Лабораторна діагностика - довідник лікаря-фтизіатра

1. ЛАБОРАТОРНА ДІАГНОСТИКА

А. Бактеріоскопічні методи дослідження на туберкульоз
Для виявлення мікобактерій туберкульозу застосовують дослідження різного матеріалу: харкотиння, слизу з гортані, промивних вод шлунка, промивних вод бронхів. Для дослідження застосовують бактеріоскопію мазків, метод люмінесцентної мікроскопії.
ЗАГАЛЬНІ властивості мокротиння ТА ЇЇ мікроскопічного дослідження. Доставлена в лабораторію харкотиння (зібрана в чисту суху посуд вранці натщесерце) піддається спочатку макроскопическому вивчення. Це дослідження зводиться до визначення загальних властивостей мокротиння, т. Е. Визначають її кількість, запах, колір, консистенцію і характер. Кількість мокротиння на добу при різних легеневих захворюваннях може коливатися від 1-2 мл до 1-2 л. Свіжа мокротиння зазвичай позбавлена запаху, але при гнильному бронхіті, бронхоектазах вона може мати гнильний запах. Колір мокротиння залежить від її складу і від випадкових домішок (їжі, лікарських речовин і ін.). Вона буває білувато-сірої (переважає слиз), жовтувато-сірого (слизу і гною міститься порівну), зеленувато-жовтої (при наявності великої кількості гною), криваво-червоною (при виділенні крові). В останньому випадку мікобактерії туберкульозу при дослідженні мокротиння виявляються рідко, так як в такий мокроті гною зазвичай зовсім не буває або він міститься в дуже поганому кількості. Остання обставина необхідно враховувати, так як мікобактерії туберкульозу розташовуються переважно серед лейкоцитів. Кров в мокроті може зустрічатися у вигляді як окремих прожилок червоного або бурого кольору, так і острівців.
За характером мокротиння буває слизова, з грудочками гною, слизисто-гнійна, гнійна і кровянистая. Визначити характер мокротиння повинен мікроскопісту, зіставляючи мікроскопічну картину мокротиння з її зовнішнім виглядом.
При описі мокротиння прийнято відзначати в протоколі на першому місці ті елементи, які в ній переважають: 1) якщо мокрота рідка і складається з гнійних клітин, вона має «гнійний характер» - 2) якщо в мокроті переважає гній, але до нього наточити лише трохи слизу - «характер гнійно-слизовий» - 3) якщо кількість слизу і гною приблизно однаково - «характер слизисто-гнійний» - 4) нарешті, якщо гною не видно навіть під мікроскопом, характер відзначають як «слизовий» - 5) якщо мокрота складається тільки з крові - «кров`янистий» - 6) якщо переважає кров, але є слиз і гній - «кров`янисті-слизисто-гнійний».
Консистенція мокротиння може бути рідкою, напіврідкої, вузький і густий. При огляді мокротиння неозброєним оком можна виявити:

1. фібринозні зліпки, що мають форму і величину в залежності від форми і величини бронхів, в просвіті яких вони утворюються, ці утворення мають червонуватий або білуватий колір, щільні, важко разделяются- опущені в судину з водою, вони після струшування в воді виявляють деревоподібна строеніе- фібринозні зліпки складаються з слизу і фібрину;
2. шматочки тканини новоутворення, які можуть бути виявлені в мокроті у разі прохідності їх через бронх- ці шматочки можуть перебувати в слизовій, гнійно-слизової і слізістокровяністой мокроті і можуть бути виявлені в мокроті іноді раніше, ніж пухлина буде діагностовано клінічно і рентгенологічно;
3. сочевиці або лінзи - жовтувато-білуваті утворення величиною з шпилькову головку- сочевиці є шматочки омертвілої легеневої тканини, вони складаються з детриту, еластичних волокон і мікобактерій туберкульозу;
4. пробки Дітріха і подібні з ними пробки з мигдалин - білуваті і жовтуваті зернятка м`якої консістенціі- пробки Дітріха зустрічаються в мокроті при гнильному бронхіті, бронхоектазах, гангрени легкого. Під мікроскопом в них виявляються різні бактерії, кристали жирних кислот, краплі жиру і різні грибки;
5. друзи актиномикоза - дрібні плотноватие зернятка, що нагадують зерна манної крупи, погано розчавлюють і розташовані в гнійних ділянках мокроти- в нативному препараті вони представляють собою округлі освіти жовтого кольору-за великого збільшення центральна частина цих утворень складається з густого сплетення тонких гіллястих ниток міцелія- по периферії міцелій оточений колбовідних вздутіямі- при фарбуванні за Грамом нитки міцелію фарбуються грампозитивної, а колби - в рожевий колір;
6. бульбашки ехінокока - сірувато-білі або жовтого кольору.

Мікроскопічне дослідження мокротиння полягає у вивченні під мікроскопом її нативного препарату. З цією метою вміст баночки або плювальниці переливають в чашку Петрі, яку поміщають на темному тлі. При відсутності чашок Петрі можна користуватися скляними блюдцями або будь-якій плоскій скляним посудом (НЕ порцелянової). Користуючись невеликими добре загостреними для кожної мокротиння окремими дерев`яними паличками довжиною 20-22 см, відбирають на предметне скло невеликі гнійні грудочки мокротиння з 5-6 різних її ділянок, покривають їх покривне скло і готують таким чином нативний препарат. Нативний препарат розглядають спочатку при малому, а потім при великому збільшенні мікроскопа. Дослідження нативного препарату дає можливість виявити не тільки клітинні елементи (лейкоцити, еритроцити, клітини плоского або миготливого епітелію, альвеолярні та пилові клітини), а й еластичні волокна, кристали холестерину, гаки та мембрани ехінокока, друзи актиномикоза, рослинних і тваринних паразитів, як, наприклад, личинки стронгилоидоза, мігруючих аскарид (для яких легке є етапом в міграції і розвитку паразита).
Альвеолярні клітини, або, краще сказати, альвеолярнімакрофаги, являють собою великі клітини з порівняно невеликим ядром. При фарбуванні за Романовським ядро блідо фарбується, хроматин в ньому рівномірно розподілений, протоплазма представляється блідо-блакитний.
При вітальної забарвленні живих нефіксованих клітин по Себін - Шмельову альвеолярнімакрофаги інтенсивно захоплюють нейтральну червону. Протоплазма цих клітин виявляється засіяної дрібними вакуолями оранжевого кольору. Колір вакуолей, їх величина і розташування відрізняють альвеолярнімакрофаги як від моноцитів крові з їх невеликим плямою дрібних вакуолей рожевого кольору, розташованих в поглибленні ядра, так і від сполучнотканинних макрофагів (гістіоцитів), у яких вакуолі вельми варіюють за величиною і кількістю, а також по відтінкам фарби (від жовтого до темно-червоного кольору).
Нерідко протоплазма альвеолярнихмакрофагів вже при розгляданні під мікроскопом нативних нефарбованих препаратів мокротиння представляється вакуолизированной. Ці вакуолі дегенерації не захоплював вітальної фарби, їх слід відрізняти від вакуоль фагоцитозу.
Альвеолярнімакрофаги зазвичай зустрічаються в слизовій мокроті, в початкових фазах запалення. Часто вони містять різні пилові включення (коричнево-чорного кольору). При пороках серця, застої в крові в малому колі ці клітини містять пігмент гемосидерин (дериват кров`яного пігменту) - так звані клітини серцевих вад. На відміну від пилових клітин вони містять залізо і дають позитивну реакцію з берлінською лазур`ю. Реакція на берлінську блакить проводиться таким чином: на предметне скло кладуть частку свіжої мокротиння, доливають туди 1-2 краплі 1-2% розчину соляної кислоти і через кілька секунд додають стільки ж крапель 2-5% розчину жовтої кров`яної солі-змішують і покривають покривним склом Через 5-10 хвилин зернятка фарбуються в синій колір.
При дослідженні свіжих препаратів мокротиння особливу увагу слід звернути на наявність еластичних волокон, присутність яких вказує на руйнування легеневої тканини. Еластичні волокна зустрічаються в мокроті при туберкульозі, гангрени легкого, абсцесах, новоутвореннях легкого і запальних процесах.
Еластичні волокна зустрічаються трьох типів:

Відео: «Сучасні лікарські препарати в репродукції» Кадочникова Е. А. в ВЦ Зоовет

1. Незмінені, серед яких розрізняють волокна зі збереженням альвеолярного будови, з частковим збереженням його і без збереження. Незмінені еластичні волокна виділяються у вигляді невеликих або більших пучків і являють собою блискучі двоконтурні нитки зі злегка загостреними кінцями, гіллясті, іноді густо переплетені, місцями повторюють форму альвеол. Цей тип волокон зустрічається зазвичай у хворих при свіжому розпаду легеневої тканини, обумовленому найчастіше туберкульозом, але іноді і іншими легеневими захворюваннями (гангрена легкого, абсцес і т. П.).
2. Коралоподібні, або волокна Коппен - Джонса. Останні при малому збільшенні мікроскопа є грубі неблискучі освіти, частіше темного кольору. При великому збільшенні мікроскопа виявляється, що коралоподібні волокна складаються з грубих волокон, покритих краплями жиру. Відкладення з жиру як ніби нанизані на волокна і надають останнім вид кораллов- волокна часто нагадують вид сухих гілок дерева. Такий тип волокон зустрічається в мокроті у хворих зі старим кавернозним процесом.
3. Звапнілі волокна мають вигляд невеликих пучків, що складаються з грубуватих волокон, просочених солями вапна. У зв`язку з останньою обставиною вони стають ламкими і розпадаються на окремі фрагменти. Якщо в нативному препараті, крім звапніння волокон, знаходять солі вапна, кристали холестерину, а в забарвленому препараті - туберкульозні мікобактерії часто у вигляді осколків, то наявність цих чотирьох елементів в мокроті, які отримали в сукупності назву тетради Ерліха, вказує на загострення в зоні старого петрифіковане туберкульозного вогнища.

При мікроскопічному дослідженні мокротиння слід звертати увагу на присутність грибкових мікроорганізмів. Для цього досліджують нативні препарати мокротиння, в якій можуть зустрічатися дріжджові клітини і їх скупчення і нитки міцелію.
Дріжджові захворювання обумовлюються дрожжеподобним грибком роду Candida. Діагностика цих захворювань представляє певні труднощі. Поразки виникають на слизових оболонках порожнини рота, гортані, піхви, сечовивідних шляхів, а також шкіри і внутрішніх органів (легень, нирках, печінці та ін.). Поразки виникають головним чином при тривалому лікуванні антибіотиками і іноді відзначаються у хворих на туберкульоз.
Дріжджоподібні грибки роду Candida виявляються найчастіше в мокроті, рідше в нальотах, взятих зі слизових оболонок порожнини рота, гортані, прямої кишки, і в сечі. Визначення їх виробляється шляхом посіву мокротиння, сечі та інших виділень на середовище Сабуро.
За даними різних авторів, зустрічаються різні види кандидамиозом: Candida tropicalis, Candida albicans. - Останні відомі під неправильним і застарілим назвою збудника молочниці. Грибкові захворювання в деяких випадках можуть призводити до смертельного результату.
Поряд з дослідженням нативних препаратів в ряді випадків для клініки має значення і цитологічне дослідження мокротиння. Це дослідження проводять зазвичай при підозрі на новоутворення легені. Для дослідження вибирають слизові ділянки мокротиння сіруватого кольору, що нагадують великі бактеріальні колонії, а також прожилки крові. З вибраного матеріалу дерев`яною паличкою обережно (круговими рухами) готують мазки, які після висушування на повітрі забарвлюють по гематологической методикою. А. Я. Альтгаузена рекомендує шукати пухлинні клітини в нативних препаратах, вважаючи, що вони ясно виділяються своєю величиною і великими ядрами серед нормальних елементів мокротиння. Цитологічне дослідження препаратів мокроти в забарвлених мазках слід проводити спочатку малим збільшенням мікроскопа, з тим щоб не пропустити клітини новоутворення, нерідко розташовані в мазках у вигляді поодиноких конгломератів, а потім для більш детального вивчення структури клітини користуватися иммерсионной системою.
Бактеріоскопічне дослідження мокротиння.
Для визначення бактерійної флори мокротиння користуються пофарбованими препаратами. Для цього на предметне скло вибирають дерев`яними паличками гнійні грудочки мокротиння і розтирають їх між двома стеклами, готуючи таким чином мазки. Мазки не повинні бути ні занадто товстими, ні дуже тонкими. Потім висушені на повітрі препарати фіксують на полум`ї пальника (триразовим проведенням через полум`я). Таких препаратів готують 2-3. Один з них використовують для фарбування на мікобактерії туберкульозу, інший - для забарвлення по Граму. В останньому випадку в мазку можна знайти грампозитивні пневмококи - збудники пневмонії, діплобацілли Фрідлеідера грамнегативні, оточені капсулою, палички інфлюенци, Пфейффера і інші мікроорганізми, які є виразом змішаної інфекції - стрептокок, стафілокок, катаральний мікрокок і всілякі спірохети.
Одним з найбільш надійних способів забарвлення мікобактерій туберкульозу є спосіб Циля - Нільсена. На фіксований мазок наливають основний фуксин Ціля і підігрівають препарат до появи парів. Після охолодження мазка фарбу зливають і мазок обмивають водою, потім мазок знебарвлюють, наливаючи на скло 10-15% сірчану кислоту або 3% солянокислий спирт до появи блідо-рожевого кольору, після чого мазок знову змивають водою, потім препарат дофарбовують 0,5% о розчином метиленового синього, наливаючи розчин на півхвилини. Після синьки препарат обмивають водою, просушують на повітрі і піддають бактеріоскопії. При цій забарвленням мікобактерії туберкульозу фарбуються в червоний колір. Бактеріоскопічне дослідження полягає в мікроскопірованіі пофарбованого препарату. На пофарбований і висушений мазок кладуть краплю кедрової олії. Мікроскопіровать починають з лівого верхнього кута, йдучи зверху вниз, потім знову піднімаються вгору і т. Д., Проходячи всі поля зору до кінця препарату. Туберкульозні мікобактерії найчастіше розташовуються під кутом один до одного, серед лейкоцитів або всередині них у вигляді тонких прямих, іноді злегка вигнутих, витончених червоних паличок з розміром зерна або без неї. Вирізняються вони зазвичай рівномірно на всьому протязі в яскраво-червоний колір (відтінок кольору артеріальної крові).
З огляду на те що широке застосування антибіотиків і хіміопрепаратів змінює морфологію мікобактерій туберкульозу, в ряді випадків при дослідженні препаратів можуть виявлятися і гіллясті форми нерівномірного величини і блідо пофарбовані. Застосування антибіотиків і хіміопрепаратів нерідко сприяє припиненню виділення мікобактерій. За даними вітчизняних і зарубіжних авторів, зникнення мікобактерій туберкульозу в мокроті спостерігається в 30-80% випадків через 3-6 місяців після лікування. При кавернозних формах туберкульозу це явище носить нестійкий характер і туберкульозні мікобактерії знову починають визначатися в мокроті.
При бактеріоскопічному дослідженні на туберкульоз слід звертати увагу на можливу присутність в препараті кислотостійких сапрофітів, які можуть дати привід для помилкового змішання їх з туберкульозними мікобактеріями. Кислотостійкі сапрофіти, потрапляючи з їжею в організм людини, можуть бути виділені з мокротиння шлункового вмісту. Особливо часто вони відзначаються в мокроті у хворих, які страждають на різні нетуберкульозні захворюваннями легенів - хронічний рецидивний бронхіт, новоутвореннями легкого, інтерстиціальної пневмонією, абсцесами легкого и др крім цього, кислотостійкі сапрофіти можуть в окремих випадках мешкати в вушній сірці, носовій слизу, смегма.
Кислотостійкі сапрофіти відрізняються від туберкульозних мікобактерій за такими ознаками:

Відео: Лікар апі-гірудотерапевт Шишова Ольга Іванівна

1. морфологія: кислотостійкі сапрофіти зазвичай більш товсті, грубі, рідко зернисті на відміну від тонких, витончених часто зернистих туберкульозних мікобактерій- крім того, вони відрізняються великим поліморфізмом- в одному і тому ж препараті зустрічаються довгі і короткі, товсті і тонкі палички, іноді зі здуттям на кінцях, загострені або веретеноподібні;
2. забарвлення: кислотостійкі сапрофіти часто бувають нерівномірно окрашени- поряд з яскраво забарвленими зустрічаються дуже бліді екземпляри, а іноді спостерігаються палички, пофарбовані на двох полюсах по-разному- відтінок забарвлення кислотостійких сапрофітів інший, ніж у туберкульозних мікобактерій: бурий або, навпаки, рожевий на відміну від яскраво-червоних туберкульозних.
3. розташування на препараті мазка: кислотостійкі сапрофіти зазвичай розташовуються в слизу і серед клітин плоского або миготливого епітелію, іноді на червоній підкладці, в той час як туберкульозні мікобактерії найчастіше розташовуються серед лейкоцітов- характерно також їх гіллясте розташування.

Виявлення в мокроті мікобактерій з зазначеними вище тинкторіальних і морфологічними особливостями змушує перевірити їх спиртостійкі шляхом повторного знебарвлення пофарбованого за Цілем - Нільсеном мазка чистим спиртом протягом 18-20 хвилин і додаткової забарвленням 0,5% розчином метиленової синьки. Туберкульозні мікобактерії, що володіють, крім кислотоустойчивости, і спиртостійкі, після додаткового знебарвлення спиртом залишаються червоними. Якщо червоні при фарбуванні за Цілем - Нільсеном мікобактерії після перефарбовування втрачають свій первісний колір і перетворюються в сині палички, це свідчить про те, що вони кислотостійких, але спіртоподатліви, т. Е. Нетуберкульозні. Однак, як показують літературні дані, ця ознака не цілком надійний і в ряді випадків може послужити приводом до помилкового лабораторному висновку,
Для диференціювання туберкульозних мікобактерій від кислотостійких сапрофітів останнім часом застосовується спосіб додаткової обробки препаратів жавелевой водою, запропонований Jl. Е. Скрябіній. Для цього з мазка, пофарбованого за Цілем - Нільсеном, після його микроскопирования в разі наявності кислототривких паличок, сумнівних щодо їх туберкульозної природи, обережно стирають іммерсійне масло і на мазок наливають на 45 хвилин 0,01% розчин гіпохлориту калію. Мазки микроскопируют без додаткової забарвлення, якої в даному випадку не потрібно, так як препарати після обробки цим розчином не втрачають синього кольору, а формені елементи при цьому залишаються незмінними. Наявні у препараті кислототривкі сапрофіти протягом 45 хвилин повністю знебарвлюються.
При обробці 0,01% розчином гіпохлориту калію препарати не змиваються, а туберкульозні мікобактерії НЕ знебарвлюються.
Ще одне джерело помилок при бактеріоскопічному дослідженні мокротиння є предметні скельця, які використовуються багато разів для розмазування мазків і мають більшу або меншу кількість дрібних тріщин. У цих тріщинах можуть застрягти дуже дрібні частинки мокротиння з туберкульозними мікобактеріями. При повторному використанні цих стекол без достатньої механічної очистки застрягли в тріщинах мікобактерії можуть бути помилково приписані іншому хворому. Кип`ятіння стекол не запобігає зазначеної можливості помилок, так як убиті кип`ятінням мікобактерії не втрачають здатності забарвлюватися. Зважаючи на це при дослідженні матеріалу на туберкульоз необхідно користуватися тільки предметними стеклами, які не мають будь-яких тріщин і подряпин.
У випадках негативного результату бактеріоскопічного дослідження мазка слід застосовувати способи збагачення мокротиння, зокрема способи Кагана, Петрова, Бідерта. В основу їх покладено принцип гомогенізації мокротиння і концентрації мікобактерій туберкульозу в невеликому обсязі. Незважаючи на наявні в літературі вказівки, що застосування методів накопичення підвищує відсоток позитивних знахідок, на практиці вони застосовуються досить рідко. Добутий незадовільний результат залежить, по-видимому, від часткового розчинення мікобактерій туберкульозу в антиформін, зменшення здатності туберкульозних мікобактерій до фарбування і неповного осідання при нерідко застосовується центрифугировании.
Методом флотації. Найбільш ефективним методом збагачення є метод флотації. Цей метод заснований на тому, що при струшуванні двох рідин з різною питомою вагою речовина з більш легким питомою вагою в силу фізичного закону піднімається догори і захоплює за собою туберкульозні мікобактерії, що знаходяться в підвішеному стані в рідині. Таким чином, туберкульозні мікобактерії «спливають» на поверхню. Методом флотації може бути оброблений будь-який патологічний матеріал.
Для дослідження методом флотації мокроту збирають протягом I-3 днів (за умови якщо хворий виділяє її дуже мало).
Зібрану мокроту в кількості від I до 10-15 мл (максимум) переливають в пляшку або колбу ємністю в 250 мл, куди додають на око 0,5% їдкий натр або калій в кількості, яка дорівнює кількості мокротиння, і протягом 5-10 хвилин ретельно струшують для розчинення грудочок гноя- ставити колбу на водяну баню після додавання лугу не обов`язково, так як мокрота добре гомогенізується і без підігрівання. Після цього до гомогенізований матеріалу додають приблизно 100 мл дистильованої води і 0,5 мл ксилолу або бензину. Весь вміст пляшки знову ретельно струшують 5-10 хвилин, потім знову доливають дистильовану воду до шийки пляшки. Останню з вмістом залишають стояти при кімнатній температурі на 30-20 хвилин. Після стояння на поверхні рідини утворюється вершковоподібна кільце. Стерильною піпеткою відсмоктують частина утворився у шийки пляшки білого кільця і наносять на два предметних скла, заздалегідь розкладених на великому склі, що покриває нагріту до 70-80 градусів водяну баню. На підсушений мазок наносять ще раз кілька крапель з кільця. Таке нашарування виробляють в загальному 5-6 разів, причому кожну краплю висушують до нанесення наступного. Мазки залишають до повного висихання на підігрітому склі, що покриває водяну баню, де їх фіксують. Потім мазки знежирюють ефіром і піддають окраске- основний фуксії Циля наливають на предметні скельця, які перебувають на водяній бані, на 10 хвилин-потім скла з мазками промивають водопровідною водою і заливають кожне окремо 3% солянокислим алкоголем до повного знебарвлення. Потім мазки знову промиваються водопровідною водою і дофарбовують 0,25% ц водним розчином пікринової кислоти або 0,5% о розчином метиленової синьки. Знову промивають водопровідною водою, висушують на повітрі і мікроскопують.
У ряді лабораторій для виявлення мікобактерій туберкульозу застосовують метод седиментації (осадження) мокротиння замість флотації. З цією метою при обробці мокротиння використовують не толуол або бензин, а хлороформ (в тій же кількості), який в силу своєї тяжкості, падаючи на дно, захоплює за собою мікобактерії туберкульозу. Слід зазначити, що при обробці мокротиння методом седиментації препарати мають більш забруднений вигляд, особливо при дослідженні промивних вод шлунка. Тому краще користуватися методом флотації.
При дослідженні патологічного матеріалу на туберкульозні мікобактерії методом флотації слід дотримуватися ряду технічних деталей, щоб уникнути можливих помилок. Одним з таких джерел лабораторних помилок може з`явитися недостатня механічна очистка посуду, зондів, гумових пробок, піпеток і ін. Тому використовувана посуд повинна піддаватися дуже ретельній обробці.
МЕТОД люмінесцентної мікроскопії. Явище люмінесценції засновано на різній світіння мікроскопіруемого об`єкта під впливом ультрафіолетового або короткохвильового видимого світла. Люмінесцентний метод дає можливість виявити мікобактерії туберкульозу в значно більшому відсотку випадків, ніж метод прямої бактеріоскопії мазків, забарвлених за Цілем-Нільсеном (на 9-10%). Для люмінесцентної мікроскопії застосовується наступна методика. Препарати мазків з досліджуваної мокротою фіксують на полум`ї пальника і забарвлюють сумішшю ауроміном з родаміном: ауроміном готують в співвідношенні 1 г на 2000 мл дистильованої води. До цієї кількості додають 0,1 г родаміну. Фарбу наливають на 15 хвилин. Потім мазки знебарвлюють 3% солянокислим спиртом (дворазовою обробкою по півхвилини) і ретельно змивають водою. З метою гасіння стороннього матеріалу дофарбовують водним розчином кислого фуксину в розведенні I- 1000 протягом Vs хвилини. Далі препарат висушують на повітрі і мікроскопують з малим збільшенням. Перед микроскопированием слід обов`язково покласти на конденсор мікроскопа I-2 краплі дистильованої води. Як освітлювача для мікроскопії використовують комплект ОІ 18 з ртутнокварцевой лампою СВД 120 А і мікроскоп МБІ-i. Звичайний конденсор в мікроскопі замінюють конденсором темного поля. При фарбуванні препарату сумішшю ауроміном з родаміном мікобактерії туберкульозу дають золотисто-жовте світіння.
Люмінесцентний метод в діагностиці туберкульозу проходить період випробувань, тому в оцінці його немає єдиної думки. Основна причина розбіжностей пов`язана з тим, що не знайдено методика, що дозволяє диференціювати мікобактерії туберкульозу від кислотостійких сапрофітів.
ДОСЛІДЖЕННЯ промивних вод шлунка. Особливо широке поширення цей спосіб отримав в клініці туберкульозу у дітей, де він використовується не тільки для підтвердження бактеріовиділення (так як відомо, що велика частина дітей, які страждають на туберкульоз легень, заковтує мокроту), але і з метою ранньої діагностики туберкульозу у дітей.
Дослідження промивних вод шлунка застосовується також у дорослих для виявлення мізерної виделяемості бактерій (олігобаціллярності). Накопичився великий літературний матеріал з цього питання показує, що метод промивних вод шлунка є великою підмогою для клініциста в розпізнаванні малих форм легеневого туберкульозу, при диференціальної діагностики та визначення ступеня активності туберкульозного процесу.
Мікобактерії туберкульозу потрапляють в шлунок головним чином при ковтанні містить їх мокротиння. Вони можуть мати своїм джерелом свіжі, знову виникли осередки в легкому, ще не доступні рентгенологічного методу, незагоєні або не повністю загоєні вогнища і старі звапніння вогнища. Останні можуть бути активізовані різними неспецифічними запальними гнійних процесах, які, викликаючи місцеві деструктивні зміни, можуть вести до руйнування капсули навколо затихлі вогнищ і тим самим сприяти виходженню мікобактерій туберкульозу з цих вогнищ з подальшим попаданням їх в бронхи, а потім в шлунковий вміст.
Дослідження промивних вод шлунка методом флотації проводиться таким чином. Хворому вранці натщесерце дають випити 200 мл дистильованої води, після цього відразу за допомогою товстого зонда рідина витягають зі шлунка в стерильний склянку. Перед обробкою отриманий матеріал переливають в колбу ємністю в 250-300 мл і доливають до нього 2-3 мл 0,5% розчину їдкого натру. Суміш струшують протягом 5 хвилин, додають до неї 1-2 мл ксилолу або бензину і знову струшують 5-10 хвилин (дистильовану воду при обробці промивних вод шлунка додавати не потрібно). Потім колбу з вмістом залишають стояти протягом 30 хвилин при кімнатній температурі. Утворене у горлечка колби вершковоподібна кільце обробляють надалі за тією ж методикою, як і мокроту.
При дослідженні промивних вод шлунка методом флотації позитивну відповідь дають в тому випадку, якщо в препараті відзначається не менше 5-7 типових туберкульозних бактерій. У випадках меншої кількості їх дослідження необхідно повторити. У клініці має значення тільки повторне виявлення туберкульозних мікобактерій в промивних водах шлунка.
ДОСЛІДЖЕННЯ промивних вод БРОНХІВ (ПО Я. С. Зобін). Метод полягає в тому, що шляхом вливання в бронхи фізіологічного розчину, нагрітого до температури не нижче 37 °, змивають вміст бронхів. Для цього хворому вранці натщесерце зрошують через пульверизатор 2 мл 1% розчину дикаїну мову, слизову оболонку піднебінних дужок, глотки і грушовидних ямок. Через 2 3 хвилини в гортань вливають горловим шприцом 1-2 мл 2% розчину дикаїну. Зачекавши настання анестезії (2-3 хвилини), кладуть хворого на бік, відповідний досліджуваного легкому, і повільно вливають горловим шприцом на середину підстави мови фізіологічний розчин в кількості 10-20 мл. Розчин стікає з підстави мови по боковій стінці глотки в гортань і надходить в головний бронх досліджуваного легкого. Під час вливання сольового розчину необхідно тримати висунутий язик хворого марлевою серветкою, щоб перешкоджати проковтування розчину. Щоб уникнути болю від натиску на вуздечку язика останню змащують розчином дикаїну. Про попадання розчину в бронхи легкого дізнаються по появі зміненого дихання і хрипів, що викликаються влити розчином. Положення хворого на боці сприяє потраплянню розчину в потрібний бронх Вливання розчину хлористого натрію кімнатної температури викликає подразнення слизової бронхів, завдяки чому настає посилене відділення слизу і кашель. Хворий відкашлює розчин разом зі слизом з глибоких дихальних шляхів в стерильний стаканчик.
Протипоказанням для промивання бронхів є недавно перенесене захворювання серця і судин, серцева декомпенсація і бронхіальна астма.
Метод дослідження промивних вод бронхів представляє велику діагностичну цінність для виявлення мікобактерій туберкульозу у хворих, які не виділяють слиз.