Виявлення пухлинних маркерів в крові та інших біологічних рідинах - загальна онкологія

За дуже рідкісним винятком імунна система хворих толерантна до тих сполук, про які піде мова нижче. Тому вони виступають як антигени тільки при введенні експериментальним тваринам для отримання антитіл і в діагностичних імунологічних реакціях. Зрозуміло, що кожне антигенно-активна сполука виконує в організмі певні функції (гормональні, ферментативні, транспортні та ін., В ряді випадків невідомі), але їх розгляд не входить в завдання даного розділу.
Початком клінічної иммунодиагностики в онкології слід вважати відкриття Г. І. Абелеві і співавт. (1963) в сироватці мишей з перевитої гепатомой білка, синтезованого в великій кількості в ембріогенезі і виявляється у дорослих особин лише в невеликій кількості. Рік по тому Ю. С. Татаринов встановив наявність аналогічного білка в крові хворого на первинний рак печінки, вперше показавши клінічну значимість тесту. У 1965 р P. Gold і S. Feedman виявили, що в пухлинної тканини хворих на рак товстої кишки присутній глікопротеїн, який назвали Раковоембріональний, характерний для ембріонального кишечника і синтезується в незначних кількостях епітелієм кишки дорослих осіб. Подібний антиген, який був присутній в екстрактах ембріональної кишки і пухлинах цієї локалізації у людини, був виявлений також В. Я. Рогальський (1964). Ці відкриття започаткували новий напрям в онкології, а такі речовини отримали назву онкофетальні антигенів. До теперішнього часу із з`єднань цього ряду в пухлинах знайдено ще не менше 10 ембріоспеціфіческіх антигенів [Embryonic antigens in cancer, 1980]. В основі їх застосування для иммунодиагностики пухлин лежить наявність в малігнізованих клітинах, крові, асцитичної рідини, сечі підвищених концентрацій речовин, характерних для певного етапу ембріонального розвитку.
Серед інших з`єднань, що циркулюють в кровотоці онкологічних хворих і використовуваних для иммунодиагностики, слід назвати гормони: гіпофізарні, хоріонічний гонадотропін, плацентарний лактоген, пролактин, інсулін, паратгормон і тиреокальцитонин. У цьому випадку, якщо мова не йде про новоутвореннях ендокринних органів, діагностика заснована на тому, що пухлин нерідко властивий так званий ектопічний синтез гормонів, які присутні при цьому в крові або в сечі хворих в значно більших концентраціях, ніж у здорових осіб. У сироватці крові хворих можуть бути присутніми також в підвищеної концентрації такі білки, як феритин, казеїн тощо., Що синтезуються і нормальними клітинами. З названих сполук найбільшу практичну цінність мають а-фетопротеїн (АФП), раковоембріональний антиген (РЕА) і хоріонічний гонадотропін (ХГ), трофобластичний в-глобулін.
а-фетопротеїну - а-глобулін з відносною молекулярною масою близько 70000 - синтезується в епітелії жовтковиммішка і ембріональних гепатоцитах. Його концентрація в сироватці плода і амніотичної рідини досягає 3 г / л до 12-14 тижнів. внутрішньоутробного розвитку, знижуючись до моменту народження до 50 мг / л сироватки. У здорових осіб, за винятком вагітних жінок, його зміст не перевищує 5 - 25 мкг / л сироватки. Незначне підвищення цього рівня у дорослих вказує, як правило, на регенераторні процеси в печінці, що супроводжує вірусний гепатит або цірроз- зазвичай це спостерігається у 10-20% хворих. У дітей 1-го року життя практично при будь-якому захворюванні спостерігається підвищення АФП в крові. З інших захворювань непухлинної природи, супроводжуваних підвищенням вмісту АФП в крові, слід назвати вроджену Тирозинемія і атаксіютелеангіектазію.
Виражений і стійкий підйом концентрації АФП в крові дорослих людей найчастіше зустрічається при гепатоцелюлярному раку і зародкових тератокарциномах яєчка і яєчників, значно рідше - при метастатичних ураженнях печінки. Рівень АФП у хворих гепатоцелюлярний рак може перевищувати фоновий в декілька сотень і навіть тисяч разів, частіше вагаючись від 40 мкг / л до 3 мг / л. Залежно від чутливості методу визначення кількість АФП-позитивних раків печінки становить серед дорослих 45 - 80%, а серед дітей - 60 - 95%. Практично в 100% випадків АФП присутній в концентрації понад 1 мг / л у дітей з гепатобластома ембріонального типу.
Є генетична схильність до експресії синтезу АФП. Так, жителі тих районів Азії та Африки, де частота первинного раку печінки вище, ніж у європейців, до 90% випадків є АФП-позитивними. Нерідко підвищена концентрація АФП визначається в сироватці практично здорових мешканців «ендемічних» по даному захворюванню ареалів [Purves L. et al., 1973].
Зазвичай чіткої кореляції між концентрацією АФП в крові хворих гепатоцелюлярний рак, розмірами пухлини, гістологічної структурою і стадією захворювання немає. Кілька частіше маркер синтезується в високих концентраціях клітинами помірно диференційованих гепатит.
Підвищена концентрація АФП в крові може на 2-10 міс. передувати клінічній симптоматиці раку печінки L. Leblane і співавт. (1973) спостерігали підйом АФП у 6 з 9864 сенегальців, які не пред`являли жодних скарг. В подальшому при детальному клінічному обстеженні у них був діагностований гепатоцелюлярний рак. Однак ще в 3 випадках встановлено хоча б діагноз, хоча рівень АФП в крові був нормальним. При обстеженні 343 999 китайців [The Coordinating ..., 1974] діагноз первинного раку печінки був поставлений на підставі підвищеної концентрації АФП в крові 147 особам без будь-яких інших ознак пухлинного процесу-надалі тільки 18 випадків виявилися хибнопозитивними. Повідомляється про «доклінічній» іммунодіагностікі гепатоцелюлярного раку у 5 з 200 спостерігалися хворих на цироз печінки [Lehmann F., 1975]. Таким чином, АФП придатний для раннього виявлення первинного раку печінки.
Тератокарциномах яєчка і яєчників характеризується підвищеним вмістом АФП в крові більш ніж в 90% випадків. У цих випадках концентрація АФП майже завжди вище 1 мг / л сироватки, а у дорослих хворих така кількість виявляється не більше ніж в 40% випадків, в інших воно нижче. Пухлини статевих залоз, що відбуваються не з елементів жовтковиммішка, хоча і зародкового типу (семиноми, дісгерміноми, хориокарциноме, зрілі тератоми), ніколи не супроводжуються продукцією АФП [Абелем Г. І., Ансель Елгорт Д. А., 1978], що лежить в основі диференціальної діагностики таких пухлин від тератокарціном. Однак в АФП-позитивних випадках слід мати на увазі можливість змішаного будови пухлини, наприклад наявність в семіноме елементів жовтковиммішка.
При пухлинах інших локалізацій підвищення АФП в крові спостерігається вкрай рідко, і при цьому його концентрація, як правило, не перевищує 25 - 500 мкг / л в сироватці. Такі ж кількості присутні зазвичай в сироватці хворих з метастазами в печінку пухлин інших локалізацій і перш за все - шлунково-кишкового тракту. Тому стійкий рівень АФП вище 1 мг / л сироватки крові найчастіше свідчить або про гепатоцелюлярному раку, або про тератокарциномах статевих залоз.
Після радикального хірургічного втручання або успішного хіміотерапевтичного лікування АФП-продукує новоутворення концентрація маркера в крові протягом декількох днів знижується до нормальних величин. (Період напіврозпаду АФП становить 5 діб). Подальше наростання АФП свідчить про рецидив або метастазировании пухлини. Нерідко воно відбувається ще до появи клінічних симптомів і може служити підставою для повторного оперативного або іншого лікування. Таким чином, АФП може бути прогностичним пухлинних маркером. Однак слід мати на увазі, що в ряді випадків зникнення АФП з крові лікованих хворих гепатоцелюлярний рак не є свідченням радикальності лікування. Пояснюється це тим, що АФП синтезується стовбуровими гепатоцитами, а коммітірованних в один із напрямів диференціювання. Якщо до цитостатичної дії виявиться чутливим тільки такий клон, то це призведе до помилково негативні діагнозу.
Оскільки концентрація АФП у хворих гепатоцелюлярний рак і тератокарциномах статевих залоз в більшості випадків досить висока, для імунодіагностичних цілей прийнятні всі широкодоступні іммунодіффузіонние методи. Більш того, специфічність діагностики при використанні методів з низькою чутливістю (1 - 3 мг / л) істотно вище, ніж при використанні, наприклад, високочутливого радиоиммунологического аналізу, вловлює в 1000 разів менші концентрації антигену в розчинах. Це цілком зрозуміло, якщо врахувати вищевикладені дані про незначні транзиторні підвищеннях його рівня в сироватці крові при різних непухлинних захворюваннях.
Раковоембріональний антиген - глікопротеїн з молекулярною масою близько 200000, який синтезується у великій кількості ентероцитами кишечника 3 - 6-місячного плоду. Виявляється в амніотичної рідини, крові і меконію. У дорослих зміст РЕА в сироватці дуже низька (менше 2,5 - 5 мкг / л). У хронічних курців ці цифри вище.
Специфічність РЕА для диференціальної діагностики нижче, ніж АФП. З найбільшою сталістю (до 90% випадків) він підвищений в крові хворих на рак товстої кишки (причому частіше лівого відділу) і підшлункової залози. За узагальненими даними, РЕА виявляється також у 25 - 40% хворих на рак легені, близько 40% хворих саркома, 15% хворих меланома, 20 - 30% хворих пухлинами яєчників, 30 - 50% хворих медулярний рак щитовидної залози і сечового міхура, у 20 % хворих на рак шийки матки і 20 -30% -раком молочної залози, рідше у хворих пухлинами інших локалізацій. Як правило, високодиференційовані раки активніше продукують РЕА. Рівень РЕА підвищений також в сироватці 50 - 70% хворих виразковими колітами і термінальним ілеїт (хвороба Крона), панкреатити, алкогольним цирозом печінки, у 15% хворих доброякісними поліпами товстої кишки. При інфекціях сечового міхура РЕА визначається в сечі більш ніж у 50% хворих.
Є спадкова схильність до інтенсивного синтезу РЕА. Серед членів «високораковие» сімей, особливо у близьких родичів хворих із злоякісними пухлинами легень, молочної залози, товстої кишки, нерідко спостерігається підвищена концентрація РЕА [Guirgis Н. et al., 1978]. Цікаво, що РЕА може бути підвищений також у подружжя онкологічних хворих, що свідчить про роль факторів навколишнього середовища в експресії синтезу цього маркера. Причини такої відсутності адресності РЕА криються, можливо, в використанні різними групами дослідників нестандартизованих сироваток до дуже подібним, але не ідентичним антигенними детерминантам. В. Я. Рогальський (1975) вважає, що РЕА - нормальний продукт слізепродуцірующіх клітин і його підвищення при пухлинах - лише результат посиленої секреції. Не виключено, що РЕА-продукт пролиферирующих стовбурових клітин. У всякому разі, в експериментах на тваринах з інтенсивної посттравматичній пролиферацией ентероцитів спостерігалося таке ж підвищення РЕА, як і при індукованих пухлинах товстої кишки [Пожарісскій К. М., Окулов В. Б., 1976].
Зміст РЕА в сироватці онкологічних хворих зазвичай не перевищує 40 - 70 мкг / л. Метастази РЕА- продукує пухлини також синтезують цей глікопротеїн. Встановлено кореляцію рівня РЕА в крові зі стадією процесу і розмірами пухлини. Якщо при раку товстої кишки, локалізованому в слизовій оболонці, РЕА підвищений у 20% хворих, то при проростанні пухлини в підслизовий шар він підвищений вже у 50% хворих, а при наявності метастазів в печінку - у 100% хворих. Схожа залежність продемонстрована у хворих на рак молочної залози. Це робить РЕА малопридатним для раннього виявлення новоутворень при масових обстеженнях осіб, що становлять групи підвищеного ризику. Є, однак, повідомлення, що підвищений рівень РЕА був єдиною ознакою новоутворення кишечника, на 2 - 6 міс. передували клінічними проявами хвороби.
РЕА виявився надійним маркером при контролі за ефективністю лікування хворих. Вже через кілька днів після радикального видалення пухлини вміст антигену в крові нормалізується. До аналогічного результату приводить успішне хіміотерапевтичне або променеве лікування-в цих випадках кореляція спостерігається в 70 - 90% випадків. Якщо РЕА присутній в сечі хворих на рак сечового міхура, бронхіальному секреті хворих на рак легені або калі хворих на рак товстої кишки, то після радикального видалення пухлини РЕА в них не визначається. Паліативне лікування не супроводжується зниженням концентрації РЕА в крові. Більш того, якщо після хірургічного втручання зниження її не відбувається, то це вважається несприятливим прогностичним ознакою.
Новий підйом вмісту РЕА свідчить про рецидив пухлини або про розвиток метастазів і в 60 - 70% випадків спостерігається за 5 - 12 міс. до появи клінічної симптоматики. Зарубіжні клініцисти розглядають такий підйом як безумовне показання до повторної діагностичної операції (second look operation). Для того, щоб вчасно діагностувати прогресування процесу, визначення РЕА виробляють не рідше 1 разу на 2 міс., І тоді в переважній більшості випадків рецидив пухлини виявиться операбельним.
Певне прогностичне значення може мати рівень РЕА до лікування, так як у хворих пухлинами одного гистогенеза тривалість життя після встановлення діагнозу зазвичай коротше у випадках з більш високою концентрацією РЕА в крові. Така ж залежність характерна для хворих з дисемінований формами раку. Слід зауважити, що інформативність результатів істотно підвищується при динамічному спостереженні за рівнем РЕА.
Робляться спроби використовувати антитіла до РЕА в якості носія радіонуклідів для сканування пухлин товстої кишки і їх метастазів. При дотриманні деяких умов, що виключають неспецифичность розподілу і фіксації мічених антитіл, результати виявляються цілком задовільними.
Хоріонічний гонадотропін, відомий з 1927 р завдяки роботам Ашгейма і Цондека, почав застосовуватися в якості маркера пухлин після відкриття у нього антигенних властивостей і розробки високочутливих методів визначення [Vaitukaitis J. et al., 1972] .ХГ є глікопротеїн з молекулярною масою близько 60000 і складається з а- і (3-ланцюги-в останній локалізована специфічна імунохімічний детермінанта. у здорових жінок ХГ синтезується починаючи з 6-го дня вагітності, і концентрація його в сечі досягає максимуму до 60-му дню- після 18 тижнів. кількість ХГ знижується.
Основним онкологічним захворюванням, при якому є високий рівень ХГ в крові, є метастатична хоріонепітеліома, при якій він визначається в 100% випадків, при цьому, як і при вагітності, є кореляція між вмістом ХГ в сечі і крові хворих. Якщо добова екскреція ХГ з сечею перевищує 100000 ME *, то прогноз найчастіше несприятливий. Простежується чітка зворотна кореляція між кількістю екскретувалась ХГ і виживання хворих, що може бути відображенням прямої кореляції між пухлинної масою (включаючи метастази) і концентрацією ХГ в крові.

* В залежності від ступеня очищення 1 ME відповідає 50-200 нг.

Ефективне лікування супроводжується зникненням ХГ з крові і сечі через 6-12 тижнів. Якщо протягом наступних 3 - 4 тижні. нового підйому не відбувається, то це можна розглядати як показник стійкої ремісії, а відсутність підйому протягом 3 міс. в 95% випадків гарантує повне вилікування.
Іншою патологією, яка характеризується наявністю ХГ в сечі і крові хворих, є новоутворення яєчка. Залежно від гістологічної будови пухлини ХГ виявляється радиоиммунологическим методом у 15 - 55% хворих, найбільш часто при ембріональної карциноми. Як правило, чим більше пухлина, тим вище рівень ХГ в крові. Зникнення ХГ після лікування свідчить про радикальність останнього, а повторний підйом - про рецидив хвороби. При пухлинах іншого гістогенезу ХГ визначається у 5 - 30% хворих [Braunstein G., 1979], і при цьому зміст його в сироватці крові не перевищує 10 мкг / л. Проте зміна концентрації цього маркера в процесі лікування і подальшого спостереження за хворими з нетрофобластіческімі пухлинами може виявитися вельми корисним.
Укладаючи розбір практичної цінності імунологічних пухлинних маркерів, необхідно підкреслити, що тільки динамічне або як мінімум неодноразове визначення їх рівня у хворих надає клініцисту вагомі додаткові можливості в діагностиці, збільшуються при одночасному визначенні двох і більше маркерів.
Викладений матеріал свідчить про те, що цей підхід до іммунодіагностікі пухлин розроблений досить детально і вже впроваджений в практику великих онкологічних установ у нас в країні і за кордоном. Результати, одержані різними установами, цілком порівнянні, що дозволяє узагальнювати їх і робити відповідні висновки. Цьому буде в значній мірі сприяти впровадження в лабораторну практику комерційних моноклональних антитіл, так як вони, будучи продуктом нащадків однієї клітини-продуцента, абсолютно «моноспеціфічни».
Що стосується двох інших підходів,
про які йтиметься нижче, то тут робити серйозні узагальнення поки передчасно, так як результати, одержувані в різних лабораторіях, істотно відрізняються один від одного, а нерідко й суперечливі. Тому тут вони викладені в загальних рисах *.

* Більш детально див. Immunodiagnosis of cancer, 1979- Immunodiagnosis and immunotherapy of the malignant tumours, 1979, а також підрозділи «Лабораторні методи діагностики» і «Вплив внутрішнього середовища на виникнення і розвиток пухлин».

Виявлення імунної відповіді на асоційовані з пухлинами антигени.
Вище вже було зазначено, що чітких доказів існування специфічних пухлинних антигенів поки не отримано. Однак вивчення системи імунітету у хворих дозволяє виявити в ній деяку перебудову, що може свідчити про антигенних відмінностях нормальних клітин від малігнізованих. Оскільки імунологічний відповідь розвивається і на дуже незначні кількості антигенів, можна очікувати, що він виникає вже на ранніх етапах пухлинного росту. З іншого боку, слід мати на увазі, що протипухлинні реакції організму можуть не проявлятися на тлі зниженої імунореактивності хворих, що особливо часто спостерігається у деяких стадіях пухлинної хвороби.
Виявлення протипухлинного імунітету для діагностичних цілей ґрунтується на вивченні реакцій клітинного і гуморального імунітету. Серед перших найбільш уживані: внутрішньошкірна проба на водносолевого екстракти пухлин, специфічна цитотоксичність лімфоцитів до пухлинних клітин, пригнічення міграції лейкоцитів пухлинними антигенами, проліферація лімфоцитів під дією пухлинних антигенів, електрофоретична рухливість макрофагів, пригнічення прилипання лейкоцитів. Гуморальний протипухлинний імунітет досліджується за допомогою реакцій, що дозволяють визначати антитіла проти пухлинних клітин і так звані блокуючі антитіла, імунні комплекси і рівень імуноглобулінів різних класів.
Внутрішньошкірні проби на пухлинні антигени є найбільш простими для виконання. Вони виявилися позитивними у хворих на рак кишечника, молочної залози, меланому, гострим лейкозом. Зокрема, під час останньої патології вдалося простежити залежність напруженості імунітету від стадії захворювання. Вважається, що проба може бути використана для прогнозування: чим виражено шкірна реакція на асоційований з пухлиною антиген, тим більш напруженими імунітет, тим краще прогноз. Можливий імунну відповідь на пухлинні антигени на «доклінічній» стадії передбачає практичну цінність внутрішньошкірної проби для скринінгу осіб, що становлять групи підвищеного ризику. Однак введення навіть безклітинних пухлинних екстрактів практично здоровим людям не можна вважати абсолютно безпечною маніпуляцією, тому проба не знайшла широкого застосування. Для цього можна використовувати екстракти ембріональних тканин, і такі дослідження вже проводяться.
Вивчення цитотоксичних властивостей лімфоцитів хворих по відношенню до пухлинних клітин засноване на роботах I. Hellstrom і співавт. (1971), вперше продемонстрували цей феномен. Тест найбільш специфічний для оцінки протипухлинного імунітету, однак в силу чималих труднощів виконання великого практичного значення в даний час не має і частіше використовується в фундаментальних дослідженнях.
Більше застосування має реакція придушення міграції лейкоцитів у присутності пухлинного антигену, яка є інформативною не тільки в аутологічної, але і в гомологичной системі, т. Е. Спостерігається в присутності екстрактів пухлин одного гистогенеза, отриманих від різних хворих. У ряді випадків вдалося продемонструвати спільність антигенів в пухлинах різного гістогенезу. Реакція з успіхом застосовувалася у хворих на рак молочної залози, шлунка і кишечника, меланомою, лімфоми і лейкози. Найбільш тісна кореляція відмічена між результатами реакції і прогнозом. Специфічність та інформативність методу може бути підвищена при паралельній постановці з аутологічної і донорської сироватками.
Слід згадати також про тест прилипання лейкоцитів, заснованому на різній здатності сенсибілізованих і інтактних лімфоцитів прикріплятися до внутрішньої поверхні спеціальних лабораторних планшетів або пробірок в присутності аутологічних або алогенних (стандартних) пухлинних екстрактів. Є повідомлення про те, що при дотриманні ряду методичних прийомів цей метод цілком інформативний. Зокрема, передопераційна реактивність хворих корелює з тривалістю життя.
Останнім часом привертає увагу метод визначення електрофоретичної рухливості макрофагів в присутності пухлинних екстрактів [Pritchard J. et al., 1973]. Метод має високу специфічність, і результати в 60 - 80% випадків корелюють зі стадією пухлинного процесу. Однак ряд недоліків не дозволяє впровадити метод в широку практику.
Є поодинокі спостереження за кореляції титру протипухлинних гуморальних антитіл і блокуючих антитіл до клінічного стану хворих. Більшого практичного значення має визначення гуморальних антитіл до антигену, асоційованого з вірусом Епстейна - Барр у хворих лімфомою Беркітта і назофарингеальної карциномою. Титр таких антитіл підвищений практично у 100% хворих, що використовується для диференціальної діагностики, а в деяких випадках для контролю за клінічним станом хворих.
Імунодіагностичних значення реакцій протипухлинного імунітету обмежується тим, що відповідь організму на пухлинні антигени індивідуальний і залежить від багатьох факторів. Загальним моментом, що перешкоджає широкому впровадженню даного підходу в практику, є відсутність високоочищених пухлинних антигенів, так що використання багатокомпонентних екстрактів вносить додаткові складності в інтерпретацію результатів. Тому тільки динамічне спостереження за станом протипухлинного імунітету в порівнянних умовах допоможе клініцисту у вирішенні лікувальних завдань.
Визначення «неспецифічних» показників імунітету для діагностики пухлин. Теорія імунного нагляду Бернетт увазі, що пухлини виникають на фоні зниженої реактивності імунної системи організму. Незважаючи на те, що ця теорія значною мірою переглянута, оскільки багато її положень не підтверджуються експериментальними і клінічними спостереженнями, у багатьох випадках у хворих, які страждають пухлинами, вдається виявити зниження иммунокомпетентности.

Одним з найбільш поширених методів є внутрішньошкірна проба на дінітрохлорбензол (ДНХБ). Сенсибилизирующей і роздільною ін`єкціями цього препарату визначається здатність організму відповідати реакцією гіперчутливості уповільненої типу на антиген, з яким організм раніше не зустрічався. Відповідь на нього тимус залежний і характеризує стан клітинного імунітету. Проба проста у виконанні і на початку 70-х років отримала повсюдне поширення. Було встановлено зниження реактивності на ДНБХ у хворих з пухлинами практично всіх локалізацій. У хворих неоперабельним раком легені і шийки матки показано погіршення результатів проби в залежності від тяжкості прогнозу. Є відомості про зміну чутливості до ДНХБ і при післяопераційних рецидивів пухлин зазначених локалізацій, а також про кореляції зі стадією процесу. Разом з тим широка варіабельність результатів знижує діагностичну цінність проби. Крім того, наступні введення препарату здійснюються вже на сенсибилизированном організмі, що перешкоджає застосуванню проби в динаміці захворювання.
Здатність імунокомпетентних лімфоцитів відповідати на вплив митогенами рослинного походження (наприклад, фитогемагглютинином) реакцією трансформації в бластні форми є показником їх функціональної спроможності. У хворих з пухлинами ця реакція знижена, проте, за узагальненими даними, достовірно це визначається лише в далеко зайшли стадіях хвороби. Суттєвою кореляції між ступенем пригнічення реакції бласттрансформації лімфоцитів і прогнозом не знайдено.
Щодо надійним показником імунного статусу організму є кількість циркулюючих Т- і В-лімфоцитів. Їх визначення в онкологічній практиці набуло широкого поширення після виявлення на поверхні Т-клітин людини рецепторів до еритроцитів барана і розробки методу розеткоутворення [Brain P. et al., 1970]. Існують модифікації методу, що дозволяють визначати основні субпопуляції лімфоцитів і причини зниження їх функціональної активності. Основний висновок, який можна зробити з величезного числа робіт по застосуванню цього методу в онкології, полягає в тому, що кількість функціонально активних Т-клітин у хворих з пухлинами знижено відповідно до тяжкості процесу. Воно зазвичай повертається до норми при стійких ремісії, знову знижуючись при прогресуванні захворювання. В силу цього, а також з урахуванням простоти виконання і відсутності необхідності в спеціальному обладнанні метод може бути поставлений на службу комплексного обстеження хворих в будь-якому клінічному закладі. Однак накопичені численні відомості про можливості поєднання нормальної розеткообразующіх здатності з рецидивом, метастазированием і навіть генерализацией процесу і, навпаки, можливість тривалих ремісій при низьких показниках ставлять під сумнів імунодіагностичних і, тим більше, прогностичну цінність методу. Однак ці труднощі можуть бути подолані при спостереженні за імунологічними показниками конкретного хворого в динаміці процесу.
Зниження функціональної активності лімфоцитів хворих із злоякісними пухлинами знаходить своє відображення в недостатньому синтезі ними ряду речовин (лімфокінів), необхідних для кооперації відповідних клітин в імунній відповіді. Існують методи, що дозволяють судити про такі порушення, однак вони практично не використовуються в клініці.
Оцінюючи в цілому діагностичну цінність показників імунного статусу, слід мати на увазі їх значну варіабельність. Нерідко, наприклад, кількість розеткообразующіх або відповідають на мітогенного стимуляцію Т-лімфоцитів у хворого істотно змінює