Спроби отримання остеомієліту в експерименті - остеомієліт у дітей
ГЛАВА 3
ПАТОГЕНЕЗ
СПРОБИ ОТРИМАННЯ ОСТЕОМІЄЛІТУ В ЕКСПЕРИМЕНТІ
Крім наведеного вище опису патологічних процесів при остеомієліті у дітей, становить значний інтерес з`ясування патогенезу цього захворювання, механізму його виникнення та шляхів поширення інфекції. В цьому відношенні ще до сих пір залишається багато нез`ясованого. В першу чергу дослідники намагалися вирішити це питання шляхом відтворення остеомієліту у тварин, здебільшого у кроликів. Питання це має історію, на якій коротко і зупинимося.
У 1874 р Кохер наносив кроликам пошкодження кінцівок і одночасно годував їх гнилої піщей- при цьому він отримав у них остеомієліт, але без метастазів. Іншим дослідникам вдалося викликати остеомієліт, вводячи гнильні бактерії в їжу при одночасному переломі пли ударі кістки. На цій підставі вони прийшли до висновку, що збудником остеомієліту є гнильні бактерії. Цієї точки зору дотримуються також Гемпфріс, Пилипович (1935) і ін., Які вважають, що остеомієліт виникає внаслідок кишкової інтоксикації, знижує бактерицидні властивості крові. Вперше вдалося отримати експериментальний остеомієліт гематогенним шляхом Бейкеру в 1883 р при поєднанні внутрішньовенного введення стафілокока з попередньою травмою кінцівки. Розенбаха, Краузе, Аккерману (Ackermann), Ульману, Робертсону (Robertson), Фарбі і ін. В цей же час вдалося викликати остеомієліт у кроликів шляхом внутрішньовенного введення культури стафілокока з попередніми пошкодженням кінцівки, починаючи з поколачивания і закінчуючи закритим переломом. На цій підставі більшість послідовників прийшли до висновку, що травма є вирішальним фактором у розвитку гострого гематогенного остеомієліту. Рокитанський (Rokitansky) також зазначив, що, незважаючи на специфічність мікробів, експериментальний остеомієліт вдається отримати тільки при наявності травми.
Ульман, Розенбах і ін. Поєднували внутрішньовенне введення мікробів з перетягуванням на тривалий час кінцівки тварини гумовою трубкою і викликали у кролів гнійне запалення кісткового мозку. Були проведені досліди з годуванням тварин авітамінізірованной їжею [Такаяси, Кувахата (Takajaschi, Kuwahata) і ін.]. Виявилося, що у молодих тварин, позбавлених вітаміну В або С, введення золотистого стафілокока викликало утворення абсцесів в кістках.
Іншим шляхом пішли Роде (Rodet, 1885), Д. О. Кранцфельд (1886), А. Д. Павловський (1889), А. І. Кудряшов (1895) і ін. Їм вдалося викликати остеомієліт у кроликів, користуючись ослабленою культурою шляхом проведення її через ряд генерацій або підігріваючи протягом доби при температурі 44-45 °. Вводячи молодим кроликам внутрішньовенно ослаблену культуру без попереднього пошкодження, вони отримували множинний гнійний остеомієліт.
Велику серію робіт з експериментального остеомієліту провів Лексер (1894). Він встановив, що великі дози мікробів швидко призводять до смерті піддослідних тварин, а малі дози забезпечують успіх досвіду. Як вказують Н. Н. Анічков, М. А. Скворцов та ін., В природних умовах зараження відбувається невеликою кількістю мікробів. Лексер спочатку користувався звичайними культурами золотистого стафілококка- при цьому дивувалися суглоби і утворювалися множинні гнійники в кістках, в серцевому м`язі і нирках. Потім він застосовував старі ослаблені культури-при введенні невеликої кількості стафілококів - від 0,01 до 0,1 мл - дивувалася одна кістка. Йому вдалося отримати також остеомієліт у новонароджених кроліков- при цьому він зазначив, що у новонародженого гнійні метастази частіше локалізуються в коотном мозку. При аналогічних дослідах А. А. Хонду (1944) виникав остеомієліт або періостит.
Ставили також досліди і з введенням інфекції безпосередньо в костномозговую порожнину. Новицький, Марведель (Novicki, Manvedel) і ін., Застосовуючи цей метод, отримали осідання інфекції в метафізі кістки поблизу зони росту.
Однак далеко не всім дослідникам вдавалося викликати експериментальний остеомієліт. А. В. Генку, Фріц і Дюмон (Fritz, Dumont) і ін. Вводили мікробів прямо в костномозговую порожнину, але не мали успіху. Л. В. Орлов та Н. Есаулов в своїх експериментах не отримали остеомієліту навіть в місцях переломів. Пояснення цього дав А. В. Генку (1903), який експериментально встановив, що кістковий мозок володіє високими бактерицидними властивостями. Він вводив різні культури мікробів в вушну вену кролика і знаходив ці мікроорганізми в кістковому мозку без будь-якої реакції з його боку. Таким чином, А. В. Генку довів високу опірність кісткового мозку до інфекції. Все ж у молодих тварин відтворення остеомієліту вдавалося частіше, ніж у дорослих.
Р. Е. Ларіна та З. Г. Фрейкіна (1932) пересаджували в костномозговую порожнину стегнової кістки шматочки тканини з гнійного вогнища при остеомієліті нижньої щелепи і, незважаючи на це, остеомієліт НЕ развівался- більше того, наступало ідеальне загоєння трепанационного отвори.
Поруч авторів показано значення токсинів в патогенезі остеомієліту. Джура (Jura) готував фільтрат з білого стафілокока, а також з тифозних паличок і при введенні його внутрішньовенно або в костномозговой капав отримував запалення кістки. Фішер і Леві (Fischer і Levy), вводячи під окістя стегна невелику кількість стафілококових токсинів, викликали запалення кістки з її руйнуванням і наступним утворенням нової кістки. Однак Андрі, Джеммі (Andrey, Jemma) і ін. Оскаржують це, так як при введенні кроликам токсинів стафілокока не вийшло захворювання, схожого па остеомієліт.
Великий інтерес представляє робота С. М. Дерижанова (1937), який, сенсібілізіруяорганізм кроликів шляхом повторних ін`єкцій кінської сироватки, а потім вводячи в кістку роздільну дозу тієї ж сироватки або в суміші з культурою білого стафілококу, відтворював різноманітні форми остеомієліту, що нагадують це захворювання у людини. В одній серії його дослідів виник остеомієліт у 2 молодих кроликів з 10 внаслідок введення роздільною дози в вушну вену з одночасним поколачиванием гомілки.
Експериментальний остеомієліт методом сенсибілізації отримали також М. І. Сантоцкій (1941), X. Т. Гальнер (1959), В. А. Башіпская (1958), Л. А. Рабшювіч-Народецький (1954), Г. І. Семенченко ( 1955), Л. С. Черкасова (1955). При зараженні гноєтворним протеєм викликати остеомієліт вдалося 3. Е. Матусіс (1959) та ін. Чіпек і Немет (Csipak, Nemeth, 1958) провели 8 серій дослідів на кроликах і собаках з введенням бульонной культури стафілокока внутрішньовенно, внутрикостно, з попереднім охолодженням кістки хлоретілом . Модель остеомієліту їм вдалося отримати тільки шляхом сенсибілізації по Дерижанова.
Великим недоліком цих робіт, з нашої точки зору, є та обставина, що в них мало враховувався віковий фактор. В. А. Ядренкіна повторила досліди С. М. Дерижанова, але експериментальний остеомієліт розвинувся лише у дорослих кролів. В. І. Москвін застосував методику С. М. Дерижанова на 133 молодих кроликах і отримав експериментальний остеомієліт тільки у 3, притому в тій серії дослідів, в якій впорскування роздільною дози було вироблено в костномозговой канал. Більш того, у багатьох молодих кроликів не вдавалося отримати феномен Артюса. Мабуть, у молодих тварин реактивність організму інша, ніж у дорослих. На думку Т. Н. Могильницького, у 30% кроликів алергічної реакції не буває-ще рідше спостерігається ця реакція у молодих тварин. Марфана і Опперт вважають, що алергічні прояви при введенні лікувальних сироваток бувають тим сильніше і зустрічаються тим частіше, чим старше організм. Зокрема, у дітей до півроку алергічні прояви відзначаються в 4% всіх випадків застосування сироватки, потім з віком частота їх поступово наростає, досягаючи у дорослих 40%. Молль вказує, що новонароджені кролики абсолютно не чутливі до чужорідного білка, а чутливість розвивається у них з віком (цит. Але М. А. Скворцова).
Експериментуючи на молодих кролях, ми отримали позитивні результати і без попередньої сенсибілізації, застосовуючи ослаблену культуру золотистого стафілокока, але тільки в окремих випадках.
Іншу методику (застосували Вівер, Тайлер (Weaver, Tyler, і ін., 1943). Вони виділили культуру гемолітичного стафілокока з гною хлопчика 7 років, хворого на остеомієліт, і упорскували 0,02 мл цієї свіжої добової культури кроликам внутрішньовенно. Для того щоб зменшити смертність серед піддослідних кроликів, застосовували лікування сульфідину, переливання крові, введення сироватки. З 205 кроликів остеомієліт отриманий у 80 (39%) - переважно хворіли молоді кролики - у віці 6-8 тижнів.
Шимон з співавторами (Sheman, 1943) також виділив золотистого стафілокока з гною дитини, хворої на остеоміелітом- культуру не послабляти, але перед ін`єкцією розводили. Щоб продовжити життя кроликів, їх попередньо імунізували протягом тижня, потім на початку досліду вводили в метафиз великогомілкової кістки морруат натрію (натрона мило жирних кислот риб`ячого жиру), а через півгодини культуру стафілокока, після чого розвивався остеомієліт. Деяким кроликам стафілококів вводили внутрівенно- у них також виникав остеомієліт в тій великогомілкової кістки, куди упорскували морруат натрію. Без попередньої імунізації велика частина кроликів загинула. Морруат натрію викликає незначний некроз окремих перекладин губчастої речовини і тому тут переважно осідає інфекція. С. А. Кац (1954) і М. Р. Нечаєвський (1955) після сенсибілізації ін`єктували тваринам внутрикостно анаеробних бактерій в суміші з хлористим кальцієм і отримували остеомієліт. Вони вважають, що не тільки сенсибілізація, а й виникнення вогнищ некрозу створюють умови для розмноження анаеробів. І. Москвін (1960) повторив досліди з попереднім введенням в костномозговой канал різних подразнюючих речовин з тим, щоб викликати некробиотические процеси і отримати більш сприятливі умови для осідання і розвитку вводиться в кістку рідкої культури живих мікробних тіл. При цьому в серіях з попередньої ін`єкцією в кістку 10% розчину хлористого кальцію експериментальний остеомієліт був отриманий тільки у 7 кроликів з 43, при введенні кухонної солі - у 3 кроликів з 22, гексеналу - у 1 кролика з 12. Малоефективними виявилися і досліди з введенням подразнюючих речовин сенсибілізованим кроликам.
Модель експериментального остеомієліту вдалося отримати при методі розведення сухої культури спеціально виділеного штаму гемолитического золотистого стафілокока в стерильному ланолине як основі. Цю масу, підігріту до температури 40-42 ° (температура плавлення ланоліну), вводили молодим кроликам в кількості 0,1-0,2 мл в костномозговую порожнину стегнової і великогомілкової (кісток. Загальна кількість введених мікробних тіл становило 100-250 млн. В 1 мл. Ці досліди проводилися як з попередньою сенсибілізацією, так і без неї. При цьому методі мікробні тіла депонуються в кістки, звідки поступово надходять в загальний кров`яне русло, не викликаючи генералізації інфекції і ранньої смерті тварин.
Екке з співавторами (Беке, 1960) вводив культуру стафілокока в різних розведеннях в фізіологічному розчині кухонної солі шляхом розрізу м`яких тканин і пункції оголеною кістки. Після вилучення голки отвір в кістки закривали воском, рану зашивали. При цій методиці у кроликів розвивався остеомієліт з секвестрацією. При залишенні пункционного отвори відкритим введена в кістку суспензія витікала назад в м`які тканини, і розвивалася тільки флегмона м`яких тканин. При введенні нерозбавлених культур кролики гинули від сепсису. Н. Праведників (1960) вводив в дефект кістки подрібнений реберний хрящ в суміші з культурою стафілокока і отримував хронічний остеомієліт.
Недоліком цих висновків є те, що остеомієліт при них був викликаний не гематогенним шляхом, а екзогенних, травматичним - введенням збудника інфекції безпосередньо в кістку.
