і дорослих число бактерій в 1 мл сечі не перевищує 100 000. При інфекції сечових шляхів бактеріурія більш виражена.
Визначення патологічної бактериурии за прискореною реакції на нітрити. Для реакції готують свіжий реактив Касаткіна, який складається з риванола в розведенні 1: 1000 і хлористоводневої кислоти - 12% розчин.
Свіжу ранкову сечу в кількості 1 мл поміщають в стерильну пробірку і додають одну краплю 5% розчину калію нітрату. Пробу поміщають в термостат на 6 ч при температурі 30 ° С, потім додають 0,2 мл ріванолового реактиву. Поява рожевого забарвлення свідчить про те, що в 1 мл сечі міститься 100 000 і більше мікробних тіл.
